Главная

Контакты

Случайная статья

• Автоматизация
• Антропология
• Археология
• Архитектура
• Биология
• Ботаника
• Бухгалтерия
• Военная наука
• Генетика
• География
• Геология
• Демография
• Деревообработка
• Журналистика
• Зоология
• Изобретательство
• Информатика
• Искусство
• История
• Кинематография
• Компьютеризация
• Косметика
• Кулинария
• Культура
• Лексикология
• Лингвистика
• Литература
• Логика
• Маркетинг
• Математика
• Материаловедение
• Медицина
• Менеджмент
• Металлургия
• Метрология
• Механика
• Музыка
• Науковедение
• Образование
• Охрана Труда
• Педагогика
• Полиграфия
• Политология
• Право
• Предпринимательство
• Приборостроение
• Программирование
• Производство
• Промышленность
• Психология
• Радиосвязь
• Религия
• Риторика
• Социология
• Спорт
• Стандартизация
• Статистика
• Строительство
• Технологии
• Торговля
• Транспорт
• Фармакология
• Физика
• Физиология
• Философия
• Финансы
• Химия
• Хозяйство
• Черчение
• Экология
• Экономика
• Электроника
• Электротехника
• Энергетика

11. Íîðìàëüíàÿ МФ.

-совокупность множества микробиоценозов. самост экстракорпоральный орган (анатомическое строение -биопленка 0, 1-0, 5мм из муцина и м/бных полисахаридов и самих Б(анаэр=(10-100)*аэр), им опред функции, видовую специфичность и стабильность). индигенная, автохтонная флора (харакреная, многочисл). аллохтонная флора - транзиторные, добавочные и случайные (разнообр, немногочисл. условно-патог).

Отсут в: внутр орг; гол и сп мозг; альвеолы; внутр и ср ухо; кровь, лимфа, сп-мзг жидкость; матка, почки, мочеточники и моча в мочевом пузыре.

ф-ции: антагонистч, иммуногенная, пищевар, метаблч, витаминообр, детоксикац, регуляторная, генетич.

12. Ä è ñ ì è ê ð î á è î ç кач и колич изм состава норм МФ. Причины: нерац. примен. АБ; интоксикации; сальмонеллез, дизентерия; соматич забол (сах диаб, онкологич); гормонотерапии (прогестероном, кортико-стер=> кандидоз(молочница)); радиац(в т. ч. лучев терапия); иммуно- и vit-дефиц. ==> > : онкол, гипертонич. б, мочекам. б, атеросклероз, наруш сверт-сти кр. Клиника: наруш. ф-ций дых. сист, жкт или ничего. Лечение заместит. терапия (эубиотики: бифидумбактерин+колибактерин =бификол эубактерин лактоб-н etc).: АБ. Проф: пробиотики, бифидогенные ф-ры (гидролизат казеина, муцин, экстракт моркови, соевый олигосахарид, etc), пищевые волокна. Ã í î ò î á è î ë î ã è ÿ - выращ стерильных животных или с опред МФ для изуч роли МБ.

15 Ì è ê ð î ñ ê î ï è ÷ å ñ ê è é ì -ä Микроскопический (бактериоскопический) метод исследования - совокупность способов изучения морфологических и тинкториальных (способность окрашиваться) свойств микробов в исследуемом материале (лабораторная культура, патологический материал, пробы из внешней среды) с помощью микроскопии. Метод прост, широко доступен, быстр, экономичен, но мало чувствителен (около 10⁴-10⁵ бактерий в мл) и специфичен (из-за схожести морфологии микроорганизмов разных видов), небезопасен. типы микроскопических препаратов: а) бактериологический мазок (препарат-мазок); б) " висячая капля"; в) " придавленная капля"; г) тонкий мазок; д)" толстая капля"; ж) препарат-отпечаток. Этапы: 1. Забор материала (гной, мокрота, кровь, моча, испражнения, промывные воды бронхов и желудка, ликвор, содержимое полостей носа, вагины, трупный материал и др. ). 2. Транспортировка материала. 3. Приготовление микропрепаратов, фиксация и окраска (при необходимости). 4. Микроскопия с оценкой формы, размеров, взаимного расположения микробов и т. д. 5. Заключение.

16. Ì å ò î ä û î ê ð à ñ ê è. 1. По Леффлеру - гранулы валютина окрашиваются в темно- синий, а палочка дифтерийной каринобактерии в голубой. 2. По Нейсеру - валютин в сине-черный, а бактерия в желтый. 3. По Гинсу-Бурри - обнаружение капсул 4. По Шефферу - Фультону- окрашивание спор ( существует еще способ Пешкова). 5. Окраска по Цилю- Нельсену. Применяется для выявления кислото- и спиртоустойчивых микобактерий туберкулеза, лепры и некоторых актиномицетов, которые из-за большого количества в клеточных оболочках липилов, воска и оксикислот непроницаемы дл: разведенных растворов красителей. Окрашивание их достигается, при помощи фенолового фуксина Циля с подогреванием над пламенем горелки до закипания и отхождения паров. Окрашенные с применением термокислотной обработки кислотоустойчивые бактерии не обесцвечиваются слабыми растворами минеральных кислот и спирта. Кислоустойчивые бактерии окрашиваются в интенсивно красный цвет, остальные виды микробов, обесцвечивающиеся в процессе обработки препарата кислотой, - в светло-синий цвет. 6. Окраска по Романовскому-Гимзе Осуществляется сложным красителем (в его состав входят метиленовый синий, эозин и азур), в результате он окрашивает бактерии (спирохеты), простейшие и форменные -элементы крови в различные цвета и оттенки. Так, под его воздействием цитоплазма простейших приобретает голубой цвет, а ядра - красный: боррелии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а трепонемы и лептоспиры - в слабо-розовый; эритроциты - в розовый цвет, ядра лейкоцитов - в фиолетовый, а их цитоплазма - в голубой (базофильная зернистость - в синий, эозинофильная - н красный, нейтрофильная - в сиреневый). 7. Окраска по Граму. Из-за неодинакового содержания пептидогликана (ПГ) в оболочках разных прокариот метод дает возможность подразделять их на грамположительные (фиолетовые, 90 % ПГ) и грамотрицательные (розовые, 5-20 % ПГ) В соответствии с этим, во-первых, в царстве прокариот выделяют четыре раздела: 1. тонкостенные, грамотрицательные. 2. толстостенные, грамположительные. 3. лишенные стенок. 4. дефектные стенки, отсутствие пептидогликана. Во-вторых, окраска по Граму позволяет также установить родовую и видовую принадлежность многих возбудителей инфекционных болезней. Например, известно, что все болезнетворные кокки (кроме гонококка и менингококка), бациллы и клостридии являются грамположительными. а энтеробактерии, вибрионы, трепонемы - грамотрицательными. Â è ä û ì è ê ð î ñ ê î ï î â Размеры микробов, имеющих клеточное строение, составляют 0. 2 — 20 мкм (чаще 0, 5 — 10 мкм) и они легко обнаруживаются в иммерсионном микроскопе. Вирусы во много раз меньше. Диаметр самых больших из них, например вируса натуральной оспы, около 300 нм, а у самых мелких составляет 20 — 30 нм. Ввиду этого для выявления вирусов используются электронные микроскопы. В микробиологических исследованиях применяют световые и электронные микроскопы; методы оптической и электронной микроскопии. Оптический микроскоп. Наиболее важной оптической частью микроскопа являются объективы, которые по способу использования и степени увеличения делятся на сухие и иммерсионные. Сухие объективы с относительно большим фокусными расстоянием и слабым увеличением применяются для изучения микроорганизмов, имеющих крупные размеры (более 10 — 20 мкм), иммерсионные с фокусным расстоянием 1, 5 — 3 мм — при исследовании более мелких микробов. При микроскопии иммерсионным объективом х90 обязательным условием является его погружение в кедровое, персиковое или при их отсутствии в вазелиновое масло, показатели преломления света у которых близки предметному стеклу, на котором делают препараты (мазки). В этом случае падающий на препарат пучок света не рассеивается и, не меняя направления, попадает в иммерсионный объектив. Разрешающая способность иммерсионного микроскопа находится в пределах 0, 2 мкм, а максимальное увеличение объекта достигаем 1350. При использовании иммерсионного объектива вначале центрируют оптическую часть микроскопа. Если тубус микроскопа раздвижной, его устанавливают на длину 160 мм, затем поднимают конденсор до уровня предметного столика, открывают диафрагму, устанавливают объектив х8 и при помощи плоского зеркала освещают поле зрения. На предметное стекло с окрашенным препаратом наносят каплю масла, в которую под контролем глаза осторожно погружают объектив, затем, поднимая тубус, смотрят в окуляр и вначале макро-, а потом микровинтом устанавливают четкое изображение объекта. По окончании работы поднимают тубус, снимают препарат, салфеткой удаляют масло с фронтальной линзы объектива, отводят его в сторону и опус кают к предметному столику. Темнопольная микроскопия. Микроскопия в темном поле зрения основана на явлении дифракции света при сильном боковом освещении взвешенных в жидкости мельчайших частиц (эффект Тиндаля). Это достигается с помощью пара­болоид- или кардиоид-конденсора, который заменяет обычный конденсор в биологическом микроскопе. Фазово-контрастная микроскопия. Основана на превращении изменений по фазе, возникающих при прохождении световой волны через так называемые фазовые (прозрачные) объекты, в изменения по амплитуде, которые улавливаются глазом. С помощью фазово-контрастного приспособления фазовые изменения световых волн, проходящих через объект, превра­щаются в амплитудные и прозрачные объекты становятся видимыми в микроскоп. При этом они приобретают высокую контрастность изображения, которая может быть позитивной или негативной. Позитивным фазовым контрастом называют темное изображение объекта в светлом поле зрения, негатив ным фазовым контрастом — светлое изображение объекта на темном фоне. Для фазово-контрастной микроскопии используют обычный микроскоп и дополнительное фазово-контрастное приспособле­ние КФ-1 или КФ4. Люминесцентная (или флюоресцентная) микроскопия. Основана на явлении фотолюминесценции. Первичная (собственная) люминесценция наблюдает­ся без предварительного окрашивания объекта, вторичная (наведенная) возникает после окраски препаратов специаль­ными люминесцирующими красителями — флюорохромами. Люминесцентная микроскопия по сравнению с обычными методами обладает рядом преимуществ: возможностью исследова­ния живых микроорганизмов и обнаружения их в исследуемом материале в небольших концентрациях вследствие высокой степени контрастности. В лабораторной практике люминесцентная микроскопия широко применяется для выявления и изучения многих микроорганизмов.

18 Ê ó ë ü ò ó ð à ë ü í û é Культуральный (бактериологический) метод исследования - совокупность способов, направленных на выделение и идентификацию чистых культур микроорганизмов (бактерий) с помощью культивирования на питательных средах. Чистая культура - совокупность микроорганизмов одного вида. Чаще всего чистую культуру получают путем отбора и культивирования изолированной колонии (потомство одной микробной клетки). Этапы метода: 1. Забор материала для исследования. 2. Выделение чистой культуры и ее идентификация. 3. Заключение. Забор материала для исследования. Вид исследуемого материала зависит от цели исследования (диагностика - от больного; эпиданализ - из внешней среды, продуктов питания, больного и (или) бактерионосителя). Выделение чистой культуры. Включает 3 или 4 этапа: 1. Посев материала (после предварительной микроскопии) на чашку с плотной питательной средой (лучше дифференциально-диагностической или селективной) с целью получения изолированных колоний. Производят его чаще всего методом механического разобщения. В некоторых случаях (например, кровь) материал предварительно засевают в жидкую среду обогащения с последующим пересевом на чашку с агаровой средой. Иногда до посева проводят селективную обработку материала (с учетом свойств выделяемого микроорганизма; например, обработка кислотой или щелочью для выделения устойчивых бактерий). Культивируют при температуре 37°С в течение 18-24 часов. Время культивирования для разных видов бактерий может колебаться. 2(3): а) изучение колоний на чашке с агаром (культуральные признаки), отбор наиболее типичных; б) приготовление мазков из этих колоний с окраской (по Граму или другими методами); а) отсев остатка исследованной колонии на среду накопления и выращивание в термостате при оптимальной температуре. 3(4). Изучение чистоты культуры, полученной на среде накопления. С этой целью готовят мазок, окрашивают (чаще по Граму), микроскопически изучают морфологическую и тинкториальную однородность (в разных полях зрения). 4(5). Идентификация чистой культуры. Заключение. По совокупности признаков в сравнении со свойствами эталонных (типовых) штаммов указывается вид выделенного из материала микроорганизма достоинства: относительно высокая чувствительность и точность, возможность определить численность микробов в исследуемом материале, а также чувствительность к антибиотикам; недостатки: относительная длительность, метод дорогостоящий.

19 Ï è ò à ò сð å ä û Требования: 1. среды должны быть питательными2. должны иметь определенные ph 3. должны быть изотоническими, т. е. осмотическое давление в среде должго быть такое же как в клетке. 4. должны быть влажными и не слишком жидкими 5. должны облпдпть определенным ОВ потенциалом 6. должны быть стерильными 7. должны быть унифицированными, т. е. содержать постоянные количества отдельных ингредиентов. Питательные среды можно разделить: А) По происхождению: 1} естественные - натуральные продукты питания (мясо, молоко, картофель); 2) искусственные - приготовленные специально для выращивания микробов: - среды из естественных продуктов (мясная вода, мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА), - не имеющие постоянного состава; - синтетические питательные среды - растворы строго определенных количеств солей, аминокислот, азотистых оснований, витаминов в дистиллированной воде - имеют постоянный состав, используются для выращивания микроорганизмов и культур клеток при получении вакцин, иммунных сывороток и антибиотиков; Б) По назначению: 1) общего назначения (МПБ, МПА) - на них растет большинство микробов; 2) элективные - избирательно способствуют росту одного вида микробов из смеси (например, желточно-солевой агар для стафилококков); 3) дифференциально-диагностические - позволяют отдифференцировать по внешнему виду среды один вид микроба от других (например среды Эндо, Левина для кишечной группы микробов). Кроме того, в зависимости от целей использования в схеме выделения чистых культур, по назначению можно выделить следующие среды: 1) обогащения - подавляют рост микробов, сопутствующих возбудителю; 2) для получения изолированных колоний;

3) накопления чистой культуры; В) По консистенции: 1 жидкие; 2) полужидкие (при добавлении агар-агара в концентрации 0, 5-0, 7%); 3) плотные - выше 1%.

20 Ì å ò î ä û â û ä å ë å í è ÿ ÷ è ñ ò û õ ê ó ë ü ò ó ð аэробов: Процесс выделения чистой культуры можно разделить на несколько этапов. Первый этап. Из исследуемого материала готовят мазок, окрашивают его по Граму или другим методом и микрсгскопиру-ют. Для посева исследуемый материал в случае необходимости разводят в пробирке со стерильным изотоническим раствором хлорида натрия. Одну каплю приготовленного разведения нано­сят петлей на поверхность питательного агара в чашку Петри и тщательно втирают шпателем в среду, равномерно распределяя материал по всей ее поверхности. После посева чашку перевора­чивают дном кверху, подписывают и помещают в термостат при температуре 37 °С на 18—24 ч. Второй этап. Просматривают чашки и изучают изолиро­ванные колонии, обращая внимание на их форму, величину, кон­систенцию и другие признаки. Для определения морфологии кле­ток и их тинкториальных свойств из части исследуемой колонии готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для выделения и накопления чистой культуры одну изолированную колонию или несколько различных изолированных колоний пе­ресевают в отдельные пробирки со скошенным агаром или какой-либо другой питательной средой. Для этого часть колонии сни­мают петлей, не задевая соседние колонии. Третий этап: Отмечают характер роста выделенной чис­той культуры. Визуально чистая культура характеризуется однородным ростом. При микроскопическом исследовании окрашен­ного мазка, приготовленного из такой культуры, в нем обнару­живаются морфологически и тинкториально однородные клетки. Очнако в случае выраженного полиморфизма, присущего неко­торым видам бактерий, в мазках из чистой культуры наряду с типичными встречаются и другие формы клеток. анаэробов: Питательные среды для анаэробов должны отвечать следующим основным требованиям: 1) удовлетворять питательным потребно­стям; 2) обеспечивать быстрый рост микроорганизмов; 3) быть адек­ватно редуцированными. Посевы с целью выделения анаэробной микрофлоры, как спорообразующей (клостридии), так и неспорообразующей (вейлонеллы, бактероиды, пептококки), производят в строго анаэроб­ных условиях. Первичные посевы делают на обогатительные сре­ды (тиогликолевую, Китта — Тароцци), затем пересевают на плотные среды: сахарный кровяной агар в чашки Петри, в высо­кий столбик сахарного питательного агара или другие среды для получения изолированных колоний. После инкубации посевов в анаэробных условиях из образовавшихся колоний бактерий го­товят мазки, окрашивают, микроскопируют, а затем пересевают на среду Китта — Тароцци и агаровые среды для выделения чистой культуры. При выделении спорообразующих анаэробных бактерий (кло­стридии) первоначальные посевы прогревают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 20 мин для уничтожения веге­тативных клеток посторонней микрофлоры, которая может при­сутствовать в исследуемом материале

22. Ã å í å ò è ÷ å ñ ê è é à ï ï à ð à ò Б Хромосома бактерий — ДНК (1мм) суперспирализована в петли с вернута в кольцо, прикрепл. в одной точке к мембране. IS-последовательности - короткие фрагменты ДНК не несут структурных (кодирующих) генов, а только гены, ответств за транспозицию (спо­собность перемещаться по хромосоме и встраиваться). IS-последовательности одинаковы у разных бактерий. Транспозоны содержат и структурный ген. м/сущ автономно, но несп к автономной репликации. Плазмиды - кольцевые суперспиралевидные м-лы ДНК. сод структ гены R-пл -лек устойч-сти, Col-пл –сп-сти синт-ть колицины; F-пл -фенотипич выражение пола: половые пили, по кот. перед-ся донорская ДНК; Шу-пл –с-з гемолизина; Тох-плазмиды –с-з токсина; пл биодеградации - разрушать субстрат и т. д. Пл встраив-ся в строго опред уч хр-мы, м/ автономно реплицироваться. Транмиссивные пл сп-ны передаваться другой кл при конъюгации (обмене генетической информацией).

23. Í à ñ ë -ñ ò ü è è ç ì -ñ ò ü МО Фенотипическая(восст ч/з неск поколений) и Генотипическая изменчивость(прояв. сразу, т. к. одна хр)Мутации: спонтанные и индуцированные, точечные, генные и хромосомные, прямые и обратные. Рекомбинации: => мерозигота(изм не только кач-во, но и кол-во инф).

Трансформация — обмен ген инф у Б путем введения в кл-реципиент готового препарата ДНК (культивирование на среде с днк донора). Трансдукция — с умеренными (трансдуцирующими) бактериофагами. специфическая (всегда один и тот же ген, т. к. фаг в одном месте хр-мы)и неспециф(разные гены). Конъюгация —при прямом контакте. по конъюга-ционному мостику поступает нить ДНК от F+-кл. прерывание конъюгации –м/построить хромосомные карты бактерий.

24. Ì î ë å ê -ã å í ì -ä û осн на выявлении в биоматериале от больного из внешней среды или препарат из чистых культур после донательноетъю нуклеиновых кислот (МЮ. определение их рода, вила и типа специфичности Применяют два метола: Молекулярная гибридизация процесс, в котором одноцепочечная ПК исследуемою микроорганизма (мишень) при взаимодействии с комплементарным фрагментом ПК. включающей метку (зонд) образует двухцепочечный комплекс Назначение метода:

выявление степени сходства различных ДНК Применяется для идентификации микроорганизмов, особенно тех, которые трудно и медленно растут (микоплазмы. хламидии. вирусы). Материал для исследования: гной; кровь; отделяемое из уретры: моча, испражнении, биопунктаты тканей и органов: объекты окружающей среды (вода, почта). Методы гибридизации: в растворе, на фильтре, на стекле.

Зонд - это двухцепочечные или одноцепочечные фрагменты ДНК меченые затонной, флюорисцентной или ферментной. ПЦР - способ быстрого получения множественных копий специфической последовательности ДНК бактерий, грибов, вирусов до количество, достаточного для идентификации другими молекулярно-биологическими методами Назначение: индикация микроорганизмов в объектах внешней среды, пищевых продуктов, материале от больных, идентификация микроорганизмов. генетическое типирование, выявление генов вирулентности. Материал для исследования тог же Основные компоненты: исследуемая проба ДНК; смесь ДНТФ (дезоксинуклеотилтрифосфат), достраивание с помощью ДНК - полимеразы: праймеры - синтетические фрагменты ДНК; специфический буфер; минеральное масло; мембрана.

26 Ó ÷ å í è å î á è í ô å ê ö è è Инфекция — Σ биол р-ций, кот-ми макроорга­низм отвечает на внедрение микробного агента, выз-щего наруш гомеостаза (Инвазия -простейшими). Инф. б-знь - прояления процессов. Условия возникновения: 1. Инфицирующая доза заболевания – минимальное количество микробных клеток, способных вызвать инфекционный процесс. 2. Микроб должен попасть во входные ворота, т. е. орган в котором он может размножаться. 3. Патогенность - способность микроба вызывать инфекционный процесс у хозяина. 4. Степень патогенности – вирулентность – индивидуальный штаммовый признак. Класс-ция: бактериальные вирусные грибковые протозойные, моноинф и ассоциированные (не вторичн), остр и хронические, экзо и эндогенные+аутоинф (при смене биотопа), сапро зоо антро зооантропопонозные, эндемич и эпидемич., очаговые и генерализованные,

28. Ð î ë ü МО â инф проц Возбудителями инфекционных процессов, явля­ются патогенные, или болезнетворные, микроорганизмы, обладаю­щие способностью прикрепляться (адгезироваться) к клеткам оп­ределенных органов, размножаться и колонизировать поражае­мые участки, что в конечном итоге может привести к инфекцион­ной болезни. Патогенностыо называется способность определенных видов микроорганизмов вызывать инфекционный процесс у чув­ствительного к ним человека (животного). вирулентность - сп-сть проник в макрооргзм, размнож и подавл защ мех (адгезивность +колонизационностъ (ф-нты агрессии и защиты) +инвазивность). штаммовый признак. лабильна. авирулентность.

29. Ô à ê ò î ð û ï à ò î ã å í í î ñ ò è ф-нты агрессии и защиты: нуклеазы; протеазы (разруш АТ); лецитиназа (разруш мембраны); плазмокоагулаза (обр фибриновых барь­еров); антифагин (токс д-е на фагоциты); фибринолизин; гиалуронидаза; нейраминидаза (повышая прониц-сть тк). токсины: эндотоксины -ЛПС; tстаб, by Г-, общетоксич д-е, слаб АГ, не перех в анатоксин; экзотоксины(полностью секретируемые в ок­р ср, частично и несекр-мые -только при разруш МБ) -белки; tлаб, by Г+, специ­фичность д-я, сильные АГ, при спец об­раб перех в анатоксины. по мех. : мембранот-ны, функц блок-ры (нейротоксины), tстаб и tлаб энтерот-ны(АЦ> диарея), цитотоксины и антиэлонгаторы(блок с-з б), эксфолиатины и эритрогенины. группы ф-ров патогенности: 1- Б с эпителием соотв-щих биотопов; 2- нтерфер-щие с кл и гумор за­щ мех-ми и обесп размнож; 3-бакт-ные модулины, индуц-щие с-з нек цитокинов и медиаторов воспаления => иммуносупрессия; 4- т-ны и токсич прод=> специф патоморфологические изм-ния тк и орг-в.

30. Ð î ë ü МО â è í ô ï ð î ö å ñ ñ å противоМБная резистентность- Σ мех-в, опр-щих невосприимчивость к д-ю люб МБного агента. неспецифич тканевые: барьер кожи и слизистых, колонизационная резистентность норм МФ, > воспал и фагоцитоз (незавершенный - распространение МБ), > ЛУ(задерж, усил фаг-з), > ареактивность кл; ест киллеры. неспецифич гумор: с-ма комплемента, лизоцим(наруш с-з муреина Г+), бета-лизины, лейкины (при разруш. Leu, разруш пов. белки МБ), интерферон, с-ма пропердина, эритрин.

32. á è î ë î ã è ÷ å ñ ê è é м-д Биологический метод исследования - совокупность способов искусственного воспроизведения клинической картины инфекционных болезней или их синдромов на лабораторных животных. Этапы: 1. Забор материала (виды материала см. Бактериоскопический метод), 2. Обработка материала. 3. Выбор лабораторного животного, исходя из его чувствительности к предполагаемому возбудителю, его стандартизация и маркировка. 4. Заражение животных одним из способов (подкожный, внутрикожный, внутрибрюшинный, внутримышечный, интрацеребральный, внутривенный, в желудок, интраназальный и др. ) в зависимости от тропизма микроба. 5. Регистрация признаков болезни зараженного животного или его смерти. 6. Прижизненный забор материала от животного и проведение бактериологического и серологического исследования, постановка аллергической пробы. 7. Вскрытие, изучение патологоанатомической и патоморфологической картины, протокольный посев органов павших или убитых животных (для выявления обсемененности и выделения чистой культуры). Приготовление мазков-отпечатков из внутренних органов. 8. Идентификация выделенной культуры. 9. Заключение по результатам исследования. Оценка: Метод высокочувствителен, может быть использован на ранних этапах болезни, но не всегда доступен, дорог, длителен, небезопасен.

33. Õ è ì è î ò å ð à ï è ÿ химиотерапевтический индекс=min терапевтич доза / max переносимая. Группы: противопротозойные, противовирусные, противогрибковые, антибактериальные (выделяют противотуберкулезные, противосифилитические) по фармакокинетике: цитостатики — накапл в опухолев кл и подав­л рост; уросептики — накапл в моче и подавл рост МБ, etc по происх: произв мышьяка, сурьмы и висмута; сульфаниламиды (структ. аналоги ПАБК-> несинт. В9-> днк); диаминопиримидины; нитрофурановые преп (блок. ф-нтные с-мы); хинолоны( наруш этапов с-за днк Г" -" ных аэр Б); азолы(сниж с-з стеролов(увелич прониц-сти мембр), ФЛ, антиоксидант. ф-нтов(обр. Н2О2) грибов) Принципы: строго по показаниям, с уче­том противопоказаний, с учетом чувств-ти возб-ля, строго по схеме, с учетом коэфф увел-ния кнции, min 4—5 дней, иммуно химиотерапия, комбинации преп-в с разл м-змами д-вия (! лек совм-мсть)

34. À í ò è á è î ò è ê è, - это химиопрепараты биологического, полусинтетического или синтетического происхождения, которые в малых концентрациях вызывают торможение или гибель чувствительных к ним микробов и опухолевых клеток во внутренней среде животного организма. Классификация АБ: 1. По спектру действия: а) супеузкого спектра – на 1 вид б) узкого – на группу бактерий 1-2 вида в) широкого (на несколько видов) г) суперширокого (+ гельминты, грибы и простейших 2. По происхождению: а) микробного происхождения (из бактерий – грамецидин, полимиксин; из грибов – пенициллин, из актиномицетов - стрептомицин) б) из высших растений (фитонциды) – из семян редиса – рафанин, из чеснока в) из животных организмов (лизоцим, эритрин) г) синтетические и полусинтетические 3. По типу действия: а) микробостатическое – когда имеет место угнетение жизнедеятельности, но не гибель м/о б) микробоцидное действие – когда антибиотики убивают м/о Механизм д-вия: 1. Ингибиторы синтеза клеточной стенки. бета-лакткмные. 2. Ингибиторы синтеза белка (левомицитин, тетрациклин, аминогликозиды) 3. Ингибиторы синтеза ДНК и РНК (фторхинолоны, многие противоопухолевые антибиотики) 4. Ингибиторы функции цитоплазматической мембраны (нистатин, полимексины). 5. Подавление синтеза НК: а) РНК на уровне РНК – полимеразы. б) ДНК на уровне ДНКв) разрушение ДНК -гиразы, хинолоновые. Побоч д-е 1. Аллерг 2. дизбактериозы. 3. токсическое 4.            Иммунодепрессивное 5. Возникновение а/б устойчивых форм бактерий.

35. Å ñ ò è ï ð è î á ó ñ ò î é ÷ è â î ñ ò ü к АБ Приобретенная: а) фенотипическая б) генотипическая. Пути возникновения: 1. Спонтанные мутации 2. эписомальный или плазмидный (наличие R плазмиды) Культура считается устойчивой, если ее рост не подавляется теми минимальными концентрациями АБ, которые обычно подавляют бактерии этого вида. БХ- аспекты устойчивости: 1. Синтез ферментов, разрушающих АБ 2. Модификация мишени, на которую действуют антибиотики. 3. Изменение проницаемости клеточной стенки для антибиотика 4. Повышение скорости выведения антибиотика 5. Повышение скорости продукции субстрата. Определение устойчивости: изменении окислительно-восстановительного потенциала (ОВП) среды в процессе роста микроба в присутствии антибиотика. Метод серийных разведений в плотной питательной Среде. Каждый АБ испытывают в трех концентрациях кот доб к расплавленному и охлажденному агару. а) разведение антибиотиков в мясо-пептонном бульоне или агаре. Учёт - наличие или отсутствие роста микробов в питательной среде с различными концентрациями препарата. Оценка - минимальное количество препарата, подавляющее рост бактерий (мин в мкг'мм) Задача: позволяет рекомендовать эффект антибиотика и его дозу Ускоренный: а) полуколичественный с дисками и индикаторами. Оценка - диаметр неокрашенных зон вокруг дисков б) количественный разведение антибиотиков в МБП с углеводами и РН- индикаторами. Оценка- изменение цвета среды в пробирках

36 À í ò è ñ å ï ò è ê à: Под антисептикой понимают совокупность способов уничтожения или подавления жизнедеятельности потенциально опасных для здоровья человека организмов на интактных или поврежденных коже, слизистых оболочках и в полостях с целью профилактики (профилактическая антисептика) и лечения (терапевтическая антисептика) инфекционных процессов.

Выделяют следующие категории профилактической антисептики: 1) антисептика свежих ран; 2) хирургическая антисептика рук; 3) гигиеническая антисептика рук; 4) антисептика операционного поля; 5) антисептика пупочной раны, опрелостей и ссадин кожи новорожденных; 6) предупреждение послеродового мастита, микоза стоп и других инфекций кожи и слизистых оболочек.

Терапевтическая антисептика применяется с целью: 1) подавления жизнедеятельности микробов-возбудителей местных инфекционных процессов и предупреждения сепсиса; 2) предупреждения повторного попадания микробов в патологический очаг и развития суперинфекции, реинфекции и вторичной инфекции.

Процесс антисептики состоит из следующих этапов: 1) очистка места нанесения антисептика от грязи, сгустков крови, слизи, инородных частиц; 2) хирургическая обработка (при антисептике ран); 3) внесение антисептического препарата; 4) изоляция участка.

Антисептические средства подразделяют на: 1) химические антисептики; 2) биологические антисептики (бактериофаги и препараты из бактерий-антагонистов); 3) физические и механические факторы (хирургическая обработка, промывание, дренирование, сорбция и др. ). Антисептические препараты относятся к следующим классам химических веществ: хлор, йод и другие галогены; органические и неорганические кислоты; перекись водорода и перманганат калия; формальдегид и спирты; фенол и его препараты; сопи тяжелых металлов; красители; катионные и анионные поверхностно-активные вещества; нитрофурановые, сульфаниламидные. 8-оксихинолиновые, хинолоновые, имидазольные и др. соединения.

Готовые лекарственные формы антисептиков, прежде всего, должны вызывать гибель (бактерицидный эффект) или задерживать рост и размножение (бактериостатический эффект) микробов и не оказывать повреждающее действие на организм человека. Кроме того, они не должны снижать противомикробную активность в присутствии патологических и физиологических субстратов, иметь достаточно широкий спектр действия, хорошо растворяться в липидах, быть недорогими, экологически чистыми в производстве и стабильными при хранении.

Перед применением антисептика с целью лечения от больного выделяют возбудитель болезни и определяют его чувствительность к препарату. При выборе антисептика для профилактической антисептики ориентируются на спектр и уровень естественной чувствительности микробов, которые обитают в месте нанесения антисептика.

В больничных стационарах в связи с широким распространением устойчивых к антибиотикам, антисептикам и дезинфектантам вариантов бактерий устанавливают систематический контроль за их распространением.

37 Â ë ô è ç ô -ð î â í à МО. Стерилизация. Под стерилизацией понимают совокупность физических или химических способов полного освобождения объектов внешней среды от вегетативных и покоящихся форм патогенных, условнопатогенных и непатогенных микроорганизмов.

Цель стерилизации: 1) предупреждение заноса микроорганизмов в организм человека при медицинских вмешательствах; 2) создание и поддержание асептической и безмикробной (гнотобиотической) среды; 3) исключение микробного обсеменения (контаминации) питательных сред, культур клеток, реагентов при микробиологических и иммунологических исследованиях; 4) предупреждение микробной биодеградации (разрушения) лекарственных, диагностических, продовольственных и иных материалов. В медицинской практике стерилизации подвергают медицинский инструментарий и аппаратуру, лекарственные и диагностические препараты, перевязочный и шовный материал, белье, предметы ухода за больными, питательные среды, лабораторную посуду; при создании гнотобиотической зоны - воздух помещения, оборудование и все остальные объекты зоны (боксы, палаты и др. ).

Процесс стерилизации объектов состоит из следующих этапов: 1) дезинфекция; 2) очистка; 3) сборка, группировка, размещение в стерилизаторе; 4) собственно стерилизация; 5) сушка; 6) контроль за стерилизацией; 7) хранение стерилизованных материалов. Большинство объектов стерилизуют насыщенным паром под давлением в специальных аппаратах (паровых стерилизаторах, автоклавах). В зависимости от стерилизуемых материалов температура насыщенного пара устанавливается от 110°С до 138°С, давление- от 0, 4 до 2, 5 атм, экспозиция - от 3 до 60 мин. Наборы инструментов, текстильные изделия в свертках, простые питательные среды стерилизуют при режиме 1 атм (121 °С) 15-30 мин. Чувствительные к температуре материалы стерилизуют при более низком давлении (0, 4-0, 5 атм), устойчивые к ней - при более высоком (2, 5 атм). Стерилизация сухим жаром в аэростерилах также высокоэффективна, но высокая температура (160-180°С), длительные сроки экспозиции (1-2 часа) и сухой горячий воздух могут вызвать повреждение стерилизуемых материалов. Поэтому сухим жаром стерилизуют предметы из термостабильных материалов (стекло, металл и др. ), а также гидрофобные вещества. Термолабильные материалы стерилизуют 3-4-кратным (дробным) прогреванием текучим паром при 100°С по одному часу с перерывами в одни сутки, в течение которых материал находится в термостате (для прорастания спор).

Крупногабаритные изделия, предметы из термолабильных и разнородных материалов стерилизуют в герметических контейнерах (например, ЭТО-стерилизаторах) парами формальдегида, этиленоксида, а также растворами формалинэтилалкоголя, формалинизопропана при экспозиции в 6-24 часа

(химическая стерилизация). В заводских условиях медицинские изделия, в основном одноразовые, часто стерилизуют гамма-лучами 0, 2-4, 5 М рад (лучевая стерилизация). Жидкости и воздух помещений можно простерилизовать пропусканием через бактерицидные фильтры, а также многократным " промыванием" помещения ламинарным потоком стерильного воздуха.

Эффективность стерилизации проверяют бактериологическим или химическим методами.

38 Â ë è ÿ í è å õ è ì ô -ð î â. Дезинфекция. Под дезинфекцией понимают совокупность способов полного, частичного или селективного уничтожения потенциально патогенных для человека МО на объектах внешней среды с целью предупреждения передачи возбудителей болезней от больных и микробоносителей здоровым людям. Дезинфекция в очагах инфекционных заболеваний (квартира, дом, больничное, служебное помещение и др. ) ставит цель селективного уничтожения возбудителя конкретной болезни. Дезинфекции в этом случае подвергается та группа объектов, которая служит фактором передачи возбудителя этой болезни. заключительная, текущая, когда больной остается в очаге на какой-то период времени. В больницах, детских, общественных учреждениях ежедневно или периодически проводится профилактическая дезинфекция, цель которой - резкое снижение численности популяции всех потенциально патогенных для человека микробов на всех объектах помещения. В лечебных учреждениях особое внимание обращают на дезинфекцию инструментария, аппаратов, белья, предметов ухода, воздуха, выделений от больных. Дезинфицирующие средства. В подавляющем большинстве случаев для целей дезинфекции используют химические вещества, которые носят название дезинфектанты. Дезинфектанты должны обладать широким спектром действия, микробицидным эффектом, хорошо растворяться в воде и образовывать с ней или с воздухом стойкие активные растворы, суспензии, эмульсии, аэрозоли, туманы, обладать низкой токсичностью и аллергенностью, сохранять активность в обеззараживаемой среде, не повреждать обеззараживаемые объекты, не иметь неприятного запаха, быть экологически чистыми. Чаще применяют хлорсодержащие соединения (гипохлорид кальция, гипохлорид натрия, хлорамин и др. ), препараты фенола, глюконат хлоргексидина, формальдегид и глютаральдегид, алкоголи, четвертичноаммониевые соединения, перекись водорода, надмуравьиную и надуксусную кислоты, пресепт, виркон. Выбор дезинфектанта, его концентрации, лекарственной формы (раствор, аэрозоль, суспензия, порошок, паста, лаки, краски и др. ) экспозиции (время действия) зависит от требуемой степени дезинфекции, спектра и уровня чувствительности микроба-возбудителя, вида дезинфекции, объекта дезинфекции, условий, в которых протекает процесс дезинфекции. Среди последних важное значение имеет температура рабочей формы дезинфектанта, которая должна быть не ниже 20°С. Дезинфекция должна сопровождаться выборочным бактериологическим и иным контролем. Дезинфицирующий эффект может быть достигнут также с помощью сжигания объекта, прокаливания в пламени, воздействия горячего воздуха или пара в камерах, кипячения в воде, ультразвука, ультрафиолетового облучения, гамма лучей, очистки, стирки, мытья, выколачивания, вытряхивания. протирания, проветривания.

39. À ñ å ï ò è ê à -совокупность противомикробных мероприятий, направленных на предупреждение развития инфекционного заболевания во время медицинских вмешательств или нарушений технологического процесса при микробиологических исследованиях и производстве различных материалов. В медицинской практике асептические условия создаются при хирургических операциях, приеме родов, эндоскопических процедурах, парентеральном введении лекарств и других медицинских вмешательствах, а также при больничном содержании лиц с высоким риском развития инфекции. Для этого инструментарий, перевязочный и шовный материал, инъекционные растворы, халаты, маски, перчатки, дренажи и другие соприкасающиеся с раной объекты стерилизуют; руки лиц, принимающих участие в медицинском вмешательстве, операционное поле пациента подвергают антисептической обработке: воздух помещений, в которых проводят асептические мероприятий, и все, что в них находится, дезинфицируют; асептическая зона с помощью шпюзов или аналогичных приспособлений изолируется от смежных помещений. В микробиологической практике асептика включает: 1) забор материала для исследования стерильным инструментарием и в стерильную посуду в условиях, исключающих его микробную контаминацию посторонней микрофлорой; 2) предупреждение контаминации материала во время его доставки в лабораторию; 3) использование стерильных петель, пипеток, питательных сред, посуды, реактивов и других объектов в процессе микробиологических исследований; 4) предупреждение контаминации микробных культур микрофлорой рук, волос, одежды лабораторного работника, а также с не стерильных объектов внешней среды; 5) работу в стерильных боксах, ламинарном потоке стерильного воздуха, в зоне пламени спиртовки или газовой горелки. Несоблюдение указанных мер приводит к неправильному заключению о виде выделенной культуры и ее свойствах, что, в свою очередь, ведет к ошибочному диагнозу и неадекватным мерам терапии и профилактики

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

40. È ì ì ó í î ë î ã è ÿ междисципл мед н, изуч стр-е, эвол и ф-ние ИС различ орг-в (чел, жив, раст), мех-змы и способы защитных р-ций, направленных на сохранение их структурной и фунциональной целостности и биологич индивидуальности. самостоят - более 100 лет назад. Л. Пастер (жив. вакцины), Мечников(фагоц. т), Пауль Эрлих, Р. Кох. ОБЩАЯ молек, клеточ, эволюц, физ-хим, и-генетика, и-толерантность, и-химия, и-кибернетика, ПРИКЛАДНАЯ инфекц, и-профил, и-патология, и-биотехнология, трансплантац, и. репродукции, клинич, ветерин, экол, трансгенная, и-терапия. ЦЕЛЬ изуч патогенеза И-завис забол-й, разраб на осн теор подходов И-биологических проф и терап препаратов ЗАДАЧИ изуч стр-я, ф-ций, разв-я ИС при пат и норме, роли ИС в разв не/инф болезней, разраб м-дов И-диаг-ки, И-проф-ки, И-терапии. МЕТОДЫ и-морфологич, и-химич, и-биол, экспериментальный

41. È ì ì ñ -ì à. Ö å í ò ð и периф Центр. орг: крас кост мозг; тимус; лимфоидный аппарат кишечника(сумка Фабрициуса у птиц). в них -первич дифф-ка иммунокомпетентных клеток: Т- и В-ЛЦ (лимфопоэз). Периф. орг. : селезенка, ЛУ, лимфатич фолликулы расп под слизистыми жкт, дых и мочеполо­вого тракта; лимф и кровен сос. в них -пролиф-ция и вторич дифф-ка ЛЦ (АГ-завис, иммунопоэз). Иммунокомп. кл.: Макрофаги (фаг-з и презентация), Т-ЛЦ: Т-хелперы: Th0 узнают АГ на макрофаге и индуц пролиф-ю и дифф-ку => обр. ИЛ (рег обр Th1, Th2, Тh3). Th1-> ИЛ-> обр. Ткиллеров(КИО), Th2-> В-ЛЦ=> плазматич. кл-> АТ(ГИО), Тh3-> подавл КИО и ГИО. Кл иммуннологич памяти. -вторич. ИО

42. Ì -ë û I, II, III ГКГС на пов-и кл-к есть дифф-чные АГ, разные у разных кл на разн стадиях - кластеры дифф-ки (CD). АГ ГКГС (Гл к-кса гистосовместимости): I кл: у всех ядерных кл, представляют АГ-нный пептид CD8+ Т-ЛЦитам, участие а)связывание антиHLA-АТ б)ингиб циттоксичности аутореактивных Т-ЛЦитов в)формир И-толерантности; II кл: АГ-презентирующие, представляют АГ-нный пептид CD4+ Т-ЛЦитам, являются продуктами DR DQ DP-генов, гетеродимерами тяж(альфа, 30-34кДа) и легк(бета, 26-29кДа) гликопротеидных цепей. внеклеточная часть мол-лы - а1, а2 или в1, и2 - соединена небольшой трансмембр областью в 30АК и короткими ЦП-доменами в 15АК. Экспрессированы преимущественно на мембране И-кмпетентных кл; III кл???; неклассич м-лы - " КГС-подобные" (н/пр CD1)

43. Ñ D-à í ò è ã å í û на пов-и кл-к есть дифф-чные АГ, разные у разных кл на разн стадиях - кластеры дифф-ки (CD). АГ ГКГС (Гл к-кса гистосовместимости): I кл: у всех ядерных кл, представляют АГ-нный пептид CD8+ Т-ЛЦитам, участие а)связывание антиHLA-АТ б)ингиб циттоксичности аутореактивных Т-ЛЦитов в)формир И-толерантности; II кл: АГ-презентирующие, представляют АГ-нный пептид CD4+ Т-ЛЦитам, являются продуктами DR DQ DP-генов, гетеродимерами тяж(альфа, 30-34кДа) и легк(бета, 26-29кДа) гликопротеидных цепей. внеклеточная часть мол-лы - а1, а2 или в1, и2 - соединена небольшой трансмембр областью в 30АК и короткими ЦП-доменами в 15АК. Экспрессированы преимущественно на мембране И-кмпетентных кл; III кл???; неклассич м-лы - " КГС-подобные" (н/пр CD1) интегрины - м-лы на поверхности клеточных мембран, участвующие в прикреплении к твердому субстрату и в их распластывании на нем, индуцируют блокирующий апоптоз каскад реакций Селектины - гликопротеидные рецепторы адгезии появляются на активированных лейкоцитах, тромбоцитах, эндотемии...

44. Ö è ò î ê è í û - разнобр группа р-мых межкл коммуникационных м-л пептидной природы, обл-х регуляторными и эффекторными св-вами. Регул рост, дифф-ку и ф-ции, улучшают коперацию и спектр биол акт-сти клеток. Активность проявл локально в оч низ кнциях и важна в мех-змах воспаления и есть и приобр И-тета.

МОНОКИНЫ (ил1, фно синт моноцитами и МФгами) и ЛИМФОКИНЫ (ил2, 3, 5, 10, др - ЛЦитами)

- ИНТЕРФЕРОНЫ: ИНФ-а (моноцитами и ЛЦитами после стимуляции вирусной НК) ИНФ-р* (фибробластами и эпителиоцитами после стимуляции эндотоксинами бактерий, ФНО и ИЛ1) (ИНФ: неспециф противовирусная активность. индукция противовирусной резистентности организма в целом. осн. д-вие - ингибиция транляции вирусной м-РНК) у-ИНФ (Т-л-ми после АГ-специф рапознавания и актвации соотв-щих клонов Т-хелпров. способен стим-ть противоМБную акт-сть МФгов и ест. киллеров), ИНТЕРЛЕЙКИНЫ коммуникационные сигн м-лы м/у популяциями ЛЦитов Ф-Р НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ, КОЛОНИЕСТИМ-ЩИЕ Ф-РЫ обр многими типами клеток в тк или крови, а в костном мозге стимул кроветворение, РОСТОВЫЕ Ф-РЫ эмбриогенез, заживление ран и репарация тк: трнсфм-ующий р/ф, ф/р фибробластов, ф/р нервов, др, ХЕМОКИНЫ отв за хемотаксис клеток

45. È ì ì ó í è ò å ò -совокупность биологических явлений (процессов и мех-змов), направленных на сохранение постоянства внутренней среды организма (гомеостаза) и защиту организма от инфекционных и других генетически чужеродных для него агентов. Естественный (невосприимчивость вида) и Приобретенный (невосприимчивость особи, специфичен ) (АнтиМ/Бный Антитоксич Активный (Постинфекционный Поствакцинальный) Пассивный (Постсывороточный Плацентарный)) Инфекционный (пока есть возбудитель) физиологич ф-ры: Темпер тела - многие М/Бы плохо растут при 37°С | Кислород - выс парц сод-ие угнетает рост анаэробов в тк легких. Гормональный баланс (избыточное выделение гормонов - стероидов - резко снижает защ ф-ции) | Имм-нные ф-ры: Органич кислоты: Поддерж низк рН кожи; многие М/Бы чувств­ны к ним в низких кнциях | ЖК: Наруш ф-цию мембран | Слюна: Содерж ф-нты, разруш клеточ стенку бактерий; АТ, вып ф-цию опсонинов | Слеза: Содерж лизоцим, лизирующий бактерии (преимущественно грам+) разрушая кл стенку | Лактоферрин и трансферрин: Связ железо, необх для роста М/Бов | Лактопероксидаза: Окисляет ф-нты и белки клеточ стенки | HCI: Денатурация белков | Желчные кислоты: Разруш мембран | Трипсин: Гидролиз белков клеточ стенки и мембраны | Слизь: Задерж посторонние частицы; конкурирует за рец-ры и блок адгезию М/Бов | Спермин: Полиамин, выд из спермы и мочи - угнетает рост грам+ бактерий | Возраст: до 3 и старше 75 лет - более подвержены инфекциям из-за ослабления И-тета. Преодолев защитные мех-змы барьерных органов, микроорганизмы сталкиваются со специализированными ф-рами второго эшелона обороны - гумор и клеточ мех-змами неспецифич (врожденного) И-тета.

46. Ñ è ñ ò å ì à ê î ì ï ë å ì å í ò à -Σ белков сыв кр, связ каскадом последов активности при их взаимод-ии с комплексом АГ-АТ - (Классич путь. для активации необх Ca2+), либо со структурами полисахаридной природы (альт-ый путь. для активации необх Mg2+, белки (ф-ры) В и Д, пропердии). | 9 комп-ов (от CI до С9) и 3 рег-щих гомеостаз с-мы белков (ингибитора CI эстеразы, инактиватора СЗб и инактиватора С6). СЗ - центр белок всей с-мы (75%всей массы белков). |С-з by мононуклеарные ФЦиты, фибласты, печень. Из нативных м-л отд комп-ов обр многие БАВ (роль в разв воспаления, имм ответа, аллергии, + в резистентности к инфекции). Для бактериолиза или цитолиза - активация от СЗ до С9 по люб пути. В роли опсонинов - большие фрагменты СЗб, С4б - адсорбируясь на пов-сти клеток, усиливают фаг-з, способствуют иммунному прилипанию комплекса АГ-АТ-кмпл-т к пов-сти И-компетентных клеток (В-ЛЦиты). Низком-лярные фрагменты - полипептиды - СЗа, С5а способств высвобождению биогенных аминов (гистамина, серотонина) из тучных клеток, выз сокращение глад мускулатуры, повыш сосудистую проницаемость, вызывают хемотаксис нейтрофилов и моноцитов в очаг воспаления. Комп-ы CI-C4 нейтрализуют некот. вирусы.  У чел -генетич дефекты по большинству комп-ов кмпл-та. Клинически: синдром с-мной красной волчанки, рецидивирующие пиогенные инф, ангионевротический отек.

47. Ð å ã à ê ò -ö è è ñ -ì û ê ì ï ë -ò à см. 46 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ С-МЫ КОМПЛ-НТА I. Определение общей гемолитич активности: классич пути: Сыворотка крови + физ р-р 1: 10 и > > опред объем сыворотки, вызывающий лизис 50% сенсибилизированных ЭрЦитов (условную гемолитич единицу активности комлемента - СН 50), рассчитывают кол-во СН 50 на мл цельной сыворотки (У здоровых 40-60 СН 50). [кмпл-тгомологич ед/объем сыворотки]. Альт-ого - несенсиб кроличьи и физр-р с Mg, но без Са для блокирования классич пути активации.   2. 0пред акт-сти отд комп-в. определить численность ф-ционально активных м-л в I мл сыворотки крови > > установ дефект определенных комп-в и опред профиль компЛЦита при разл забол-ях: Сенсиб эр + реагент на опред комп- (смесь комп-в компЛЦита, исключая искомый, или сыв-ку крови, лишенную акт-сти этого комп-та). Сыв-ку для классич пути разводят в 40-50 -раз, а альт - в 5-7 раз. 3. И-хим опред-е кнции комп-в компЛЦита. опред-ть кнцию(г/л) кажд из белков компЛЦита, используя антисыворотки (АТ) к ним: метод радиальной И-диффузии в aгаре 4. радиальный гемолиз в агаровом геле. Гемолитич с-ма + расплавл агар 1: 7 и быстро выливают в стерильн чашки Петри. застывание. лунки d=4мм(до 15 на чашку). заполн испытуемыми сыворотками. в холодильник при 4°С на 21 час для диффузии белков компЛЦита в агар. в термостат на 60 мин для проявления зон гемолиза. Критерий акт-сти компЛЦита - квадрат диаметра зон гемолиза.

48. Ô à ã î ö è ò û нейтрофилы моноциты/МФги эозинофилы. опсонины (обволакивают объект): IgG, белки острой фазы, ЛПС-свя-щий проеин, комп компл С3ь С4ь, сурфактантые протеины легких SP-A, SP-D. В ткани моноциты форм-т популяцию тканевых МФгов: купферовские клетки (звездчатые ретикулоэндотелиоциты печени), микроглия ЦНС, остеокласты костной ткани, альвеолярные и интерстициальные МФги. Фагоциты направленно перемещаются к объекту фц-тоза, реагируя на хемоаттрактанты: в-ва МБов, активированные комп-ы кмпл-нта (С5а, СЗа) и ЦКины. обволак плазмалеммой, фагосома+лизосома, рН=4, 5, акт ф-нтов лизосом + катионные белки дефензины, капсин G, лизоцим, дых взрыв > > Н2О2, О2-, ОН-, синглетный О. Незавершенный фц-тоз - гонококков, туберкулезных палочек и лейшманий (не погибают).

49. АГпð å ç å í ò -щие ê ë Макрофаги (фаг-з и презентация), Т-ЛЦ: Т-хелперы: Th0 узнают АГ на макрофаге и индуц пролиф-ю и дифф-ку => обр. ИЛ (рег обр Th1, Th2, Тh3). Th1-> ИЛ-> обр. Ткиллеров(КИО), Th2-> В-ЛЦ=> плазматич. кл-> АТ(ГИО), Тh3-> подавл КИО и ГИО. Кл. иммуннологич. памяти. -вторич. ИО

 обволак плазмалеммой, фагосома+лизосома, рН=4, 5, акт ф-нтов лизосом + катионные белки дефензины, капсин G, лизоцим, дых взрыв > > Н2О2, О2-, ОН-, синглетный О.

Ä å í ä ð è ò í û å ê ë å ò ê è осущ поиск, захват и первичное разрушение патогенных организмов. Фрагменты разрушенных патогенов, захваченные их дендритами, акт-ют Т-кл. препятствуют развитию таких аутоимм заб-й, как диабет типа 1.

ЕК субпопуляция ЛЦ из костномозговых предшественников. способность убивать нек опухолевые клетки. на пов-сти им ТКР, CD4, CD8, Ig, CD3, CD2 и др. м/продуцировать иммунорегуляторные цитокины и лизировать клетки, инфиц внутрикл МО и инг-ть размнож МО.

50. Ì -ä û è ç ó ÷ ô à ã -ç à А. Прямым морфологическим методом. мб + фц invitro/invivo, ч/з 15—120 мин на предметных стеклах по Романовскому-Гимзе и подсчит N фц-щих фц и N фц-ных мб. По ним производят расчет следующих показателей: ФЦный ПОКАЗАТЕЛЕЛЬ = 100%*(N фц-щих фц/общ N фц), ФЦное ЧИСЛО= (N фц-ных мб/N активных фц), ПОК-ЛЬ ЗАВЕРШЕННОСТИ ФЦтоза=(ФЧ(через 15мин)-ФЧ(через 120мин))/ФЧ(через15мин)*100% Б. Непрямыми методами: опред хемотаксич индекса позволяет установить способность фагоцитов к направл передвиж к хемоаттрактанту -активированному компЛЦиту, экстракту мб, казеинату натрия и др. Подсчитывается отношение количества фагоцитов, проникающих через микропористые фильтры в опыте и в контроле; аттракция фц-гося объекта к пов-сти фц опред-ся по изм-ю степени метаболизма фагоцита, кот. суммарно определяется в тесте хемилюминесценции; бактерицидность фц опред по акт-сти бактерицидных с-м, заключенных в гранулах клеток: перекиси водорода - пероксидазы, супероксидных ионов -супероксиддесмутазы, лизоцима и др. Переваривающая способность фагоцитов оценивается по активности лизосомальных ф-нтов, кислой и щелочной фосфатаз, катепсина и др.

51. ИО. Â -ñ -ì à è ì ì -теò à. ИО -Σ проц-в в ИС в ответ на введение АГ. первичный, вторичный. В-ЛЦиты впервые выявлены у птиц в bursa of Fabricius где они созревают. У животных - в костном мозге. способны синтезировать АТ. Большинство обр-нных в костном мозге пре-В- ЛЦитов (> 95%) погибают там же в результате селекции. Зрелые В-ЛЦиты мигрируют в кровь, а затем во вторичные лимфоидные органы (селезенку, лимфатич узлы, лимфоидные ткани ЖКТ и слизис­тых). Они имеют А/Гспецифич В-клеточкый рец-р (ВКР) в виде мембраносвязанных м-л АТ, а также ряд пов-стных CD АГ и рец-ров. В-ЛЦиты м/узнавать нативный АГ в своб состоянии => активация => дифф-ка в эффекторные клетки, специализирующиеся на биосинтезе АТ. Большинство В-ЛЦитов периферич крови экспрессирует на пов-сти клетки два изотипа IgM и IgD. Очень небольшое количество циркулирующих клеток экспрессирует Ig G, А или Е изотопов. А/Граспознающий В-клеточный рец-р В-линфоцитов (BcR - англ. B-cel I Receptor) построен из м-лы мембранного Ig (mlg, состоящий из двух одинаковых тяжелых Н- и двух одинаковых легких - L-цепей) и двух м-л CD79 (Iga, IgP) - BcR имеет трансмембр и внутриЦПтич сегменты, передающие внутрикл сигналы. Исследование количества и ф-ционального состояния В-ЛЦитов В-клетки обнаруживаются в периферич крови по их рец-рному аппарату, а именно: а) по наличию рец-ров к Ig-инам и 3-ей фракции кмпл-та - р. ЕАС- розеткообр-ния; [2 этапа: готовят реагент, состоящий из ЭрЦитов быка, А/Т к ним и кмпл-та, затем этот обр-ся к-кс доб-ют к ЛЦитам крови чел-ка. Обр розетка, кот. внешне ничем не отличается от Е-розеток, но метод получения указывает на выявление именноВ-ЛЦитов. ]б) по наличию Ig-иновых рец-ров - р. И-флюоресценции; [ антиглобулиновые сыворотки, меченые люминофорами] в) по наличию рец-ров к ЭрЦитам мыши - р. МЕ-розеткообр-ния. [смешивания последних с ЛЦитами периферич крови] Ф-ная х-ка В-ЛЦитов и кол-ва Ig разл классов. Чаще других исп-ся метод радиальной И-диффузии в агаре, сод-щем А/Т к даннному классу Ig. В лунки вносят образцы изучаемых сывороток. И-преципитация=> радиальные полоски, диаметр которых зависит от кнции соотв-его Ig-ина. -Определение А/Т к аутоА/Гм или к М/Бам нормальной микрофлоры.

-Определение титра специфических А/Т, выраоатывающихся в организме чел-ка после иммунизации его вакцинами (АВДСДС и др. )

52. À í ò è ã å í û А/Г - Генетически чужеродные в-ва, кот. при внедрении в организм способны стимул-вать ИО (клеточную р., обр-ние АТ, аллергию, толерантность) и специфически реагировать с обр-вшимися АТми как in vivo, так in vitro. Эпитоп (АГнная детерминанта) - отличительная часть м-лы АГ, обусл-щая специфичность А/Т и эффекторных Т- ЛЦитов при иммунном ответе. Эпитоп кмпл-тарен активному центру АТ или Т-клеточному рец-ру. АГ бактерий по локализации подразделяют на капсульные (К) [белками, полисахаридами - (L, В) термолабильные и (А, М) термостабильные], соматич (О) [не только в ЦП, а в осн на пов-сти клетки, имеют разнообр хим состав, термостабильны. для их обнаружения м/б подвергаются t-обработке. О-АГ - липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Состоит из полисахаридной цепочки (собственно О-АГ) и липида А. ], жгутиковые (Н) [термолабильные белковые к-ксы жгутиков, обл-щих у многих энтеробактерий специфич и неспецифич (групповой) фазой] А/Г экзопродуктов. Среди бактериальных А/Г выделяют т. н. протективные или А/Г главного д-вия, защитные А/Г. Выработанные на них А/Т защищают организм от данного М/Ба. Очищенные протективные А/Г могут быть " идеальными" вакцинными препаратами. Т- независимые АГ первого типа. Некоторые бакт ЛПС при высокой кнции способны к поликлональной активации значит части популяции В- ЛЦ, т. е. для такой стимуляции антигенная специфичность роли не играет. Второго типа: длительное время персистируют на поверхности МФгов краевого синуса ЛУ и маргинальной зоны селезенки. Связывание с В- клетками с высокой авидностью. ИО практически не сопровождается формированием клеток памяти. Т- зависимые АГ без Т- ЛЦ лишены иммуногенности. Суперантигены не должны взмд-вать с АГпрезентирующими кл чтобы акт Т-кл: непосредственно св-ся с молекулами MHC II ГКГС.

53. À í ò è ã å í û МО Бактериальные А/Г: группоспецифич (встреч у разных видов одного рода или семейства) видоспецифич (у различных представителей одного вида); типоспецифич (опред-т серологич варианты - серовары, А/Гары внутри одного вида). К-, Н-, О-А/Г (см. предыдущий вопрос). Липид А - сод глюкозамин и ЖК. обл сильной адьювантной, неспецифич И-стимулирующей активностью и токсичностью. В целом ЛПС является эндотоксином. Уже в небольших дозах вызывает лихорадку из-за активации МФгов и выделения ими ИЛ1, ФНО и других ЦКинов, дегрануляцию гранулоцитов, агрегацию тромбоцитов. может св с люб кл организма, но особенно с МФгами. В больших дозах угнетает фц-тоз, вызывает токсикоз, нарушение ф-ции ссс, тромбозы, эндотоксич шок. ЛПС некоторых бактерий входит в состав И-стимуляторов (продигиозан, пирогенал). Пептидогликаны клеточной стенки бактерий обл-т сильным адьювантным эффектом на клетки СИ. Перекрестнореагируюшие - А/Гные детерминанты встречающиеся у микроорганизмов и чел-ка/животных. (мимикрия). (Гемолитич стрептококки группы А содержат перекрестно реагирующие АГ (в частности, М-протеин), общие с АГ эндокарда и клубочков почек чел-ка). Эти А/Г вызывают обр-ние А/Т, перекрестно реагирующих с клетками чел-ка, что приводит к развитию ревматизма и постстрептококкового гломерулонефрита. (У возбудителя сифилиса есть фосфолипиды, сходные по стр-ю с теми, кот. имеются в сердце животных и чел-ка. Поэтому кардиолипиновый А/Г сердца животных исп-ся для выявления А/Т к спирохете у больных людей (р. Вассермана).

Среди бактериальных А/Г выделяют т. н. протективные или А/Г главного д-вия, защитные А/Г. Выработанные на них А/Т защищают организм от данного М/Ба. Очищенные протективные А/Г могут быть " идеальными" вакцинными препаратами.

54 ГИО контролируется красным костным мозгом, развивается на р-римые агенты - белки, ЛПС, экзотоксины, на внеклеточных паразитов. Первичный — экстренная р. ИС организма на первое поступление А/Г, вакцины. непродолжительность и низкая специфичность. биоси-з преимущественно специфических АТ IgM класса. При этом АТ IgM и IgA классов продуц-ются значительно быстрее, нежели АТ IgG изотипа. три фазы: индуктивная (латентная) [ 6-7 дней. А/Г перераб в фц-тарных и других АПК и презентируется клонам Т- и В- ЛЦитов=> лимфобласты=> плазматич кл, эффекторные и регуляторные Т-клетки, синтезирующие А/Т и кл памяти, специфичные к данному А/Г). ], продуктивная [ синтез А/Гепецифических А/Т, ЦКинов и накопление их в биологических жидкостях (в сыворотке крови, слюне, секретах, цереброспинальной жидкости). Ур специф А/Т ↑ экспоненциально, максимум - формируется плато. 4дн-4нед. пик 14-21-йдень. Макс продуцирование А/Т к белковым А/Г (анатоксинам) - 3 недели ] и затухания [ процесс снижения уровеня А/Т вначале быстро, затем замедляется ] Вторичный — ИО на повторное введение АГ в организм. мех-змы И-логич памяти и прогрессивная клональная селекция АГспецифических клонов В- и Г- ЛЦитов. В отличие от первичного, возникает на д-ие АГ в меньшей дозе, развивается быстрее (короче индуктивная фаза) и, как правило, интенсивнее. более специфичный (синт-ся преимущественно АТ IgG), более напряженный и более зрелый (выше аффинность АТ); а вызываемый им протективный эффект сохраняется дольше. Причем динамика процесса АТобр-ния также носит экспоненциальный характер, но развивается он быстрее, а затухает значительно медленнее. Повторное введение АГ в организм с высоким уровнем АТ к нему может не дать эффекта усиления ИО. Существует два варианта ГИО. Если ответ происходит на Т - независимые АГ, то это т. н. простой ответ: А/Г способны сами активировать Т-ЛЦиты. В этом случае синтез IgM не сопровождается обр-нием клеток памяти. В случае, если ответ формируется в ответ на Т- зависимые АГ, происходит кооперация Т- и В-ЛЦитов. Выделяют следующие стадии: распознавание А/Г; презентация А/Г - МФг поглощает А/Г, расщепляет, соединяет с белками МНС I и МКС II и переносит на мембрану; передача информации на Т- хелпер; бласттрансформация В- ЛЦитов, дифф-ка бластов в плазмациты и В- клетки памати; синтез А/Т и элиминация А/Г. Ф-ция АТ: активация с-мы кмпл-та, нейтрализация токсинов, опсонизация А/Г, преципитация мелких А/Г.

55 Аí ò è ò å ë à АТ - Ig, продуцируемые В-ЛЦитами (плазматич клетками). Мономеры Ig-инов состоят из двух тяжелых (Н-цепи) и двух легких (L-цепи) полипептидных цепей, связанных дисульфидной связью. Эти цепи имеют константные (С) и вариабельные (V) участки. Папаин расщепляет м-лу Ig на два одинаковых АГсвязывающих фрагмента - Fab (Fragment anligen binding) и Fc (Fragmenl crislalhzable).

Ig подразделяют на классы в зависимости от структуры, свойств и А/Гных особенностей их легких и тя­желых цепей. Легкие цепи в м-лах Ig пред­ставлены двумя изотипами —ламбда (λ ) и каппа (κ ), кот. различаются по химическому составу как вариабельных, так и константных участков, в частности наличием модифицированной аминогруппы на N-конце х-цепи. Тяжелые цепи Ig-и­нов подразделены на 5 изотипов (γ, μ, α, β, ε ), кот. опред-т их принадлежность к одному из 5 классов Ig-инов: G, M, A, D, Е соответственно. Они отличаются друг от друга физико-химическими особенностями и биологическими свойствами.

Аллотипич вари­анты (аллотипы) Ig, несущие индивидуаль­ные АГнные генетич маркеры. Это объясняется нали­чием в плазмоцитах аллельных генов, контролирующих синтез того или другого аллотипа Ig-на. Каждая плазма­тич клетка продуцирует А/Т одного аллотипа. Наличием специфич для каждого Ig-ина А/Гсвязывающего участка, обр-нного гипервариабель­ными доменами легкой и тяжелой цепи, обусловлены их различ­ные А/Гные свойства. Эти различия положены в основу деления Ig-инов на идиотипы. V-домены разных по своей специфичности Ig-инов можно различить и по их А/Гным свойствам (идиотипам). Накопление любых А/Т, несущих в структуре своих активных центров новые для организма А/Гные эпитопы (идиотипы), приводит к индукции ИОна них с обр-нием А/Т, получив­ших название антиидиотипических. î ï ð å ä å ë å í è ÿ Ig: радиальная иммунодиффузия, радиоиммуноэлектродиффузия

56 Ê î í ò ð î ë ü ñ -ç à Ig (см. в. 55 аллотипы) АТ способны отличать один АГ от другого. Они взаимод-уют только с теми АГми (за редким исключением), против которых они выработаны и подходят к ним по пространственной структуре (комплиментарность). Специфичность АТ обусловлена химич структурой, пространственным рисунком антидетерминант. Она связана с первичной структурой белковой м-лы АТ. Тяжелые и легкие цепи Ig-инов обусловливают специфичность активного центра. В Форм-нии комплекса АГ-АТ участвуют возникающие между ионными группами кулоновские силы и силы притяжения Ван-Дер-Ваальса, полярные силы и силы Лондона, межатомные ковалентные связи. Известно, что взаимод-уют они как целые м-лы. Поэтому на одну м-лу АГ приходится значительное количество м-л АТ. Они создают слой толщиной до 30 А⁰. Комплекс АГ-АТ разъединим с сохранением первоначальных свойств м-л. Первая фаза соединения АТ с АГ неспецифич, невидимая, характеризуется абсорбцией АТ на пов-сти АГ или гаптена. Протекает при температуре 37°С за несколько минут. Вторая фаза специфич, видимая, завершается феноменом агглютинации, преципитации или лизиса. В этой фазе необходимо присутствие электролитов, а в некоторых случаях и кмпл-та. Несмотря на обратимость процесса, комплексообр-ние между АГом и АТм играет положительную роль в защите организма, кот. сводится к опсонизации, нейтрализации, иммобилизации и ускоренной элиминации АГ. Аффинность АТ - сила связывания отдельной детерминаты (эпитопа)АГ с определенным активным центром- комбинаторным участком м-лы Ig (паратопом). Авидность АТ - кумулятивная сила связывания комбинаторных участков АТ (паратопов) с АГными детерминантами (эпитопами) сложного АГ.

57. Ñ å ð î ë î ã è ÷ å ñ ê è é ì å ò î ä в основе лежит р. специфич взаимод-ия АГ и АТ 1. Серологич диагностика инфекц и иммунных забол-й, осн на обнаруж АТ Диагноз: а) обнаружение АТ к возбудителю болезни в диагностическом титре. т. е. в таком разведении сыворотки, в котором р. может бытьположительна только у больных и отрицательна у здоровых; б) нарастание титра АТ при повторном исследовании в динамике болезни, что позволяет отличить забол-ние от поствакцинального или постинфекционного И-тета. 2. Серологич диагностика инфекц забол-й, осн на обнаруж в биол жидкостях или тканях АГ патогенных М/Бов. 3. Серологич идентификация неизвестных МБов, выделенных при бактериологическом методе.

58. Ð. à ã ã ë þ ò è í à ö è è Р. агглютинации (от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, ЭрЦитов и др. ) АТми в присутствии электролитов - натрия хлорида. РА проявляется в виде хлопьев или осадка. РА исп для: Определения возбудителя, Определения АТ в сыворотке крови больного. Методы постановки: - РА на стекле. К капле агглютинирующей сыворотки (разведение 1: 20) добавляют взвесь бактерии, выделенных от больного. Образуется хлопьевидный осадок. - Развернутая РА с сывороткой крови. К разведениям сыворотки добавляют диагностикум.

Ð. ê î à ã ã ë þ ò è í à ö è è : реагенты: диагностикум стрептококка группы /А/, коагглютинационный - специфические кроличьи АТ к групповому АГ стрептококка группы А, сорбированные на клетках золотистого стафилококка - 1 фл; контрольный диагностикум /К-/, иммуноглобулины нормальной кроличьей сыв-ки, сорбированные на кл золотистого стаф-кка - 1 фл; положительный контр образец /К+А/ - экстракт группоспецифического полисахарида стр-кка группы А - 1 фл; раствор для экстракции № 1 - 1 фл; раствор для экстракции № 2 - 1 фл. ...

59. РПГА В РПГА выявляют АТ сыворотки крови с помощью АГного ЭрЦитарного диагностикума, кот. представляет собой ЭрЦиты с адсрб-нными на них АГми. ЭрЦиты (или частицы латекса) с адсрб-нными на них АГми взаимод-уют с соотв-ми АТми сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение ЭрЦитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной р. ЭрЦиты оседают в виде пуговки. В РОПГА применяют АТный ЭрЦитарный диагностикум - ЭрЦиты, на которых адсрб-ны АТ.

60. Иì ì ó í î ï ð å ö è ï è ò à ö è я - это форм-ние и осаждение к-кса р-римого м-лярного АГ с АТми в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании АГ и АТ в эквивалентных количествах, избыток одного из них снижает уровень обр-ния иммунного комплекса.

Р. преципитации ставят в пробирках (р. кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое распространение получили разновидности р. преципитации в полужидком геле агара или агарозы, двойная И-диффузия по Оухтерлони, радиальная И-диффузия, И-эпектрофорез и др. Р. кольцепреципитации проводят в узких преципитационных пробирках: на И-ую сыворотку наслаивают р-римый АГ. При оптимальном соотношении АГ и АТ на границе этих двух р-ров образуется непрозрачное кольцо преципитата.

61. РСК РСК: при соответствии друг другу АГ и АТ обр имм к-кс, к кот ч/з Fc-фрагмент АТ присоединяется кмпл-т (С). Если же комплекс АГ - АТ не образуется, то кмпл-т остается свободным. две фазы РСК: 1)инкубация смеси, содержащей АГ + АТ + кмпл-т, 2) (индикаторная) - выявление в смеси свободного кмпл-та - доб гемолитич с-мы, сост из ЭрЦитов барана, и гемолитич сыворотки, сод АТ к ним. " +" - нет гемолиза. " -" кмпл-т остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу Er-антиErное АТ=> гемолиз.

Иммунный лизис - это растворение клеток под воздействием антител при обязательном участии комплемента. ...

62. РИФ (метод Кунса). 1)прямой метод, 2)непрямой, 3)с кмпл-том. Р. Кунса является методом экспресс-диагностики для выявления АГ М/Бов или определения АТ. Прямой метод  АГ тканей или МБы, обработанные иммунными сыворотками с АТми, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа (Б светятся по кайме зеленым цветом). Непрямой метод -выявление к-кса АГ-АТ с пом антиглобулиновой (против АТ) сыворотки, меченной флюорохромом. Мазки из взвеси МБов обрабатывают АТми антиМБной кроличьей диагностич сыворотки. несвяз отмывают, а оставшиеся на МБах АТ выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс М/Б+ антиМ/Бные кроличьи АТ+антикроличьи АТ, меченные флюорохромом. в люминесцентном микроскопе. Радиоиммунный метод, или анализ (РИА), - высокочувствительный метод, основанный на р. АГ-АТ меченных радионуклидом (125J, 14С, ЗН, 51Сг и др). Интенсивность бета- или гамма-излучения ~ кол-ву св-хся АГ и АТ. Иммуиоф-нтный анализ, ( ИФА ) - выявление АГ с пом АТ, конъюгированных с ф-нтом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазной и или щелочной фосфатазой). затем субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ф-нтом и изменяется цвет продукта р. - интенсивность окраски ~ кол-ву связавшихся АГ и АТ. (диагн вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики сальмонеллеза, микоплазмозов и др., а также определения гормонов, ф-нтов, лекарственных препаратов и других БАВ в минорных кнциях-1010 -1012 г/л. Твердофазный ИФА - АГ или АТ сорбирован на твердом носителе (в лунках планшеток из полистирола). добавл меченых АТ или АГ. " +" - изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного комп-а из лунок удаляют не связавшиеся реагенты путем промывания. добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ф-нтом и субстрат/хромоген для ф-нта.

II. При определении АГ в лунки с сорбированными АТми вносят АГ (напр., сыворотку крови с искомым АГом), добавляют диагностич сыворотку против него и вторичные АТ (против диагностич сыворотки), меченные ф-нтом, а затем субстрат/хромоген для ф-нта. È ì ­ì ó í î á ë î ò ò è í ã нанесение сыворотки больного на нитроцеллюлозную мембрану, пропитанную антигеном в виде полос. На тест-мембрану наносятся четыре антигена, включающие, помимо антигенов вируса, еще и антигены для контроля за связыванием неспецифических иммуногло-булинов и антител к супероксиддисмутазе, которые способны повлиять на результаты теста. È ì ì ó í í à ÿ ý ë å ê ò ð î í í à ÿ ì è ê ð î ñ ê î ï è ÿ с помощью АТ, меченных ферритином, для выявления экстрацеллярных АГ микробов и вирусных АГ на поверхности клетки, а также поверхностных антигенов в клетке. неэффективна д/иссл внутрикл объектов.

63. T-ñ è ñ ò å ì à Иò à. Т-ЛЦ: Т-хелперы: Th0 узнают АГ на макрофаге и индуц пролиф-ю и дифф-ку => обр. ИЛ (рег обр Th1, Th2, Тh3). Th1-> ИЛ-> обр. Ткиллеров(КИО), Th2-> В-ЛЦ=> плазматич. кл-> АТ(ГИО), Тh3-> подавл КИО и ГИО. Кл. иммуннологич. памяти. -вторич. ИО

По спектру биологич активности Т-ЛЦиты являются регуляторными и эффекторными клетками, обеспечивающими адаптационную ф-цию Т-с-мы И-тета. Они не продуц-ют м-л АТ. ТКР является мембранной м-лой, отличающейся от ВКР, но структурно и ф-ционально близкой к АТм. осн субпопуляции Т-ЛЦитов A. Хелперы, эффекторы ГЗТ (CD 4+) и Супрессоры-цитотоксич (CD 8+); B. Нестимул-ванные (CD 45 RA+) и клетки памяти (CD 45 RO+);

C. Тип 1 - (ИЛ-2, ИНФ-гамма, ТНФ-бэта продуц-ющие); Тип 2 - (ИЛ-4, 5, 6, 9, 10 продуц-ющие). ...

64 Ò -ê ë å ò î ÷ í û é ð å ö å ï ò î ð TCR – АГ-специф. рец-р. Это главная м-ла, относящаяся к суперсемейству Ig. Она имеет 3 части: надмембр, мембранную и ЦПтич. Хвост TCR формируют 2 глобулярные м-лы альфа и бета, кот. имеют вариабельные и константные домены (Vα и Vβ, Сα и Сβ ). Vα и Vβ формируют активный комплекс TCR. Там есть 3 гипервариабельных участка – константнодетерминированные области (КДО). Ф-ция КДО - распозн и связывание Т-клеточ пептидов, т. е. детерминантных групп АГ. TCR плотно сидит на клетке и его ЦПтич хвост, его ЦПтич часть, учавствует в проведении инф. в ядро при его взаимод-ии с АГ. Примерно 90 % TCR несут цепи α и β, а примерно 10% несут цепи δ (дельта) и γ. TCR кодируется генетически. α и γ цепи по аналогии с легкими цепями Ig кодируются V, G и C – генами, а β и δ по аналогии с тяжелыми цепями ИГ - V, G, E. α и γ в 7-й хромосоме, а β и δ в 14. CD-3 рец-р – это кмпл-тарная структура, Ig м-ла. Она обр-на 3-мя трансмембр белками: ε δ, ε γ и димер-дзета, надмембранный, мембранный и цитозолный хвост. Они с TCR представляют единый комплекс, Кот. обеспечивает проведение АГ –специфических сигналов в ядро клетки. СD4 и СD8 экспрессируют или одновременно с TCR или отдельно от него. Играют ф-цию ко-рец-ров. Они усиливают адгезию с АГ-презентирующей клеткой. Обеспечивают проведение АГ-специфич сигнала в ядро клетки.

Т-ЛЦиты разделены по типу разпозн м-л: СD4 распозн пептид ГКГ 2-го класса, СD8 пептид + ГКГ 1-го класса, СD2

Активация: 1. Мембр проц, связ. с разпозн. Т-лимф. Пептид+ГКГ I или II. 2. Цитозольные хвосты связ с протеинкиназами. Сигнал при расп. АГ с мембр. клетки усиливается, запускается каскад протеинкиназ, вовлекается фосфолипаза С, идет активация белков, кот. связаны с ДНК Т-ЛЦита.

3. Клетки вырабатывают ИЛ-2 под д-ием кот. примерно через 12 часов клетки трнсфм-уются в бласты. Пролиферация идет дальше и бласты дифференц-ются в зрелые Т-ЛЦитные клетки.

Анергия — полная или частичная утрата организмом специфич И-логич реактивности (обычно в форме ГЗТ). Выявляется с помощью внутрикожных тестов на анамнестич АГ. Дает отриц рез-ты при ВИЧ-инфекции, у больных туберкулезом, лепрой, у онкобольных. отриц или сниженный пролиферативный ответ CD4+ Т-ЛЦитов на специфич АГ и митогены in vitro и in vivo. Различают центральную и периферич анергию. Последняя выражается полной или частичной утратой способности ИКК к активации вследствие блокирования АГ-специфических рец-ров, повреждения мех-змов костимуляции

Апоптоз —мех-зм запрограммированной гибели кл или группы кл. Сигналы для апоптоза акт-ют ф-нты, кот. вызывают фрагментацию ДНК на участки 50-300 п. н. и разрушение кл. начинаются фц-тоз и элиминация апоптозных телец МФгами. Признаки: уменьшение размеров, уплотнение и фрагментация хроматина, скопление его возле яд. мембраны, уменьшение объема ЦП. не сопровождается восп и поврежд тканей. индуцируется большинством в-в (в малых кнциях), вызывающих некроз, а также сигналами от регуляторных клеточных м-л (г-ов, ЦКинов, АГ, суперАГ, моноклональных АТ). некроз — повреждение нормальных тканей

65. КИО -слож многокомп-ная кооперативная р. ИС, индуцированная чужеродным АГ (Т-клеточными эпитопами). Реализуется Т-с-мой И-тета. Этапы КИО: 1. захват АГ АПК 2. Процессир. АГ в протеосомах. 3. Обр-ние к-кса пептид+ ГКГ I и II класса. 4. Тр-рт кмпл-та на мембрану АПК. 5. Распознавание кмпл-та АГ-специфическими Т-хелперами1 6. активация АПК и Т-хелперов1, выделение Е-хелперами1 ИЛ-2 и гамма – интерферона. Пролиферация и дифф-ка в области АГ-зависимых Т-ЛЦитов. 7. Обр-ние зрелых Т-ЛЦитов разных популяций и Т-ЛЦитов памяти. 8. Взмд-ие зрелых Т-ЛЦитов с АГ и реализация конечного эффектора.

Проявления КИО: противоинф ИО: противовирусный, противопаразитарный, противобактериальный (внутриклеточно расположенные бактерии), аллергии IV и I типов; противоопухол ИО; трансплантационный ИО; И-логич толерантность; И-логич память; аутоимм. проц. Ì -ä û î ï ð -ÿ ê î ë -â à è ô ó í ê ö à ê ò -ñ ò è T-ЛЦ:

Серологич м-д исследования включает ряд р-ций: агглютинации, преципитации, связывания кмпл-та, И-флюоресценции, иммуиоф-нтного и радиоИ-логич анализа. Диагностикум - взвесь известных МБов или АГ, предназначенных для серологич диагностики забол-ний по обнаруж АТ в сыв-ке больного. высокая специфичность, относительная простота, доступность, безопасность, быстрота (от 10 мин. до 4 часов) получения результатов. Но при острых инф забол-ниях обнаружение АТ часто бывает ретроспективным диагнозом. Е-розетки - ЛЦиты с прилипшими к ним 3 и более Er барана - осн на наличии на мембране Т-лимфорец-ров к Er барана. Кожно-аллергич пробы с соотв-ми АГми или в-вами, имитирующими АГ (фитогемагглютинин), кот. названы мутагенами; Р. бластной трансформации ЛЦитов с фитогемаглютином или соотв-м АГм проявляется в превращении ЛЦитов в более крупные молодые клетки - бласты, число которых подсчитывается в препарате на 200 ЛЦитов. Р. подавления миграции МФгов или гранулоцитов под д-ем ф-ра, продуцируемого Т-лц-ми при взаимод-ии со специфическим АГ. ЛЦ чел-ка смешивают с предполагаемым АГ, а через 18 часов в каплю полученной культуральной жидкости опускают капилляр, наполненный подвижными МФгами или гранулоцитами и через сутки измер степень их миграции из опытного и контрольного (без АГ) капилляров. Их отношение называется индексом подавления миграции. Определение цитотоксичности Т-киллеров выявляется при взаимод-ии ЛЦитов больного с клетками-мишенями, т. е. клетками, выдавшими их обр-ние. Подсчитывается количество погибших клеток.

66. Ò ð à í ñ ï ë à í ò à ö. Иò å ò. Трансплантационный И-тет — состояние повыш имм реактивности организма в ответ на пересадку органа или ткани, взятых от другой, генетически отличающейся особи. Р-ции: 1)мононуклеар клеточ инфильтрация трансплантата, кровоизлияниями и отеком. Из - за гипоксии нередко развивается фиброз. можно затормозить И-супрессорами. Полагают, что генетически чужеродный трансплантат отторгается в результате инфильтрации пересаженной ткани Т-киллерами, кот. выд лимфотоксин. Разрушение ЛЦитами усиливается при возд-ии иммунных АТ (АТзависимый цитолиз). 2) позднее отторжение трансплантата. Проявляется в основном у пациентов с ИДС. пролиферация эндотелия сосудов с последующим сужением просвета => ишемия и некроз трансплантата. 3)гипериммунное отторжение -если АГ трансплантата раньше уже попадали в организм (при беременности, переливании крови, предыдущей трансплантации). Отторжение и деструкция развиваются в течение часов и даже минут. Р. опосредована гуморально, характеризуется тромбозом мелких сосудов, инфарктом трансплантата, лизисом клеток на границе " трансплантат - хозяин". Процесс необратим.

4) р. трансплантата против хозяина (РТПХ) (костный мозг). Для предупреждения отторжения необх: подбор донора по АГм гистосовместимости, типирование тканей по МНС, ABO, Rh; исключить " специфич презентацию" -предыдущее попадание АГ трансплантата в организм; проводить И-супрессивную терапию до приживания трансплантата (облучение, адренокортикотропные гормоны, антиметаболиты, антиЛЦитарная сыв). Ген. Контроль:

АГ ГКГС у чел-ка называются HLA (Human leucocyte antigene). М-лы гистосовместимости I и II классов кодируются генами с-мы гистосовместимости локусов А, В, С и D, кот. располагаются в коротком плече 7 хромосомы. Они характеризуются выраженным разнообразием. М-лы 1 класса состоят из тяжелой цепи (45 кДа) нековалентно связанной с В-2 микроглобулином (12 кДа). Они могут быть фиксированы на мембране клеток, так и обнаруживаться в сыворотке и других жидкостях организма. Тяжелая цепь м-лы состоит из 3-х внеклеточных доменов, обозначенных - al (N-терминальный), а2 и аЗ, трансмембранной области и цитоплаэматич хвоста. Они экспедированы как на И-компетентных, так и на соматических клетках. È -ë î ã è ÷ å ñ ê à ÿ ò î ë å ð à í ò í î ñ ò ü : врожденная/ приобретенная (чаще обратима: Высокодозовая при попадании больших доз толерогена, особенно на фоне подавления иммунитета. большое кол-во АГ выз гибель реактивных к нему ЛЦитов. Низкодозовая опосредована активацией клеток-супрессоров,

67. Ï ð î ò è â î è í ô Итет В отличие от вакцин, при использовании которых у человека формируется антиМБный И-т, анатоксин формирует антитоксический И-т, так как они индуцируют с-з антитоксических антител — антитоксинов. противовирусный, противопаразитарный, противобактериальный (внутриклеточно расп бактерии); аллергии IV и I типов; ... +? в. 45

68. È мм-ï ð î ô -ê à è Имм-ò å ð à ï è ÿ. вакцины: профилактические и лечебные. •По х-ру МО, из которых они созданы: бактериальные вирусные риккетсиозные. •моно- и поливакцины. • живые; сод живые аттенуированные штаммы возбудителей с резко сниженной вирулентностью или штаммы непатогенных для человека МО, близкородственных возбудителю в антигенном отношении (дивергентные штаммы). К ним относят и рекомбинантные (генно-инженерные) вакци­ны, содержащие векторные штаммы. • убитые; сод убитые к-ры (цельноклеточные, цельновирионные). Их готовят из микроор­ганизмов, инактивированных прогреванием (гретые), УФ, хим в-вами (формалином — формоловые, фенолом — карболовые, спиртом — спиртовые и др. ) в условиях, исключающих денатурацию АГ. ммунногенность ниже, чем у живых. К ним относят и химические вакцины, сод опр хим комп возбудителей (субклеточные, субвирионные). менее реактогенны и м/исп д/детей. антиидиотипические- АТк идиотипу АТ человека (анти-антитела). Их АЦ аналогичен детерминантной группе АГ, вызв-­го обр-е идиотипа. • комбинированные. искусственные вакцинысост из МБного АГнного комп-нта (обычно выделенного и очищенного или искусственно синтезированного антигена возбудителя) и синтетических полиионов (полиакриловая кислота и др. ) — мощных стим-ров ИО (" Гриппол" ). Адъюванты для повышения иммуногенности (алюмо-калиевые квасцы, гидроксид или фосфат алюминия, масляная эмульсию), создают депо АГ или стим фаг-з и ­повыш чужеродность АГ.

Анатоксин - экзот-н, лишенный токс св-в, но сохранивший АГнные. В отличие от вакцин, при использовании которых у человека формируется антиМБный И-т, анатоксин формирует антитоксический И-т, так как они индуцируют с-з антитоксических антител — антитоксинов. (дифтерийный; столбнячный; ботулинический; стафилококковый анатоксины; холероген-анатоксин). Ассоцииров. вакц сод АГ бактерий и анатоксины (АКДС (адс-нная коклюшно-дифтерийно-столбнячная) Требования: Безопасность; Протективность; Длительность сохранения протективности; Стимуляция обр-ния нейтрализующих АТ; Стимуляция эффекторных Т-ЛЦитов; Длительность сохр И-логич памяти; Низкая стоимость; Биологич стабильность при тр-ртировке и хранении; Низкая реактогенность; Простота введения.