Выполнила Шуклина Даша 210л
Реакция Райта
Реакция агглютинации (РА), применяемая как серологический метод диагностики бруцеллёза у животных и людей.
Компоненты: 1. Титрованная сыворотка больного в разведении 1: 25 2. Антиген- взвесь убитых бруцелл (диагностикум Райта)
Постановка: в пробирках Инкубация: 18-20 часов
Постановки реакции. В пробирки разливают физиологический раствор: в первую - 2, 4 мл, в остальные по 0, 5 мл. В первую пробирку добавляют 0, 1 мл исследуемой сыворотки, перемешивают, переносят 0, 5 мл в третью пробирку и т. д. Из последней пробирки 0, 5 мл смеси выливают, в результате получают в каждой пробирке по 0, 5 мл следующих разведений 1: 25, 1: 50, 1: 100, 1: 200 и т. д. Из первой пробирки 0, 5 мл переносят в чистую пробирку и добавляют туда 0, 5 мл физиологического раствора (контроль сыворотки в разведении 1: 50), а 1, 0 мл выливают.
Диагностикум разводят физиологическим раствором согласно прилагаемому к нему наставлению и добавляют по 0, 5 мл во все пробирки, кроме контроля. После добавления диагностикума разведение сыворотки соответственно удваивается, т. е. получается 1: 50, 1: 100 и т. д. Сыворотки с антигеном смешивают путем встряхивания и помещают в термостат (37 °C ) на 18 - 20 часов. После инкубации пробирки выдерживают 1 - 2 часа при комнатной температуре и проводят учет реакции. Учет реакции проводят по стандарту мутности в зависимости от степени осаждения агглютината и просветления жидкости.
Механизм: 1. Готовят разведения диагностикума с известными АГ в двукратных разведениях начиная с 1: 100. 2. Добавляют несколько капель сыворотки больного с неизвестными АТ, предположительно бруцеллезными. 3. В разведениях, в которых присутствует достаточное количество АГ, для связи с внесенными АТ, образуются ИК, т. е. помутнение и осадок. 4. Также имеется контроль сыворотки (КС) - АТ не должны связываться друг с другом, без присутствия АГ; и контроль диагностикума (КД) - АГ не должны образовывать осадок без добавления АТ.
Учет: по соотношению титра АТ и Диагностического титра (ДТ) Реакция Райта (+) если титр АТ > ДТ Реакция Райта (-) если титр АТ < ДТ
Результат: титр АТ=1/1600; ДТ=1/200 Заключение: Пациент болен бруцеллезом.
|