Хелпикс

Главная

Контакты

Случайная статья





  СЕМЕНА 22 страница



  По формулам II. 3. 5 и II. 3. 6 получаем:

  

                 Ь = - 75, 2 / 0, 602 = -124, 9;

  

              M' = - 49, 67 / (-124, 9) = 0, 3977.

  

  Поскольку в данном испытании средние дозы стандартного и

испытуемого препаратов не совпадают, то надо из M' вычесть

величину

  

          lg 0, l + lg 0, 4 + lg l, 6 lg 0, 1 + lg 0, 4

          ------------------------ - --------------- =

                      3                2

  

                   = - 0, 3980 + 0, 6990 = 0, 3010,

так что

                                        0

         М = 0, 3977 - 0, 3010 = 0, 0967; D /D = 124, 9%.

  

Далее вычисляем по формулам II. 3. 9 и II. 3. 8:

  

                          2

             77, 66 х 1, 960

         g = ------------- = 0, 0191; 1 - g = 0, 9809;

                        2

               (- 124, 9)

  

                   0, 0967        1, 96

            M = ------- +/- ------------------ x

             H, B 0, 9809 (- 124, 9) х 0, 9809

  

      --------------------------------

  x \/ 58, 63 х 0, 9809 + 77, 66 х 0, 0961 = [- 0, 0235; 0, 2207].

  

Окончательно получаем:

  

                   0

                 (D /D) = [94, 7%; 166, 2%].

                       H, B

  

  Доверительные интервалы во всех этих испытаниях могут быть

сужены, если использовать в опыте сопряженные группы животных.

Например, в испытании типа 2; 2 целесообразно использовать n

четверок животных, каждая из которых содержит животных из одного

помета, одинакового пола и близкой массы тела; каждая четверка

                                                         0 0

животных используется для определения четверки значений: у1; у2,

у1 и у2. При такой постановке опыта

  

                           2         2

                      SUM d - SUM " ДЕЛЬТА"

                  V = ---------------------,       (II. 3. 11)

                           3n(n - 1)

   2

где d - числитель формулы II. 3. 2, а

  

          2    0 0          _0 _0 _ _ 2

SUM " ДЕЛЬТА" = SUM [(у1 + у2 + у1 + у2) - (у1 + у2 + у1 + у2)].

                                                       (II. 3. 12)

  

Число степеней свободы равно f = 3(n - 1).

  Доверительный интервал может быть также сужен, если методика

испытания допускает выполнение повторных определений на каждом

животном - с достаточным разрывом во времени, обеспечивающем

восстановление исходного состояния после первого опыта. В

повторном опыте те животные, на которых определялась активность

0

у, используются для определения у и наоборот. Кроме того,

животные, получившие в первом опыте меньшую дозу, получают во

втором опыте большую дозу и наоборот (метод двойного перекреста,

см. табл. II. 3. 2).

  

                                                  Таблица II. 3. 2

  

---------T------------T------------T-----------------------------

¦ Группа ¦ Первый ¦ Второй ¦ Разность результатов ¦

¦животных¦ опыт ¦ опыт ¦                        ¦

+--------+------------+------------+-----------------------------+

¦   ¦ 0 ¦       ¦               0   ¦

¦1  ¦ у1 ¦ у2 ¦ ДЕЛЬТА1 = у2 - у1    ¦

+--------+------------+------------+-----------------------------+

¦   ¦ 0 ¦       ¦               0   ¦

¦2  ¦ у2 ¦ у1 ¦ ДЕЛЬТА2 = у1 - у2    ¦

+--------+------------+------------+-----------------------------+

¦   ¦       ¦ 0 ¦          0        ¦

¦3   ¦ у1 ¦ у2 ¦ ДЕЛЬТА3 = у2 - у1    ¦

+--------+------------+------------+-----------------------------+

¦   ¦       ¦ 0 ¦          0        ¦

¦4  ¦ у2 ¦ у1 ¦ ДЕЛЬТА4 = у1 - у2    ¦

L--------+------------+------------+------------------------------

  

При таком построении испытания надо пользоваться формулами:

  

        ______ ______ ______ ______

   E = (ДЕЛЬТА1 - ДЕЛЬТА2 + ДЕЛЬТА3 - ДЕЛЬТА4) / 4; (II. 3. 13)

  

        ______ ______ ______ ______

   F = (ДЕЛЬТА1 + ДЕЛЬТА2 - ДЕЛЬТА3 - ДЕЛЬТА4) / 4; (II. 3. 14)

  

                 ______ 2             ______ 2

  SUM (ДЕЛЬТА1 - ДЕЛЬТА1) + SUM (ДЕЛЬТА2 - ДЕЛЬТА2)

   n                     n

V = ------------------------------------------------------ +

                       8n(n - 1)

                                                       (II. 3. 15)

                 ______ 2             ______ 2

  SUM (ДЕЛЬТА3 - ДЕЛЬТА3) + SUM (ДЕЛЬТА4 - ДЕЛЬТА4)

   n                     n

+ -----------------------------------------------------;

                       8n(n - 1)

  

                                      2

                    А = V/2, B = V/(2I ).          (II. 3. 16)

  

  Дальнейшие расчеты производят по формулам II. 3. 5 - II. 3. 10,

причем t(P, f) берется из табл. II приложения для числа степеней

свободы f = 4 (n - 1).

  Пример II. 5. В табл. II. 3. 3. приведены результаты испытания

(стандартизация образца АКТГ), построенного по методу двойного

перекреста (в примере II. 4 эти же данные были использованы в

умышленно рандомизированном виде, чтобы не сказывался эффект

сопряженности тест - объектов). По формулам II. 3. 13 - II. 3. 16

(получаем):

  

            Е = (-90 - 66 - 68 - 101)/4 = -81, 25;

  

            F = (-90 + 66 + 68 - 101)/4 = -14, 25;

  

      V = (1178 + 104 + 258 + 546)/(8 х 3 х 2) = 43, 46;

  

                                              2

     А = 43, 46/2 = 21, 73; В = 43, 46/(2 х 0, 602 ) = 59, 96

  

                (I = lg 0, 4 - lg 0, 1 = 0, 602);

  

        кроме того, f = 4 х 2 = 8, t (95%, 8) = 2, 306.

  

Теперь по формулам II. 3. 5-II. 3. 10 находим:

  

                  Ь = -81, 25/0, 602 = -135, 0;

  

                                         0

        M = -14, 25 / (-135, 0) = 0, 1056; D /D = 127, 6%;

  

                     2     2

    g = 59, 96 х 2, 306 / (-135, 0) = 0, 0175; 1 - g = 0, 9825;

  

                               0, 1056

                        М = ------ +/-

                         H, B 0, 9825

  

                          --------------------------------

           2, 306    /                          2

  +/- ---------------- \/ 21, 73 х 0, 9825 + 59, 96 х 0, 1056 =

      - 135, 0 х 0, 9825

  

           = 0, 1075 +/- 0, 0816 = [0, 0259; 0, 01891];

  

                  0

                (D /D) = [106, 1%; 154, 6%].

                      H, B

                              0

  Доверительный интервал для D /D получился более узким, чем без

учета сопряженности тест - объектов (см. пример II. 4), хотя

использовано меньше результатов испытаний.

  Когда имеются результаты нескольких независимых определений

эквивалентных доз, их можно объединить с целью получения более

                 0

точной оценки для D /D и более узкого доверительного интервала для

этой величины. При этом пользуются приближенными формулами (точные

формулы весьма громоздки):

                         _

                _   M

                M = ------ +/- t(P, f)S,       (II. 3. 17)

                 H, B 1 - g         M

  

                 _

                 M          Mj

               ------ = SUM (Wj -----) / SUM Wj; (II. 3. 18)

               1 - g       1 - g

                                        j

  

                                  -------

                      S = 1 / \/ SUM Wj,        (II. 3. 19)

                       M

                                                             2

где весовыми коэффициентами Wj, служат обратные дисперсии 1 / s:

                                                             Mj

                          2    2

                         b (1 - g )

                1    j j

          Wj = ---- = -------------------;         (II. 3. 20)

                2                 2

               s Аj(1 - g ) + BjMj

                Mj       j

  

j = 1, 2, ..., k есть номер испытания, a t(P, f) берется для числа

степеней свободы, равного сумме чисел степеней свободы отдельных

испытаний: f = SUM f. Доверительный интервал для усредненного

         0       j

отношения D /D находят по формуле:

             _

           (D0/D) = antilg(2 + M ).           (II. 3. 21)

                 H, B          H, B

  

  Законность указанного объединения (т. е. случайности различия

между отдельными М) проверяют при помощи критерия " хи - квадрат":

  

                 2     -          2

  2         Mj    ¦     Mj ¦

" хи" = SUM (Wj --------- ) - ¦SUM (Wj ------)¦ / SUM Wj (II. 3. 22)

                   2 2 ¦   1 - g ¦

             (1 - g )      L        j -

                   j

  

               2 2               2

должно быть " хи" < " хи" (95%, f), где " хи" (95%, f) берут из

табл. II

  

                                                  Таблица II. 3. 3

  

-------T---------------T---------------T------T---------------T----

¦Группа¦1-й день опыта ¦2-й день опыта ¦" ДЕЛЬ-¦d = " ДЕЛЬТА" - ¦ 2 ¦

¦ ¦          ¦          ¦ТА" ¦ ______ ¦d ¦

¦ ¦          ¦          ¦ ¦- " ДЕЛЬТА" ¦ ¦

+------+---------------+---------------+------+---------------+----+

¦1 ¦       370¦       273¦- 97 ¦- 7       ¦49 ¦

¦ ¦ 0        ¦          ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦y1     342¦y2     279¦- 63 ¦ 27      ¦729 ¦

¦ ¦ 0        ¦          ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦D1 = 0, 1 ЕД 335¦D2 = 0, 4 ЕД 225¦- 110 ¦- 20      ¦400 ¦

¦ ¦          ¦Сумма     ¦- 270 ¦ 0       ¦1178¦

¦ ¦          ¦Среднее   ¦- 90 ¦          ¦ ¦

¦2 ¦       255¦       313¦ 58 ¦- 8       ¦64 ¦

¦ ¦ 0        ¦          ¦ ¦          ¦ ¦

¦  ¦y2     268¦y1     340¦ 72 ¦ 6       ¦36 ¦

¦ ¦ 0        ¦          ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦D2 = 0, 4 ЕД 284¦D = 0, 1 ЕД 352¦ 68 ¦ 2       ¦4 ¦

¦ ¦          ¦Сумма     ¦ 198 ¦ 0       ¦104 ¦

¦ ¦          ¦Среднее   ¦ 66 ¦          ¦ ¦

¦3 ¦       310¦       247¦- 63 ¦ 5       ¦25 ¦

¦ ¦          ¦ 0        ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦y1       356¦y2     296¦- 60 ¦ 8       ¦64 ¦

¦ ¦          ¦ 0        ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦D1 = 0, 1 ЕД 345¦D2 = 0, 4 ЕД 264¦- 81 ¦- 13      ¦169 ¦

¦ ¦          ¦Сумма     ¦ 204 ¦ 0         ¦258 ¦

¦ ¦          ¦Среднее   ¦- 68 ¦          ¦ ¦

¦4 ¦       276¦       369¦ 93 ¦- 8       ¦64 ¦

¦ ¦          ¦ 0        ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦y2     228¦y1     318¦ 90 ¦- 11      ¦121 ¦

¦ ¦          ¦ 0        ¦ ¦          ¦ ¦

¦ ¦D2 = 0, 4 ЕД 252¦D1 = 0, 1 ЕД 372¦ 120 ¦ 19      ¦361 ¦

¦ ¦          ¦Сумма     ¦ 303 ¦ 0       ¦546 ¦

¦ ¦          ¦Среднее   ¦ 101 ¦          ¦ ¦

L------+---------------+---------------+------+---------------+-----

  

приложения для числа степеней свободы f = k - 1 (k - число

объединяемых испытаний).  В частности, когда объединяются

результаты двух испытаний, то

  

  

                       - M1  M2  

                   W1W2¦------ - ------ ¦

                2 L1 - g1 1 - g2 -

            " хи" = -------------------------      (II. 3. 23)

                          W1 + W2

  

                      2

при f = 1, так, что " хи" (95%, 1) = 3, 84.

  

          II. 4. ПРИМЕНЕНИЕ СХЕМЫ ЛАТИНСКОГО КВАДРАТА

  

  При биологическом испытании  антибиотиков методом диффузии в

агар на лотках наиболее употребительна схема латинского квадрата,

позволяющая рандомизировать неоднородность бактериальной культуры

по обоим направлениям поверхности питательной среды. Например, в

случае испытания 2; 2 дозы могут располагаться следующим образом:

  

          0 0

         D1 D2 D1 D2

  

                0 0

         D2 D1 D2 D1

                                                        (II. 4. 1)

                      0 0

         D1 D2 D1 D2

  

          0            0

         D2 D1 D2 D1

  

  Здесь каждая доза встречается по одному разу в каждой строке и

в каждом столбце. В данном случае последовательные строки получены

циклической перестановкой из предыдущих строк, но это не

единственный способ построения латинского квадрата. Например,

можно переставлять столбцы или строки (или и то, и другое) из

приведенной выше схемы по жребию. В руководствах по планированию

эксперимента можно найти и другие схемы.

  Если для стандартного и испытуемого препаратов используются

по три дозы, то соответствующий латинский квадрат будет иметь

шесть строк и шесть столбцов и т. д. При двух дозах стандартного

и двух дозах испытуемого препарата можно построить латинский

квадрат 8х8, располагая дозы так, чтобы каждая встречалась по два

раза в каждой строке и в каждом столбце.

                                                             0

  Введем следующие обозначения: k - число строк в квадрате; r и

r - соответственно число использованных доз стандартного и

                                                              0

испытуемого препаратов (например, при размещении четырех доз D1,

0                                       0

D2, D1, D2 в квадрате 8х8 будет k = 8, r = 2, r = 2, а для

                         0

квадрата II. 4. 1: k = 4, r = 2, r = 2); у - эффективность в

                                          ij

ячейке квадрата на пересечении i-й строки и j-го столбца

(независимо от того, относится эта эффективность к стандартному

                             _             _

или испытуемому препарату); у = SUM у /k и у = SUM у / k -

                              i j ij j  ij

средние эффективности соответственно для строки i и для столбца j;

  

                          2  _      _

        у = SUM y /k = SUM у /k = SUM у / k

               i, j i, j   i i  j j

  

- общая средняя эффективность для всего комплекса. Тогда

  

                   2 - 2      2

              SUM d - k ¦SUM d + SUM d ¦

              j, i   L i i j j-

          V = -----------------------------,       (II. 4. 2)

                    2    0

                 n(k - 2k - r - r + 2)

  

        2  -       _ 2  -       _ 2

где SUM d = SUM ¦SUM (у - у ) ¦ = SUM ¦SUM (у - у ) ¦,

             i L j i, j i - j L i, j j -

  

        2   _ _ 2     2   _    _ 2

   SUM d = SUM (у - у ), SUM d = SUM (у - у ),

        i i i            j j j

  

а n - число испытаний при каждой дозе стандартного или испытуемого

препарата. Остальные расчеты производятся по формулам предыдущего

параграфа, причем t(P, f) берутся из табл. II приложения для числа

степеней свободы f = (k -1)(k - 2).

  

  Пример II. 6. В табл. II. 3. 3 приведены результаты совместного

испытания стандартного и испытуемого препаратов неомицина при

дозах 100 и 200 мкг в 1 мл; активность характеризуется диаметром

зоны угнетения в миллиметрах. Использован латинский квадрат вида

(II. 4. 1). В этой же таблице показаны расчеты, приводящие к

              2    2

величинам SUM d и SUM d, а в табл. II. 4. 2 показано вычисление

         i i j j                2

средних дозовых эффективностей и величины SUM d.

                                        i, j

                       2

  Таким образом, SUM d = 14, 00 + 28, 75 + 5, 00 + 8, 75 = 56, 50,

                  i, j

                                            0

а так как в данном случае n = 4, k = 4, r = 2, r = 2, то по

формуле II. 4. 2 получаем:

  

               56, 50 - 4 x (5, 125 + 2, 125)

           V = --------------------------- = 1, 146.

                 4 x (16 - 8 - 2 - 2 + 2)

  

  Данное испытание относится к типу 2; 2, так что использование

соответствующего раздела табл. IV приложения вместе с формулами

II. 3. 4 - II. 3. 10 дает:

  

        G = 219, 0 - 230, 75 - 221, 50 + 232, 75 = - 0, 50;

  

                                     ---

     V = 4 х 1, 146 = 4, 584; ¦G¦ / / V = 0, 233 < 2, 447

      G                      \/ G

  

(t(95%, f) для f = (4 - 1)(4 - 2) = 6), поэтому одинаковость

наклонов двух дозовых прямых не отвергается; далее:

  

    Е = (- 219, 0 + 230, 75 - 221, 50 + 232, 75) / 2 = 11, 50;

  

     F = (- 219, 0 - 230, 75 + 221, 50 + 232, 75) / 2 = 2, 25;

  

                                                   2

A = V = 1, 146; I = lg 200 - lg 100 = 0, 301; B = V/I = 12, 65;

  

                                                 0

b = 11, 50/0, 301 = 38, 2; M = 2, 25/38, 2 = 0, 0589; D /D = 114, 5%;

  

                        2 2

       g = 12, 65 х 2, 447 /38, 2 = 0, 052; 1 - g = 0, 948;

  

                             0, 0589

                     M = ------- +/-

                      H, B 0, 948

  

                        --------------------------------

           2, 447  /                         2

    +/- ------------ \/ 1, 146 х 0, 948 + 12, 65 х 0, 0589 =

        38, 2 х 0, 948

  

           = 0, 062 +/- 0, 0718 = [- 0, 0097; 0, 1340];

  

                   0

                 (D /D) = 97, 8%; 136, 1%.

                       H, B

  

  При проведении испытания по методу латинского квадрата потеря

отдельных результатов нарушает всю схему расчетов, поэтому

необходимо " заместить" их надлежащими оценками. Проще всего это

можно сделать, подставив на место выпавшего результата среднее из

оставшихся результатов для той же дозы того же препарата.

Применяемый в дисперсионном анализе более сложный способ оценки

выпавшего значения не дает в задаче определения эквивалентных доз

существенного повышения точности общих результатов испытания.

  

                                                  Таблица II. 4. 1

  

----------------------------------------T-------T------T-----T------

¦                        _    ¦  ¦ ¦ ¦ 2 ¦

¦  Результаты испытания, у    ¦SUM у ¦ у ¦ d ¦ d ¦

¦                         ij  ¦ j ij¦ i ¦ i ¦ i ¦

+---------------------------------------+-------+------+-----+------+

¦ 0   0                       ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

¦у = 222 у = 229 у1 = 222 у2 = 235 ¦ 908 ¦227, 00¦1, 00 ¦1, 0000¦

¦ 1   2                       ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

+---------------------------------------+-------+------+-----+------+

¦     0   0              ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

¦у2 = 231 у = 217 у = 231 у1 = 220 ¦ 899 ¦224, 75¦-1, 25¦1, 5625¦

¦     1   2              ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

+---------------------------------------+-------+------+-----+------+

¦              0   0     ¦  ¦ ¦ ¦     ¦

¦у1 = 221 у2 = 233 у = 218 у = 228 ¦ 900 ¦225, 00¦-1, 00¦1, 0000¦

¦              1   2     ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

¦                                  ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

+---------------------------------------+-------+------+-----+------+

¦ 0                     0     ¦  ¦ ¦ ¦ ¦

¦у = 235 у1 = 223 у2 = 232 у = 219 ¦ 909 ¦227, 25¦1, 25 ¦1, 5625¦

¦ 2                     1     ¦  ¦ ¦ ¦    ¦

+---------------------------------------+-------+------+-----+------+

¦                                  ¦             2   ¦

¦SUM у 909 902 903 902 ¦ 3616   SUM d = 5, 12 ¦

¦ i i, j                          ¦         i i   ¦

¦                                  ¦ _                 ¦

¦у   227, 25 225, 50 225, 75 225, 50¦ у = 226, 00        ¦

¦ j                                ¦                      ¦

¦d   1, 25 - 0, 50 - 0, 25 - 0, 50¦                      ¦

¦ j                                ¦                      ¦

¦ 2                                ¦        2        ¦

¦d   1, 5625 0, 2500 0, 0625 0, 2500¦   SUM d = 2, 125 ¦

¦ j                                ¦    j j        ¦

L---------------------------------------+----------------------------

  

                                                  Таблица II. 4. 2

  

--------T------T---T--T------T------T-------T------T-----T----T------T------T------

¦  ¦ 0 ¦ ¦ 2¦ 0 ¦ ¦ 2 ¦ ¦ ¦ 2 ¦ ¦ ¦ 2 ¦

¦  ¦ y ¦ d ¦d ¦ y ¦ d ¦ d ¦ y1 ¦ d ¦ d ¦ y ¦ d ¦ d ¦

¦  ¦ 1 ¦ ¦ ¦ 2 ¦ ¦  ¦ ¦ ¦ ¦ 2 ¦ ¦ ¦

+-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------+------+------+

¦  ¦ 222 ¦ 3 ¦9 ¦ 229 ¦- 1, 75¦ 3, 0625¦ 222 ¦ 0, 5 ¦0, 25¦ 235 ¦ 2, 25 ¦5, 0625¦

¦  ¦ 217 ¦- 2¦4 ¦ 231 ¦ 0, 25¦ 0, 0625¦ 220 ¦- 1, 5¦2, 25¦ 231 ¦- 1, 75¦3, 0626¦

¦  ¦ 218 ¦- 1¦1 ¦ 228 ¦- 2, 75¦ 7, 5625¦ 221 ¦- 0, 5¦0, 25¦ 233 ¦ 0, 25 ¦0, 0625¦

¦  ¦ 219 ¦ 0 ¦0 ¦ 235 ¦ 4, 25¦18, 0625¦ 233 ¦ 1, 5 ¦2, 25¦ 232 ¦- 0, 75¦0, 5625¦

+-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------+------+------+

¦Сумма ¦ 876 ¦ 0 ¦14¦ 923 ¦ 0 ¦ 28, 75 ¦ 886 ¦ 0 ¦ 5 ¦ 931 ¦ 0 ¦ 8, 75 ¦

¦Среднее¦219, 00¦ ¦ ¦230, 75¦ ¦  ¦221, 50¦ ¦ ¦232, 75¦ ¦ ¦

L-------+------+---+--+------+------+-------+------+-----+----+------+------+-------

  

      II. 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ МЕТОДОМ

               ДИФФУЗИИ В АГАР НА ЧАШКАХ ПЕТРИ

  

  Описанная в предыдущем параграфе методика определения

активности антибиотиков по схеме латинского квадрата предполагает

использование лотков. Возможен и другой способ определения этой

активности - по диффузии в агар на чашках Петри. Ниже описан

трехдозный вариант этого метода < *>.

  --------------------------------

  < *> Этот раздел основан на разработке Всесоюзного НИИ

антибиотиков и Государственного НИИ по стандартизации и контролю

лекарственных средств Министерства здравоохранения СССР.

  

  Стандартный (S) и испытуемый (U) образцы растворяют из расчета

1 мг в 1 мл (основной раствор), затем готовят по три концентрации

                              S S S

рабочих растворов стандарта (D1, D2, D3) и испытуемого образца

U U U

(D1, D2, D3), относящиеся друг к другу как 1: 2: 4. Все 6

растворов закапывают на одну чашку Петри, причем

последовательность внесения растворов в цилиндры  или в лунки

должна быть случайной (возможные последовательности внесения

растворов приведены в табл. II. 5. 1). Число чашек n должно быть не

меньше 6.

  Для уменьшения влияния колебаний во времени между внесением

различных растворов рекомендуется после внесения растворов

выдерживать чашки в течение 1-2 ч при комнатной температуре. После

                                                 S      U

измерения зон угнетения роста результаты опыта у, и у

                                                 i, j    i, j

(i = 1, 2, 3 - номера доз, j = 1, 2, ..., n - номера чашек)

записывают в таблицу (как показано в приведенном ниже численном

примере). Там же записывают получаемые расчетом следующие

вспомогательные величины:

  

                       S          U

             Si = SUM у и Ui = SUM у            (II. 5. 1)

                   j i, j    j i, j

  

- суммы по чашкам для каждой дозы стандарта и испытуемого образца;

  

                          S      U

                Tj = SUM у + SUM у,         (II. 5. 2)

                      i i, j i i, j

  

- суммы по всем дозам для каждой чашки;

  

у = SUM у = (S1 + S2 + S3) +(U1 + U2 + U3) = SUM Tj (II. 5. 3)

   i, j i, j                                j

  

- суммы всех диаметров зон задержки роста по всем дозам и чашкам.

Далее вычисляют:

  

        S = S1 + S2 + S3 и  U = U1 + U2 + U3      (II. 5. 4)

  

- суммы всех диаметров зон задержки роста отдельно для стандарта и

для испытуемого образца;

  

              L = S3 - S1 и L = U3 - U1        (II. 5. 5)

               S           U

- " линейные контрасты" для стандарта и для испытуемого образца;

  

     Q = S1 - 2S2 + S3 и Q = U1 - 2U2 + U3    (II. 5. 6)

      S                  U

  

" квадратичные контрасты" для стандарта и для испытуемого образца.

  Для проверки законности дальнейших расчетов следует провести

дисперсионный анализ результатов опыта в соответствии с

табл. II. 5. 2, а именно должно получиться F < F(95%; f, fост) для

строк 2, 3, 4 и F > F (95%) для строки 1.

  Выполнение первого условия одновременно означает, что вариации

в этих строках 2, 3, 4 должны рассматриваться как случайные, и

поэтому их следует включить в остаточную вариацию, произведя также

перерасчет значимости линейной регрессии (кстати, это относится и

к вариациям в строках 5 и 6, если они окажутся незначимыми).

Разумеется, при указанном перерасчете степени свободы вариаций,

включаемых в остаточную вариацию, должны прибавляться к числу

степеней свободы последней (fост).

  

                                                  Таблица II. 5. 1

  

    Расположение растворов стандарта и испытуемого образца

        при трехдозном варианте метода диффузии в агар

  

------T--------------------------T-----T--------------------------

¦Номер¦Порядок внесения растворов¦Номер¦Порядок внесения растворов¦

¦чашек¦   в цилиндры   ¦чашек¦   в цилиндры   ¦

¦ +---T---T---T----T----T----+-----+----T----T---T---T---T----+

¦ ¦ 1 ¦ 2 ¦ 3 ¦ 4 ¦ 5 ¦ 6 ¦ ¦ 1 ¦ 2 ¦ 3 ¦ 4 ¦ 5 ¦ 6 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ S¦ U ¦

¦1 ¦D1 ¦D2 ¦D2 ¦D3 ¦D1 ¦D2 ¦ 17 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D1 ¦ D3¦ D2 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ S ¦ S ¦ U¦ U ¦

¦2 ¦D1 ¦D2 ¦D1 ¦D3 ¦D3 ¦D2 ¦ 18 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦ D3¦ D1 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ S ¦ S ¦ U¦ U ¦

¦3 ¦D1 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦D3 ¦D1 ¦ 19 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦ D1¦ D3 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U¦ S ¦

¦4 ¦D1 ¦D2 ¦D1 ¦D3 ¦D3 ¦D2 ¦ 20 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D3 ¦ D1¦ D2 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U¦ S ¦

¦5 ¦D1 ¦D2 ¦D1 ¦D2 ¦D3 ¦D3 ¦ 21 ¦ D1 ¦D2 ¦D1 ¦D3 ¦ D3¦ D2 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U¦ S ¦

¦6 ¦D1 ¦D2 ¦D3 ¦D1 ¦D2 ¦D3 ¦ 22 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦ D1¦ D3 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U¦ S ¦

¦7 ¦D1 ¦D3 ¦D1 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦ 23 ¦ D1 ¦D2 ¦D1 ¦D2 ¦ D3¦ D3 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U¦ S ¦

¦8 ¦D1 ¦D3 ¦D3 ¦D2 ¦D1 ¦D2 ¦ 24 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D3 ¦ D1¦ D2 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦ ¦ S ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ S ¦ U ¦ U¦ S ¦

¦9 ¦D1 ¦D3 ¦D2 ¦D3 ¦D2 ¦D1 ¦ 25 ¦ D1 ¦D2 ¦D3 ¦D1 ¦ D3¦ D2 ¦

+-----+---+---+---+----+----+----+-----+----+----+---+---+---+----+

¦     ¦ S ¦ U ¦ U ¦ U ¦ S ¦ U ¦ ¦ S ¦ U ¦ U ¦ S ¦ S¦ U ¦



  

© helpiks.su При использовании или копировании материалов прямая ссылка на сайт обязательна.