Проведение общеклинических исследований мочи
Участие в подготовке рабочего места для проведения общеклинических исследований мочи:
- подготовка оборудования, расходного материала, реактивов;
- подготовка растворов для дезинфекции отработанного материала.
Участие в подготовке проб мочи:
- регистрация и маркировка проб;
- центрифугирование проб мочи;
- отбор проб мочи для общеклинических исследований;
- подготовка нативных препаратов мочи.
Участие в проведении общего анализа мочи:
- определение физических свойств мочи (количество, цвет, прозрачность, относительная плотность);
- определение химических показателей мочи (pH, белок, глюкоза, кетоновые тела, билирубин, уробилиноиды);
- количественное определение белка, глюкозы;
- подсчет уроцитограммы.
Участие в проведении количественных методов исследования мочи:
- подготовка проб мочи для исследования по Нечипоренко;
- подготовка камеры Горяева;
- подсчет количества лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров в камере Горяева.
Участие в проведении функциональных проб мочи.
Участие в проведении исследования мочи на мочевом анализаторе.
Участие в регистрации полученных результатов общеклинических исследований мочи.
Участие в проведении утилизации отработанного биологического материала; дезинфекции и предстерилизации использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
1 день
/6 часов
ПК
1.1.
ПК
1.2.
ПК
1.3.
ПК
1.4.
Проведение общеклинических исследований кала и дуоденального содержимого
Участие в подготовке рабочего места для проведения общеклинических исследований кала и дуоденального содержимого:
- подготовка оборудования, расходного материала, реактивов;
- подготовка растворов для дезинфекции отработанного материала.
Участие в подготовке проб кала и дуоденального содержимого:
- регистрация и маркировка проб;
- подготовка макропрепаратов и микропрепаратов кала для копрологического и паразитологического исследования;
- подготовка микропрепаратов желчи.
Участие в проведении копрологического исследования:
- определение физических и химических свойств кала;
- исследование кала на скрытую кровь;
- микроскопическое исследование кала.
Участие в проведении исследования кала на гельминты, их личинки и части тела:
- макроскопическая оценка препаратов кала;
- исследование микроскопической картины кала на простейшие и яйца гельминтов.
Участие в общеклиническом исследовании дуоденального содержимого:
- определение физических и химических свойств различных порций желчи;
- исследование микроскопической картины дуоденального содержимого.
Участие в регистрации полученных результатов общеклинических исследований кала и желчи.
Участие в проведении утилизации отработанного биологического материала; дезинфекции и предстерилизации использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
2 день
/6 часов
ПК
1.1.
ПК
1.2.
ПК
1.3.
ПК
1.4.
Проведение лабораторного исследования мокроты
Участие в подготовке рабочего места для проведения общеклинического исследования мокроты:
- подготовка оборудования, расходного материала, реактивов;
- подготовка растворов для дезинфекции отработанного материала.
Участие в подготовке проб мокроты:
- регистрация и маркировка проб;
- подготовка макропрепаратов и нативных и окрашенных микропрепаратов мокроты для общеклинического и бактериоскопического исследования.
Участие в проведении общеклинического и бактериоскопического исследования мокроты:
- определение физических свойств мокроты;
- выявление в микропрепаратах альвеолярных макрофагов, содержащих гемосидерин;
- оценка микроскопической картины мокроты;
- выявление кислотоустойчивых микобактерий туберкулеза при проведении бактериоскопии.
Участие в регистрации полученных результатов общеклинических и бактериоскопических исследований мокроты.
Участие в проведении утилизации отработанного биологического материала; дезинфекции и предстерилизации использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
3 день
/6 часов
ПК
1.1.
ПК
1.2.
ПК
1.3.
ПК
1.4.
Проведение общеклинических исследований ликвора и выпотных жидкостей
Участие в подготовке рабочего места для проведения общеклинических исследований ликвора и выпотных жидкостей:
- подготовка оборудования, расходного материала, реактивов;
- подготовка растворов для дезинфекции отработанного материала.
Участие в подготовке проб ликвора и выпотных жидкостей:
- регистрация и маркировка проб;
- подготовка проб ликвора и выпотных жидкостей для подсчета цитоза;
- подготовка нативных и окрашенных микропрепаратов ликвора и выпотных жидкостей.
Участие в проведении общеклинического исследования ликвора и выпотных жидкостей:
- определение физических и химических свойств ликвора и выпотных жидкостей;
- проведение пробы Ривальта для дифференциации выпотной жидкости;
- исследование цитоза в камере Горяева или Фукса-Розенталя;
- микроскопическое исследование нативных и окрашенных препаратов ликвора и выпотных жидкостей.
Участие в регистрации полученных результатов общеклинических исследований ликвора и выпотных жидкостей.
Участие в проведении утилизации отработанного биологического материала; дезинфекции и предстерилизации использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
4 день
/6 часов
ПК
1.1.
ПК
1.2.
ПК
1.3.
ПК
1.4.
Проведение общеклинических исследований отделяемого половых органов и кожи
Участие в подготовке рабочего места для проведения общеклинических исследований отделяемого половых органов:
- подготовка оборудования, расходного материала, реактивов;
- подготовка растворов для дезинфекции отработанного материала.
Участие в подготовке проб отделяемого половых органов:
- регистрация и маркировка проб;
- подготовка нативных и окрашенных микропрепаратов отделяемого половых органов.
Участие в проведении общеклинических исследований отделяемого половых органов:
- оценка микроскопической картины влагалищного отделяемого;
- определение физико-химических свойств эякулята;
- оценка микроскопической картины эякулята;
- подсчет количества сперматозоидов;
- оценка подвижности сперматозоидов.
- Участие в проведении исследования эякулята на спермоанализаторе.
Участие в приготовлении и микроскопическом исследовании препаратов кожи, ногтей, волос на наличие паразитических грибов.
Участие в проведении микроскопического исследования соскобов кожи и ресничек на демодекоз.
Участие в регистрации полученных результатов общеклинических исследований отделяемого половых органов.
Участие в проведении утилизации отработанного биологического материала; дезинфекции и предстерилизации использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты.
5 день
/6 часов
ПК
1.1.
ПК
1.2.
ПК
1.3.
ПК
1.4.
Зачет
на основе анализа проведенных лабораторных общеклинических исследований, анализа оформления дневника практики, защиты алгоритмов подготовки проб биологического материала для общеклинических исследований, алгоритмов общеклинических исследований, демонстрации практических умений.
6 день
/6 часов
Дата, место проведения УП
Содержание и объем работы
1 день
Оценка, подпись преподавателя
Подготовка оборудования, расходного материала, реактивов
- Включить полностью освещение рабочего места и убедиться в исправной работе светильников.
- Проверить санитарное состояние рабочего места и проветрить его, открыв окна или фрамуги и двери. Убедиться в том, что температура воздуха на рабочем месте соответствует установленным санитарным нормам.
- Надеть спецодежду, спецобувь и другие средства индивидуальной защиты.
- Подготовить рабочую зону для безопасной работы.
- Проверить наличие и надежность подсоединения защитного заземления к корпусам электрооборудования (если рабочее место с электрооборудованием).
- Убедиться в исправности электрооборудования рабочего места (если имеется): светильники должны быть надежно подвешены к потолку и иметь светорассеивающую арматуру; электрические коммутационные коробки должны быть закрыты, а электророзетки — фальшвилками; корпуса и крышки выключателей и розеток не должны иметь трещин и сколов, а также оголенных контактов. При использовании технических средств убедиться в их исправности и целостности подводящих кабелей и электровилок.
- Подготовить необходимое для работы оборудование и инвентарь. Проверить его исправность.
Подготовка растворов для дезинфекции
1.Для приготовления дезинфицирующего рабочего раствора нужной концентрации произвести расчет соотношения дезинфектанта и воды
2.Налить в мерную кружку необходимое количество воды.
3.Вылить в контейнер (емкость) воду в заданном количестве.
4.Насыпать рассчитанное количество дезинфектанта в граммах (налить в миллилитрах) или опустить необходимое количество таблеток в воду в контейнер:
5.Перемешать раствор.
6. Плотно закрыть крышкой.
7.Емкость промаркировать: на бирке указать название и процентную концентрацию дезраствора, дату приготовления, срок годности, подпись приготовившего.
8.Снять перчатки, вымыть и осушить руки.
9.Смазать руки защитным кремом.
Регистрация и маркировка проб
Поступивший материал регистрируют в журнале регистрации биологических материалов, заполняют данные о пациенте, указывают дату направления, присваивают номер направлению и пробе.
Центрифугирование проб мочи.
-При неточной загрузке центрифуги каждую пару наполненных пробирок размещать в диаметрально противоположных положениях ротора.
-Пробирки следует наполнять не более, чем на 1 см от края.
-При установке не закрывающихся пробирок, пробирки заполнять на 75% максимального объема.
-Перед началом работы центрифугирования необходимо убедиться, что ротор надежно закреплен и свободно вращается.
-При закрывании крышки центрифуги должен быть слышен \"щелчок\" включения микровыключателя блокирующего устройства.
-Крышку ротора центрифуги разрешается открывать только полной остановки ротора.
-Должен соблюдаться правильный выбор параметров центрифугирования согласно инструкции производителя центрифуги (тип ротора, адаптера, скорость и продолжительность вращения, величины центробежного ускорения, допустимый уровень дисбаланса, соблюдение температурного режима).
отбор проб мочи для общеклинических исследований
Мочу на общий анализ собирают утром после туалета наружных половых органов в сухую, чистую баночку,после туалета наружных половых органов. Для клинического исследования необходимо 100-200 мл.
Подготовка нативных препаратов мочи
Для приготовления нативных препаратов из осадков мочи необходимо выполнять следующие указания:
1. Производить собирание осадков мочи не раньше, чем через 1-2 часа после доставки ее в лабораторию и центрифугировать ее не менее 5-10 минут.
2. Оценивать видимые осадки в центрифужных пробирках по их цвету и характеру.
3. Приготовлять нативные препараты с помощью пипеток с оттянутым концом. Перед приготовлением препаратов центрифужную пробирку с мочой (после центрифугирования) быстрым движением наклоняют, сливают в пустую банку приблизительно третью часть мочи, находящейся над осадком, и тотчас же возвращают в вертикальное положение. Эту манипуляцию производят так, чтобы не взболтать осадок. Указательным пальцем правой руки закрывают верхнее отверстие пипетки с суженным концом. Вносят пипетку на дно центрифужной пробирки. Приоткрывают верхнее отверстие пипетки: осадок мочи с небольшим количеством жидкости набирается в пипетку. Моментально закрывают пальцем верхнее отверстие пипетки и извлекают ее из пробирки. Взятый осадок помещают на чистое предметное стекло и осторожно накрывают покровным стеклом. В правильно приготовленном препарате не должно быть пузырьков воздуха и избыток жидкости не должен выходить за пределы покровного стекла. Если осадок состоит из нескольких слоев, то вначале готовят препарат, как описано выше, а затем содержимое вновь центрифугируют и готовят препараты из каждого слоя в отдельности.
Определение физических свойств мочи
Цвет мочиопределяют в проходящем свете, приподняв цилиндр на уровень глаз на фоне листа белой бумаги. В норме цвет соломенно-желтый. Физиологическая гипохромия наблюдается при полиурии, при усиленном питьевом режиме, при приеме мочегонных продуктов питания. Бледные оттенки или бесцветная моча встречается у больных диабетом, ПН, хроническим ГН, ХПН. У новорожденных моча бесцветная, затем становится янтарно-коричневой за счет билирубинурии; моча грудных детей всегда светлее, чем у взрослых. Гиперхромия физиологическая может быть при ограничении питья, усиленном потоотделении. Гиперхромия наблюдается при олигурии за счет формирования отеков, транссудатов и экссудатов, при диспептических расстройствах, при лихорадке, застойной почке. Резкая гиперхромия отмечается при гемолитических состояниях. Темный, почти черный цвет может быть при острой гемолитической почке за счет гемоглобинурии, при алкаптонурии за счет гомогентизиновой кислоты (в результате отсутствия у пациента фермента гомогентизатоксидазы). Красная моча возможна при наличии примеси неизмененной крови, кровяных пигментов, некоторых лекарств: гематурия, гемоглобинурия, порфиринурия. Измененная кровь придает моче цвет «мясных помоев» при остром ГН, отравлении уксусной кислотой.
Зеленый цвет моча приобретает при приеме метиленовой сини, при механических желтухах за счет биливердина.
Моча цвета «пива» наблюдается при паренхиматозной желтухе. Молочно-белый цвет может быть при жировом перерождении почки, лимфостазе, нефротическом синдроме, а также гнойной моче, при фосфатурии.
Мутность мочиопределяют, смещая цилиндр, находящийся на уровне глаз, по отношению к какому-либо предмету на черном фоне. Различают мочу прозрачную, слабо мутную, резко мутную. Помутнение мочи связано с выделениями солей, слизи, содержанием большого количества форменных элементов, бактерий, жира. От мути можно избавиться центрифугированием — оседают соли, эритроциты, лейкоциты; надосадочная жидкость становится прозрачной. Солевое помутнение можно устранить добавлением щелочей или кислот. От бактериального помутнения можно избавиться при фильтровании через специальные фильтры, от жирового — добавлением эфира, хлороформа.
Характер помутнения определяют при микроскопическом исследовании осадка.
Запах мочиопределяется органолептически, и в норме моча имеет нерезкий специфический запах от присутствия небольшого количества летучих жирных кислот. На характер запаха влияет пища, например, употребление чеснока, хрена, кофе. При длительном стоянии появляется запах аммиака. Запах аммиака отмечается при циститах, пиелитах, пиелонефритах. При диабетическом ацидозе наблюдается запах гнилых яблок за счет кетоновых тел.
Реакция мочиопределяется при помощи химических реакций или индикаторной универсальной бумаги. Желтый цвет соответствует кислой реакции, бурый — слабокислой, травянистый — нейтральный, сине-зеленый — слабощелочной, зеленый или насыщенно синий — щелочной.
Реакция мочизависит от характера питания, питьевого режима и в норме у взрослого человека и детей старшего возраста слабо кислая. Щелочная моча может быть при употреблении молочно-растительной пищи, приема щелочных препаратов, кислая — у любителей мясных продуктов. При патологии щелочная моча бывает при хронических уретритах, циститах за счет бактериального аммиачного брожения, рвоте, частых промываниях желудка, из-за приема антоцидов, при приеме соды. Кислотность мочи увеличивается при респираторном и метаболическом ацидозе, специфических заболеваниях почек и мочевого пузыря, острых и хронических заболеваниях почек, ХПН, повышенной температуре, фенилкетонурии, алкаптонурии и лейкемиях.
Относительная плотность мочиопределяется урометром. Исследуемую мочу наливают в цилиндр. Диаметр цилиндра должен быть на 1—2 см больше диаметра урометра. Мочу осторожно приливают по стенке цилиндра так, чтобы не образовывалась пена. Сухой урометр медленно погружают и
отмечают показания по нижнему мениску после прекращения колебаний урометра.
В микропедиатрии относительную плотность мочи при очень малых ее количествах можно определять на рефрактометре по показателю преломления мочи. Относительная плотностьзависит от количества растворенных плотных веществ в 1 л мочи. При обычном рационе питания относительная плотность может колебаться в широких пределах в течение суток. В утренней порции взрослого человека она равна 1,015—1,025; у новорожденных до 1,018; с 5 дня жизни до двух лет 1,002-1,004; в 2-3 года 1,010—1,017; 4—5 лет 1,012-1,020; с 10 лет 1,011-1,025.
Определение химических показателей мочи
Белок в моче
За сутки у взрослого человека выделяется до 150—200 мг белка, у детей до 135 мг. Прохождение белка через почечный фильтр зависит от количества белка в плазме, от состояния базальной мембраны, от формы и размера белковой молекулы. В норме через почечный фильтр проходят белки с молекулярной массой до 70 кД, т. Е. альбумины, легкие цепи иммуноглобулинов, многие ферменты. Наблюдается неравномерность выделения белка с мочой в течение суток. Днем белка может быть значительно больше, чем ночью. Увеличение белка в моче называется протеинурией,которая является основным синдромом почечной патологии.
Различают протеинурию почечную и внепочечную.
Почечная протеинурия делится на функциональную и органическую.
Функциональные протеинуриибыстро проходят. Причины:
- после приема большого количества белковой пищи;
- ортостатическую протеинурию, связанную с нарушением гемодинамики в почках, появление белка в моче наблюдается при перемене положения тела из горизонтального в вертикальное;
- при гиперлордозе встречается в любом положении тела, выявляется чаще в возрасте 14—15 лет;
- протеинурия напряжения появляется при нагрузках на нижние конечности;
- дегидрационные протеинурии у новорожденных при резких перепадах температур;
- эмоциональные протеинурии;
- застойные протеинурии;
-протеинурии беременных.
Органические протеинуриисвязаны с поражением нефрона. Различают селективные и неселективные протеинурии. При селективной избирательной протеинурии через базальную мембрану клубочка проходят белки не более 100 кД, в основном альбумин. Неселективная протеинурия сопровождается потерей белка разной молекулярной массы, и в моче обнаруживаются все белки плазмы.
Различают преренальные, ренальные и постренальные протеинурии.
1 Преренальныймеханизм появления белка в моче связан с накоплением в кровеносном русле белков с низкой молекулярной массой: белок Бенс — Джонса, легкие цепи иммуноглобулинов при миеломной болезни, продукты распада гемоглобина при переливании несовместимой крови, при тяжелых травмах мышечной ткани — миоглобина.
2 Почечная протеинурияможет быть в результате поражения клубочка или канальца, или одновременно и канальца, и клубочка, чаще встречается смешанная клубочко-канальцевая протеинурия.
-Клубочковая протеинуриясвязана со снижением величины отрицательного заряда базальной мембраны, а также за счет повреждения базальной мембраны иммунными комплексами (при гломерулонефритах, амилоидозе, диабетическом гломерулосклерозе, тромбозе почечных вен, миеломной болезни, застойной почке, гипертонической болезни).
-Канальцевая протеинуриявызывается нарушением процессов реабсорбции белка в проксимальном отделе или вследствие усиленной секреции гликопротеина Тамма — Хорсфалла (гиалина) (при наследственном или приобретенном поражении канальцев, при остром канальцевом некрозе, интерстициальном ГН, врожденных и приобретенных тубулопатиях,).
-Смешанная протеинуриячаще возникает при выраженной нефропатии.
3 Постренальная протеинуриясвязана с инфекцией мочевых путей, при новообразованиях мочевого пузыря, полипозе мочевого пузыря, прикровотечениях в мочевыделительной системе, при локальном выделении иммуноглобулинов.
Отдельно выделяютложную протеинуриювыявляется при попадании в мочу крови, гноя из половых органов или спермы. Ложная протеинурия отмечается при вульвовагинитах.
Качественное определение белка является обязательным и может быть проведено с помощью: 1) реакции с раствором 200 г/л сульфосалициловой кислоты (унифицированный метод); 2) экспресс-тестами.
Принцип. Метод основан на свертывании белка химическими реактивами, которое проявляется выраженным в разной степени помутнением (от опалесценции до большой мутности) или выпадением хлопьев.
Унифицированы 2 способа количественного определения белка в моче: 1) метод Брандберга — Робертса — Стольникова в модификации Эрлиха и Альтхаузена; 2) количественное определение белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфосалициловой кислоты (30 г/л).
Принцип. Белок с сульфосалициловой кислотой дает помутнение, интенсивность которого зависит от концентрации белка.
Гематурия
— появление эритроцитов в моче больше нормы.
Гемоглобинурия— появление в моче растворенного кровяного пигмента. Эритроциты в норме встречаются у практически здоровых людей (у детей и взрослых). В I л мочи выявляется у детей 0,75 х 106 л, у взрослых 1 х 106 л. У новорожденных в нецентрифугированной моче определяется до 0,05 х 106л эритроцитов. Гематурия может быть в виде микрогематурии, когда эритроциты выявляются только под микроскопом и цвет мочи не изменяется. При макрогематурии визуально имеет место изменение цвета мочи в розовый, красный или бурый оттенок в зависимости от количества эритроцитов. Гематурия бывает преренальной, ренальной и постренальной.
Преренальная гематуриясвязана с увеличением проницаемости капиллярной стенки при геморрагических диатезах.
Ренальная гематурияобусловлена заболеваниями почек и сопровождается нарушением проницаемости базальной мембраны клубочка, а также при заболевании канальцев или при одновременном поражении клубочка и канальцев.
Постренальная гематурия имеет место при воспалительных процессах, новообразованиях и травмах мочевыводящих путей. При постренальной гематурии чаще всего морфология эритроцитов не изменена.
Различают функциональнуюи органическую гематурию.
Функциональнаявстречается в детской практике и связана с усиленной проницаемостью почечного фильтра из-за его несостоятельности. Гематурия может быть после большой физической нагрузки, резких перепадов температур, различных инфекций, вирусных заболеваний, приема антибиотиков, сульфаниламидов. Выделяют еще ортостатическую гематурию, при гиперлордозе. Временная гематурия встречается при вирусных заболеваниях, скарлатине, инфекционном мононуклеозе, паротите, краснухе, ангинах, бронхопневмонии. У взрослых функциональная гематурия выявляется при переохлаждении и перегревании, при тяжелых нагрузках на нижние конечности, при приеме нефротоксических препаратов, токсикозе беременных.
Органическая гематуриясвязана с поражением базальной мембраны и интерстициальной ткани почек.
Гемоглобинурия— появление гемоглобина в моче. Может возникнуть при гемолизе эритроцитов непосредственно в моче и в результате проникновения гемоглобина из плазмы крови через почечный фильтр в мочу (при его высоком уровне в плазме).
Миоглобинурия— выявление миоглобина в моче. Может быть травматической природы и появляться при обширных травмах мышечной ткани (синдром сдавления, Краш-синдром), при ударах электрическим током.
Кровяной пигмент выявляют следующими реакциями: 1) реакция с амидопирином; 2) реакция с бензидином; 3) экспресс-метод с использованием индикаторных полосок.
Принцип. Гемоглобин обладает свойством отнимать водород от некоторых органических соединений (амидопирин, бензидин) и передавать его перекиси водорода, в результате этого образуются красящие вещества. Так, при реакции с амидопирином получают фиолетовое окрашивание.
Глюкозурия— это выделение глюкозы с мочой.
Появление глюкозы в моче зависит от содержания глюкозы в крови, от количества профильтрованной в минуту мочи, от состояния реабсорбции глюкозы в тубулярной части нефрона. Глюкоза свободно фильтруется через базальную мембрану и полностью реабсорбируется через эпителий проксимального канальца при помощи натрийзависимого мембранно-транспортного механизма, при участии специальных белков-переносчиков. Глюкоза появляется в моче, когда ее концентрация превышает почечный порог, т. Е. когда в крови ее больше 8,88—9,99 ммоль/л у взрослых и 10,55—12,76 ммоль/л у детей.
Появление глюкозы в моче может быть:
- физиологическим и связанным с употреблением большого количества углеводов, после эмоциональных возбуждений, стрессовых состояний, после обширных хирургических вмешательств.
- постоянной глюкозурия бывает при сахарном диабете, при гиперпродукции АКТГ, глюкокортикоидов, адреналина.
Глюкозурия бывает инсулярной и экстраинсулярной.
Экстраинсулярная глюкозурия:
- центрального происхождениясвязана с усиленным гликогенолизом в гепатоците при раздражении ЦНС и симпатической системы, травмах ЦНС, токсических поражениях. Такая же картина наблюдается при энцефалитах, менингитах, при травме головного мозга, лихорадочных состояниях, внутричерепных кровоизлияниях, токсикозах, судорогах, отравлениях.
-гормональная глюкозуриявстречается при нарушении углеводного обмена при гиперфункции щитовидной железы, гипофиза, акромегалии, феохромоцитоме, синдроме Кушинга.
-печеночная глюкозурияотмечается при нарушении углеводного обмена в гепатоците при гепатитах.
-глюкозурии почечной природы,связанные с нарушением реабсорбции глюкозы в проксимальном канальце. Первичные глюкозуриивстречаются в детской практике, обусловлены отсутствием ферментов-переносчиков глюкозы и сопровождаются нарушением реабсорбции глюкозы. Вторичные ренальные глюкозурииимеют место при хронических заболеваниях почек, ОПН, тубулопатиях за счет снижения величины почечного порога глюкозы.
Инсулярная глюкозурия:
связана с гипофункцией поджелудочной железы при поражении 3-клеток островков Лангерганса, когда нарушается синтез инсулина.
Особое место занимаютциклические глюкозурии,когда глюкоза в моче периодически обнаруживается у практически здоровых людей, которые при определенных факторах риска могут заболеть сахарным диабетом.
Качественное определение глюкозы в моче является обязательным и может быть проведено одним из следующих унифицированных методов: 1) реакцией Гайнеса — Акимова; 2) экспресс-методом с применением готового набора реактивов; 3) при помощи экспресс-тестов.
Принцип. В основу большинства методик положены восстанавливающие свойства глюкозы. Так, в реакции Гайнеса — Акимова при определении глюкозы восстанавливается сульфат меди последовательно в гидроксид меди желтого цвета и в оксид меди кирпично-красного цвета. Реакция протекает при нагревании в щелочной среде.
Количественное определение глюкозы. Унифицированы способы количественного определения глюкозы в моче по цветной реакции с орто-толуидином и глюкозо-оксидазный метод.
Количественное определение глюкозы производят только в тех порциях мочи, в которых она была обнаружена качественно. При определении глюкозы в суточном количестве мочи у больных сахарным диабетом исследуют три порции мочи, собранные через каждые 8 ч. Во избежание ложноположительных результатов перед определением глюкозы приостанавливают лечение тетрациклином, хлортетрациклином, так как они выделяются с мочой и искажают результаты определений.
Принцип. Глюкоза в присутствии фермента глюкозоксидазы окисляется кислородом воздуха с образованием перекиси водорода. Образующаяся перекись водорода под действием пероксидазы окисляет субстрат с образованием окрашенного продукта, определяемого фотометрически.
Кетонурия
Кетоновые тела (ацетон, р-оксимасляная и ацетоуксусная кислоты) определяют по назначению врача у больных сахарным диабетом, при тиреотоксикозе, при субарахноидальных кровоизлияниях, при ацетонемической рвоте у детей, при токсической диспепсии, дизентерии, при длительном голодании. При наличии запаха ацетона в моче, при глюкозурии лаборант обязан определить кетоновые тела и без назначения врача.
Кетонурия может быть
- алиментарного характера у детей и у взрослых при употреблении жирной и белковой пищи без углеводов
-при голодании ткани испытывают энергетический голод за счет сокращения запасов гликогена
-при сахарном диабете кетонурия связана с уменьшением гликогена в печени.
-гиперинсулинемии, акромегалии, болезни Иценко — Кушинга, тиреотоксикозе, эклампсии
-при обширных операциях, при субарахноидальном кровоизлиянии, черепно-мозговых травмах
-сильном эмоциональном возбуждении
-при токсикозе беременных.
Для определения кетоновых тел в моче используют:
1. реакцию Легаля;
2. реакцию Ланге (предпочтительнее реакции Легаля);
3) пробу Лестраде (экспресс-метод определения кетоновых тел в моче).
Принцип. Кетоновые тела в щелочной среде образуют соединение с нитропруссидом натрия, имеющее красную или фиолетовую окраску. При этом надо учитывать, что некоторые нормальные составные части мочи, в частности креатинин, также реагируют с нитропруссидом натрия. Чтобы отличить окраску, зависящую от кетоновых тел, от окраски, которую дает креатинин, используют химически чистую ледяную уксусную кислоту. Уксусная кислота разрушает окраску, обусловленную креатини-ном, но сохраняет и даже усиливает окраску, зависящую от кетоновых тел.
Билирубинурия
— это состояние, при котором в моче увеличивается содержание билирубина и качественные пробы на билирубин становятся положительными. Билирубин появляется в моче при увеличении концентрации связанного билирубина в крови больше 35—85 мкмоль/л при норме 8,55—20,5 мкмоль/л. За сутки у взрослого человека образуется 250—350 мг билирубина. В норме в моче билирубин рутинными методами не определяется.
Определение билирубина в моче производят по назначению врача. Лаборант обязан определить билирубин и без назначения врача, если моча имеет зеленовато-желтый, желтый, желтушный цвет и при окрашивании пены в желтый цвет при взбалтывании мочи.
Билирубин в моче определяют следующими методами: проба Розина, проба Гаррисона — Фуше.
Принцип. Билирубин под влиянием окислителя превращается в изумрудно-зеленый биливердин.
Уробилиновые тела (уробилиноген, стеркобилиноген, d-уробилиноген, третий уробилиноген)
в норме в небольшом количестве всегда присутствуют в моче взрослого человека, представлены стеркобилиногеном, который всасывается через слизистую толстого кишечника, и по геморроидальным венам и нижней полой вене попадают в почки. В норме уробилиновые тела отсутствуют у новорожденных, так как в кишечнике еще нет флоры, ферменты которой способствуют переходу билирубина в стеркобилиноген. Уробилинурия— повышение в моче уробилиновых тел характерна для:
-гемолитических состояний, параксизмальной ночной гемоглобинурии, эритремии, внутрисосудистого гемолиза, рассасывания обширных гематом
-вирусного и хронического гепатита, токсических поражений печени, рака печени, метастазов в печень, эхинококкоза.
- при циррозе печени, портальной гипертензии, тромбозе портальных вен
- при заболеваниях кишечника, когда нарушается всасывание уробилиновых тел. Наиболее часто такая картина наблюдается у детей при колитах, непроходимости кишечника, запорах. Уробилиновые тела могут не определяться при дисбактериозе, хронических заболеваниях кишечника, при лечении антибиотиками.
Выраженная уробилиногенурия является одним из чувствительных и достоверных признаков, отражающих функциональное состояние гепатоцитов, если у пациентов нет гемолиза и кишечной патологии
Количественное определение белка в моче
Количественное определение белка в моче основано на том, что при наслаивании мочи, содержащей белок, на 50% раствор азотной кислоты или реактив Ларионовой на границе двух жидкостей образуется белое кольцо, причем если четкое белое кольцо появляется к 3 минутам, то содержание белка равно 0,033%о или 33 мг в 1000 мл мочи.
Количественное определение глюкозы в моче
1. Поляриметрический метод. Основан на свойстве глюкозы, вращать плоскость поляризованного луча поляриметра вправо, причем угол отклонения луча пропорционален содержанию глюкозы в моче. Требования к материалу: полная прозрачность, кислая реакция, отсутствие белка (мочу подкисляют слабой уксусной кислотой, перемешивают, кипятят и фильтруют).
2. Колориметрический метод Альтгаузена. Основан на появлении цветной реакции при нагревании глюкозы со щелочью: 4 мл мочи смешивают с 1 мл 10% раствора едкого натра и кипятят в пробирке 1 минуту. Через 10 минут после кипячения цвет жидкости сравнивают с цветной шкалой Альтгаузена (каждый цветовой оттенок соответствует содержанию глюкозы).
3. Экспресс-метод тест полосками - Глюкотест, Глюкофан и др. – сравнивают со стандартной шкалой, выражающей содержание сахара в % и ммоль/л.
Подсчёт уроцитограммы
Метод Каковского-Аддиса: Метод Каковского-Аддиса является унифицированным методом количественного определения форменных элементов в суточном объеме мочи. Этот наиболее трудоемкий и имеющий много недостатков метод все реже применяется на практике в последнее время. Подготовка пациента. При исследовании мочи по методу Каковского-Аддиса во избежание получения заниженных данных, обусловленных распадом форменных
элементов в нейтральной или щелочной моче, а также в моче с низким удельным весом, пациенту в течение суток, предшествовавших исследованию, назначают мясную диету и ограничивают прием жидкости. При этих условиях обычно стандартизуется удельный вес мочи (1020 - 1025) и ее pH (5,5). Сбор мочи. Классический вариант исследования мочи по методу Каковского-Аддиса требует строго соблюдать правила сбора мочи и ее хранения в течение длительного времени. При этом мочу собирают в течение суток: утром больной освобождает мочевой пузырь, а затем в течение 24 часов собирает мочу в сосуд с 4 - 5 каплями формалина или 2 – 3 кристаллами тимола, мочу следует хранить в холодильнике. Однако на практике чаще пользуются другим, более простым способом сбора мочи - мочу собирают за 10 – 12 часов. При этом способе страдает точность результата. При данном варианте сбора мочи для метода Каковского-Аддиса перед сном больной опорожняет мочевой пузырь и отмечает это время. Утром, через 10 – 12 часов после вечернего мочеиспускания, пациент мочится в приготовленную посуду, вся моча отправляется в лабораторию для исследования. На бланке направления должно быть указано, в течение какого времени была собрана моча. При невозможности удержать мочу в течение 10 - 12 часов пациент собирает ее в несколько приемов, соблюдая условия ее хранения. У женщин мочу собирают катетером. Оборудование: мерная центрифужная пробирка, пипетка на 10 мл, счетная камера (Горяева, Фукса-Розенталя или Бюркера), стеклянная палочка, микр
