Ядрышки: строение, хромосомы и деление.

Ядрышки: строение, хромосомы и деление.

ЦЯ16

(а) (б)

(в) (г) (д)

(а) Обработка ядра ультразвуком 15 секунд, ядрышко и идущая к нему нить ДНК.

(б) Обработка ядра в течение 45 секунд, тоже видим ядрышко и более тонки нити ДНК.

(в) Ядрышко, обработанное ДНКазой, нитей нет.

(г) Обработка по Бернару (осветленные частицы – содержащие РНК и белок - то есть, ядрышко, темный – гетерохроматин).

(д) Наоборот, RNP выявляется темным, а DNP – светлым. Ядрышко неодинаково.

NC1

(а)

(а) Слева: светлым окрашено ядро и ядрышко, справа: большее увеличение ядрышка. FC – фибриллярный центр, вокруг него – фибриллярный компонент (ФК).

ФЦ немного более светлый, чем ФК. Самый светлый – ГК (гранулярный компонент).

(б) контроль (слева) и опыт (справа). Контроль: нормальное ядрышко. Опыт: ввели антитела к РНК-полимеразе 1, заблокировали ее деятельность. ФЦ выбился в сторону и все остальное представляет собой ГК.

AN1

Ядрышки ооцита тритона

(а) (б)

(в) (г)

(д)

(а) контраст Номарского. Позволяет лучше видеть мелкие структуры. Видим ядро с большим количеством ядрышек, преимущественно, по периферии (амплифицированные ядрышки, т. е. в них увеличено количество ДНК с целью увеличения синтеза).

(б) более крупно – ламповая щетка и колечки амплифицированных ядрышек.

(в) электронная микроскопия одного амплифицированного ядрышка, как в (а), формирующиеся рибосомы видны в виде гранул, это и есть ГК ядрышек.

(г) расправленные нити РНК и ДНК. Расправленные елочки Миллера. Все одинаковые, т. к. транслируют\транскрибируют рибосомы.

(д) хорошо видим елочку и спейсер без нуклеосом.

LBC4

Нерибосомная РНК, т. к. транскрипты разной длины (1 слева). Также есть синтез РНК в разные стороны. Спейсеры все покрыты нуклеасомами.

МС1

Метафазные хромосомы.

(а) (б)

(в) (г)

Метафазные пластинки наиболее компактизированны и по ним можно создать кариотип (сколько хромосом и как они выглядят).

(г) три кариотипа разных видов: 1. 5 – человека, 1. 4 – тритона, 1. 6 – дрозофилы. У близкородственных видов строение и количество хромосом сохраняется. Отличие есть у индийского и китайского мунтьяка (при примерно одинаковом количестве ДНК, у одного n=3, у второго n=23 – за счет слияния хромосом).

(в) мунтьяк с n=23. но это редкий способ эволюции.

MC2

(а) (б)

(в)

(а) человек. Хромосомы окрашены G-banding’ом (обработка сначала трипсином, потом – по Гимзе). Хромосомы неравномерно окрашены => создание карт хромосом. 2р24 – хромосома 2, большое плечо, 24 бэнд. 2q23 – 2 хромосома, короткое плечо, 23 бэнд. Схема на (б)

(в) 3 кариотипа: собака, волк и койот. Дифференциальное окрашивание сходно у близких видов, расположение генов не одинаково и иногда различается.

MC3

(а) (б)

(а) слева: хромосомы обработаны трипсином, справа: видны бэнды, полосы.

(б) как меняются хромосомы. с) целые хромосомы, а) недолго обрабатывались трипсином, b) нормальные, окрашенные по Гимзе, обработанные трипсином, d) очень сильно обработаны трипсином.

MC4

Белки окрашены там, где интерфазное ядро, ядрышко, или гены (для метафазы) в ядрышке, которые были активны в интерфазе.

(а) (б)

(а) окрашивание серебром. В центре часть хромосом более темная. Рядом – ядрышки в интерфазных ядрах.

(б) окрашивание солями серебра, окрашивают гетерохроматин. Есть части хромосомы, окрашенные более интенсивно – центромеры. Стрелочкой показана У-хромосома – гетерохроматин и почти отсутствуют гены.

(в)

(в) метафазная пластинка. Обработали рестриктазой (режет ДНК в области GG’CC. В хромосоме периодически есть повторы АТ – там не режется и где их много – показано стрелочками – более интенсивно окрашено, т. к. лучше сохраняется, т. к. не режется).

МС6

Метили бромдезоксиуридином, чтобы узнать, где ДНК синтезируется.

(а) (в)

(б) (г)

(в) хромосома и ее схема. Метод используется для определения хромосомных перестроек. В норме одна хроматида будет с синтезом и окрашена, вторая – нет.

(г) слева: видим хромосомы перед делением клетки. Картина как должно быть в (в). Справа: окрашивание нарушено вследствие перестроек.

(б) взаимодействие двух хромосом. И на левой (d) ничего не видно, кроме 1 места, где произошла перестройка.

МС5

(а)

(а) а) - фазовый контраст, метафазная хромосома, b) – идет сочетание фазового контраста и окрашивания флуоресцентной меткой (антитела к центромере), с) – окрашивание на хроматин, d) – антитела к центромерным белкам. На следующих фотографиях то же самое.

(б)

MC5’ - кинетохор

(а) (б) (в)

(а+б) темным окрашена ДНК. Видна слоистая структура кинетохора.

(в) целиком видна хромосома и от нее отходят микротрубочки.

СКС5

Разные стадии образования фрагмопласта. Растения.

(а) (б)

У Mm тип митоза определяется наличием или отсутствием разборки ядерной оболочки и направлением нитей веретена деления.

	Открытый (полностью разбирается ядерная оболочка)	Полуоткрытый/полузакрытый	Закрытый (ядерная оболочка не разбирается)
О Р Т О	Микротрубочки в 1 плоскости. Самый эволюционно новый и самый распространенный	Кинетохор не прикреплен к мембране. Микротрубочки – через дырки пор	Микротрубочки входят в ядро, расходятся по прямой
П Л Е В Р О	Не существует		Появляется эволюционно первым
			Кинетохоры внутри ядра и микротрубочки идут под углом и расходятся тоже под углом	Кинетохоры – экстраядерно, микротрубочки снаружи прикреплены к кинетохору

ЦРК5b

Сердечная мышца Mm. Когда идет деление, разбираются Z-диски. Большая темная хромосома и другие темные – митохондрии. Стрелочками показаны места, где были Z-диски.

ЦРК1

(а) (б)

(а+б) клетки стадии G1 (фибробласты)

(в) (г)

(в) самая распластанная клетка – стадия S. (г) основная часть клеток – G2 и только в левом верхнем углу – клетка в митозе. (д) клетка в митозе, более округленная, чем интерфазная.

(д)

ЦРК13

(а) (в)

(б1) (б2)

(г) (д)

(е) (ж)

(а) ранняя стадия образования веретена деления. Микротрубочки проходят через ядерную оболочку. У низших грибов ДНК не очень компактизуется при митозе, а значит, не очень видны хромосомы.

(б1 и б2) жгутиконосцы. Кинетохор встроен в мембрану. Сверху от него – микротрубочки, снизу – ДНК.

(д) динофлагелляты. Хроматин лучше упакован. В ядерной оболочке – кинетохор, к которому крепятся микротрубочки, к которым, в свою очередь, крепятся хромосомы, сильно компактизованные.

(в) то же самое, но менее понятно.

(е) тоже низшие грибы и ничего не понятно.

(г) дрожжи. У них тоже закрытый митоз и мы видим не очень сильно компактизованные хромосомы.

(ж) кокцидии. (паразиты, у которых образуется полиплоидные ядра, лопасти и в каждой лопасти – митотические веретена. Мы видим одну такую лопасть. )