Лабораторная работа 9. Действие активаторов и ингибиторов на амилазу слюны»

Лабораторная работа 9

«Действие активаторов и ингибиторов на амилазу слюны»

Работу выполняет один студент, затем докладывает результаты всей группе. В штативе расположите тремя рядами 36 пробирок и пронумеруйте их в каждом ряду. Во все пробирки влейте по 1 мл воды, а затем в первые пробирки каждого ряда – по 1 мл профильтрованной неразбавленной слюны. Содержимое пробирок хорошо перемешайте. Далее в каждом ряду 1 мл смеси из пробирки 1 перенесите в пробирку 2, перемешайте, снова наберите 1 мл смеси и перенесите в пробирку 3 и т. д. вплоть до пробирки 12, из которой после перемешивания вылейте 1 мл жидкости. Во все пробирки первого ряда налейте по 1 мл воды (контрольный ряд); в пробирки второго ряда – по 1 мл раствора хлорида натрия и в пробирки третьего ряда – по 1 мл раствора сульфата меди. Далее во все пробирки прилейте по 2 мл раствора крахмала в следующем порядке: сначала в первые номера всех рядов, затем во вторые и т. д. Содержимое пробирок перемешайте и поставьте штатив с пробирками в термостат при 40С на 15 мин. По охлаждении в каждую пробирку добавьте по капле раствора иода в иодиде калия и отметьте в каждом ряду номер пробирки, в которой реакция на крахмал отрицательная. Деля степень разведения контрольной пробы, в которой реакция с иодом отрицательна, на степень разведения соответствующих проб с исследуемыми эффекторами, вычислите, во сколько раз активатор (NaCl) или ингибитор (CuSO4) стимулирует или тормозит действие амилазы слюны.

1. а) лактат + НАД+ ⇄ пируват + НАДН + Н+ ;

Лактатдегидрогеназа (класс: оксидодередуктазы, подкласс: оксидазы)

б) сукцинат + ФАД ® фумарат + ФАДН2;

Сукцинатдегидрогеназа (класс: оксидоредуктазы, подкласс: анаэробные дегидрогеназы)

в) аспартат + пируват ⇄ аланин + оксалоацетат;

Пиридоксальфосфат (класс: трансферазы, подкласс: аминотрансферазы)

г) сахароза + Н3РО4 ⇄ глюкозо-1-фосфат + фруктоза.

Фермент: сахарозофосфорилаза (класс: трансфераза, подкласс: гликозитрансферазы)

На первый раз прощаю использование готовых картинок вместо того, чтобы писать формулы самому. Но уж если из моей презентации картинка копируется, то название фермента можно было бы тоже списать (оно слайдом выше приведено!).

2. Рассчитайте молекулярную массу сукцинатдегидрогеназы, в состав молекулы которой входит 8 атомов железа, при содержании последнего 0,22%.

M(Fe) = 56 г/моль

56 * 8 = 448 (г/моль) – это что?

448-0,22%
Х-100%
Х= 203630 (г/моль)

Нужно было найти молекулярную массу, а Вы что нашли? Численно молекулярная и молярная массы совпадают, но это все-таки разные величины!

3. В составе молекулы рибонуклеазы содержится 10 остатков лизина, мольная доля которого в молекуле равна 8,06%. Оцените относительную молекулярную массу фермента.

1461,9(г/моль) –это что? – 8,06%
Х – 100%
Х = 146190:8,06 = 18137,7 (г/моль) – М_общМ(фермент)= 1813,77-1461,9=16675,8(г/моль)

Ничего не понял. Неверно

4. Один из самых активных ферментов – карбоангидраза – ускоряет обратимую реакцию гидратации углекислого газа: Н2О + СО2 ⇄ Н2СО3. В эксперименте установлено, что 10 мкг чистой карбоангидразы ускоряет гидратацию 0,3 г СО2 при 37°С за 1 мин. Также методом гель-хроматографии установлено, что молярная масса карбоангидразы равна 30000 г/моль. Рассчитайте молекулярную активность карбоангидразы.

V(субстрата)= 0,3:44 = 0,0068(моль)
V(фермента)=1*10^-4:30000=3,33*10^-10(моль)

V – так обозначается объем!

М.А. Е_m = 0,0068 : 3,33*10^-10=2*10⁷

5. Рассчитайте удельную активность гексокиназы (Mr = 102000), если ее молекулярная активность равна 1,7×104 мкмоль/мин.

Уд.А. Еуд. =102000*1,7*10-2 = 1734 (г/мин)

Неверно

Общая оценка 3

В задании 1 – ошибки в названиях ферментов и подклассов.

Задачи 3 и 5 решены неверно.

⇐ Предыдущая 1 23