Метод окрашивания микроорганизмов по Граму

Принцип метода основан на разнице в химическом составе клеточной стенки прокариотов. Грамположительные микроорганизмы способны задерживать комплекс красителей триметилфенолового ряда с йодом, тогда как грамотрицательные микроорганизмы не способны задерживать комплекс красителей триметилфенолового ряда с йодом.

ПРОВЕДЕНИЕ ОКРАШИВАНИЯ. Приготовление мазка:

Предметное стекло перед нанесением биоматериала обезжиривают в смеси Никифорова
На предметное стекло наносят несколько капель физиологического раствора.
Бактериологической петлей вносят исследуемый биоматериал в физ. раствор на стекле и ровным тонким слоем растирают эмульсию по всей поверхности стекла, без образования комков.
Высушивают препарат на воздухе, фиксируют над плменем спиртовки.

Окрашивание по Граму:

На поверхность сухого мазка кладут полоску фильтровальной бумаги.
Наносят 2-3 капли рабочего раствора генциана фиолетового.
Выдерживают 2 минуты.
Удаляют фильтровальную бумагу.
Не промывая водой, на препарат наносят 2-3 капли раствора Люголя.
Выдерживают 1-2 минуты до почернения препарата.
Сливают остатки жидкости с препарата.
Обесцвечивают препарат в течение 30-45 секунд 96% спиртом, погружая его в емкость со спиртом.
Промывают препарат водой.
Наносят 2-3 капли карболового раствора фуксина.
Выдерживают на протяжении 2 минут.
Сливают остатки фукцина и промывают препарат водой.
Высушивают препарат на воздухе.
Микроскопируют с иммерсионной системой.

Интерпретация результатов:

Грамположительные бактерии (Гр+) – сине-фиолетового цвета,

12 Следующая ⇒