Хелпикс

Главная

Контакты

Случайная статья





Выполнила Шуклина Даша 210л



                                                Реакция Райта

Реакция агглютинации (РА), применяемая как серологический метод диагностики бруцеллёза у животных и людей.

Компоненты:
1. Титрованная сыворотка больного в разведении 1: 25
2. Антиген- взвесь убитых бруцелл (диагностикум Райта)

Постановка: в пробирках
Инкубация: 18-20 часов

Постановки реакции.
В пробирки разливают физиологический раствор: в первую - 2, 4 мл, в остальные по 0, 5 мл. В первую пробирку добавляют 0, 1 мл исследуемой сыворотки, перемешивают, переносят 0, 5 мл в третью пробирку и т. д. Из последней пробирки 0, 5 мл смеси выливают, в результате получают в каждой пробирке по 0, 5 мл следующих разведений 1: 25, 1: 50, 1: 100, 1: 200 и т. д. Из первой пробирки 0, 5 мл переносят в чистую пробирку и добавляют туда 0, 5 мл физиологического раствора (контроль сыворотки в разведении 1: 50), а 1, 0 мл выливают.

Диагностикум разводят физиологическим раствором согласно прилагаемому к нему наставлению и добавляют по 0, 5 мл во все пробирки, кроме контроля. После добавления диагностикума разведение сыворотки соответственно удваивается, т. е. получается 1: 50, 1: 100 и т. д. Сыворотки с антигеном смешивают путем встряхивания и помещают в термостат (37 °C ) на 18 - 20 часов. После инкубации пробирки выдерживают 1 - 2 часа при комнатной температуре и проводят учет реакции. Учет реакции проводят по стандарту мутности в зависимости от степени осаждения агглютината и просветления жидкости.

Механизм:
1. Готовят разведения диагностикума с известными АГ в двукратных разведениях начиная с 1: 100.
2. Добавляют несколько капель сыворотки больного с неизвестными АТ, предположительно бруцеллезными.
3. В разведениях, в которых присутствует достаточное количество АГ, для связи с внесенными АТ, образуются ИК, т. е. помутнение и осадок.
4. Также имеется контроль сыворотки (КС) - АТ не должны связываться друг с другом, без присутствия АГ; и контроль диагностикума (КД) - АГ не должны образовывать осадок без добавления АТ.

Учет: по соотношению титра АТ и Диагностического титра (ДТ)
Реакция Райта (+) если титр АТ > ДТ
Реакция Райта (-) если титр АТ < ДТ

Результат: титр АТ=1/1600; ДТ=1/200
Заключение: Пациент болен бруцеллезом.

 

 

 



  

© helpiks.su При использовании или копировании материалов прямая ссылка на сайт обязательна.