Хелпикс

Главная

Контакты

Случайная статья





Метод окрашивания микроорганизмов по Граму



Принцип метода основан на разнице в химическом составе клеточной стенки прокариотов. Грамположительные микроорганизмы способны задерживать комплекс красителей триметилфенолового ряда с йодом, тогда как грамотрицательные микроорганизмы не способны задерживать комплекс красителей триметилфенолового ряда с йодом.

ПРОВЕДЕНИЕ ОКРАШИВАНИЯ. Приготовление мазка:

  1. Предметное стекло перед нанесением биоматериала обезжиривают в смеси Никифорова
  2. На предметное стекло наносят несколько капель физиологического раствора.
  3. Бактериологической петлей вносят исследуемый биоматериал в физ. раствор на стекле и ровным тонким слоем растирают эмульсию по всей поверхности стекла, без образования комков.
  4. Высушивают препарат на воздухе, фиксируют над плменем спиртовки.

Окрашивание по Граму:

  1. На поверхность сухого мазка кладут полоску фильтровальной бумаги.
  2. Наносят 2-3 капли рабочего раствора генциана фиолетового.
  3. Выдерживают 2 минуты.
  4. Удаляют фильтровальную бумагу.
  5. Не промывая водой, на препарат наносят 2-3 капли раствора Люголя.
  6. Выдерживают 1-2 минуты до почернения препарата.
  7. Сливают остатки жидкости с препарата.
  8. Обесцвечивают препарат в течение 30-45 секунд 96% спиртом, погружая его в емкость со спиртом.
  9. Промывают препарат водой.
  10. Наносят 2-3 капли карболового раствора фуксина.
  11. Выдерживают на протяжении 2 минут.
  12. Сливают остатки фукцина и промывают препарат водой.
  13. Высушивают препарат на воздухе.
  14. Микроскопируют с иммерсионной системой.

Интерпретация результатов:

Грамположительные бактерии (Гр+) – сине-фиолетового цвета,



  

© helpiks.su При использовании или копировании материалов прямая ссылка на сайт обязательна.