Вторая лекция

Антимикробная химиотерапия. Антибиотики

Химиотерапия – это специфическое лечение инфекционных и опухолевых заболеваний при поммощи химических веществ, которые избирательно действуют на болезнетворные микроорганизмы в условиях макроорганизма.

-составная часть фармакотерапии. Она обеспечивает этиотропную терпию ( терапию, направленную на возбудителя заболевания)

Выделяют следующие основные группы химиопрепаратов:

§ Сульфаниламиды

§ Диаминопиримидины

§ Нитрофураны

§ Хинолоны и фторхинолоны

§ Азолы

§ Эхинокандины

§ антибиотики

§ Лантобиотики (синтезированные на рибосомах трансляционно модифицированные пептиды)

Антибиотики – это химические вещества биологической природы, способные подавлять рост микроорганизмов или вызывать их гибель.

Существуют различные подходы к классификации АБ

1. По продуцентам. В основе получения антибиотиков лежит принцип антагонизма. Продуцентами антибиотиков могут быть грибы, актиномицеты, бактерии, ткани животных, растения

2. По химическому строению

3. По направленности действия: протиопротозойные, противогрибковые, антибактериальные

4. По характеру действия: бактерицидные, бактериостатические

5. По спектру действия: антибиотики с узким и антибиотики с широким спектром действия

6. По механизму действия на бактерии

Все антибиотики действуют только на бактерии, находящиеся в состоянии вегетативной и метаболической активности. Они нарушают те или иные этапы метаболизма клетки и не повреждают готовые клеточные структуры

1. Антибиотики, нарушающие синтез муреина:

~ Бета-лактамные антибиотики

~ Пенициллины

~ Цефалоспорины (5 поколений)

~ Монобактамы

~ Карбопенемы

~ Гликопептиды, липогликопептиды, липопептиды

2. Антибиотики, нарушающие синтез белка:

~ Амиогликозиды

~ Тетрациклины

~ Линкозамиды

~ Макролиды

~ Хлорамфеникол

~ Оксазолидиноны

~ Тигециклин

3. Антибиотики, нарушающие энергетические процессы клетки:

~ Полимиксины

~ полиены

4. Антибиотики, нарушающие синтез нуклеиновых кислот:

~ Ансамицины – ингибиторы ДНК – зависимой РНК полимеразы (рифамицины)

5. Антибиотики ингибиторующие ДНК матрикса биопленки

6. Антибиотики ингибиторы сигнальной пептидазы грамотрицательных бактерий:

~ Ариломицин

Концепция параллельного ущерба изучает побчоное действие антибиотиков на организм человека. К основным негативным поледствиям антибиотикотерапии относят:

- прямое органотоксическое действие

-снижение иммунитета

Аллергические реакции

Возможность развития эндотоксического шока

-антибиотикоассоциированные поражения кишечника

- нарушение микробного консорциума ЖКТ (как следствие – ухудшение когнитивных способностей, в частности подавление функционирования рабочей и пространственной систем памяти)

Существуют разные подходы к назначению антибактериальной терапии:

1. Эмпирическая антибиотикотерапия

2. Адекватная антибиотикотерапия

Эмпирическая антибиотикотерапия – назначение антибиотика до получения данных о возбудителе заболевания и его чувствительности к препаратам. Она должна назначаться на основании данных, полученных при использовании шкалы стратификации (градации) госпитализированных пациентов по риску наличия полирезистентных возбудителей. Эмпирическая антибиотикотерапия также назначается на основании действующего в стационаре формуляра антибиотикотерапии. В россии, начиная с 2018г. Действует «стратегия антибактериальной терапии при оказании стационарной помощи»(программа СКАТ).

Эмпирическая антибиотикотерапия может быть: эскаллационной и диэскалационной

Адекватная антибиотикотерапия назначается на основании данных о выделенном возбудителе заболевания, его антибиотикограммы, а также знания фармакокинетики и фармакодинамики препарата

Для проведения Адекватной антибиотикотерапии необходимо учитывать чувствительность возбудителя к антибиотикам.

Определение чувствительности бактерий к антибиотикам (антибиотикограмма) может проводиться различными методами:

- рутинные методы (ручные или автоматизированные )

- MALDI-TOF – матричная лазерная время пролетная масс спектрометрия

-проточная цитометрия

-Изотермальная микрокалометрия

- экспресс – метод лазерной флюоресцентной спектроскопии

- молекулярно – генетические ( секвентирование генома и ПЦР )

- мононмолекулярное-нанопоровоесеквенирование – для себя – ( элепсометрический метод ) найти, для себя

К рутинным методам относятся:

- диско-диффузионный метод

- метод серийных разведений в жидких и потных питательных средах

- эпсилометрический тест (Е- тест)

Диско-диффузионный метод

Градиент концентрации антибиотика в питательной среде создается в результате его диффузии из носителя, которым является бумажный диск, пропитанный раствором антибиотика. Образование зоны подавления роста вокруг диска происходит в результате диффузии АБП из носителя в питательную среду в определенных пределах величина диаметром зоны подавления ростта обратно пропорциональна МПК.

Диаметр зоы задержки (отсутствия) роста микроорганизмов измеряют с помощью линейки. Отсутствие зоны задержки роста микроорганизмов вокруг диска указывает на устойчивость исследуемой культуры к данному антибиотику.

Результатом исследованиия является отнесение микроорганизма к одной из категорий чувствительности ( чувствительный, промежуточный, или резистентный)

Метод серийных разведений

Основан на определении минимальной концентрации антибиотика, подавляющей рост исследуемого микроорганизма. После инкубации оценивают наличие или отсутствие видимого роса.

Е-тест

Представляет собой узкую полоску полимера, на которую нанесен градиент концентраций АБП (от минимальных до максимальных). При подавлении роста микроорганизмов вокруг полоски Е-теста образуется каплевидная зона ингибиции. Величину МПК учитывают в том месте, где граница зоны подавления роста вплотную подходит к носителю.

Детекцию результатов рутинных тестов проводят визуально или с использованием автоматизированных систем.

MALDI-TOF

Одним из наиболее развивающихся в последнее направление лабораторной диагностики инфекционных заболеваний является MALDI-TOF MS (матрично активированная лазерная десорбция\ ионизация с время пролетным разделением )

В основе метода лежит процедура ионизации исследуемого материала, позволяющая в присутствии особого вещества ( матрицы) под воздействие лазера ионизировать биологические макромолекулы ( белки, пептиды, ДНК, сахара, олигонуклеотиды и др. ). матрица обеспечивает передачу энергии лазера молекулам исследуемого объекта, переводя их в газовую фазу, после чего ионизированные молекулы ускоряются в электрическом поле и достигают детектора. Время прохождения расстояния ( пролета) от точки ионизации до детектора обратно пропорционально массе ионов. На основании скорости движения иона можно рассчитать массу частиц, присутствующих в исслеуемом материале.

Матричная лазерная времяпролетная спектрометрия используется, в том числе, для обнаружения продуктов генов антибиотикорезистентности ( белки, жирные кислоты)

Проточная цитометрия (ПЦ) – это метод регистрации оптических параметров клеток или частиц по сигналам светорассеяния и флуоресценции в режиме поштучного анализа. Т. е. проточная цитометрия представляет собой технику для быстрого оптического анализа отдельно взятых клеток, находящихся в струе жидкости, проходящей с большой скоростью, которая обеспечивает прохождение клеток в потоке поодиночке, при этом можно определить абсолютное число клеток в исследуемом образце, получить представление о размерах и структуре клетки.

Кроме того, в ходе анализа учитывается уровень флуоресценции химических соединений, входящих в состав клеточной стенки (аутофлуоресценция) или внесенных в образец перед проведением проточной цитомерии.

В настоящее время проточная цитометрия применяется для выявления определенных клеток в исследуемых образцах (как бактериальных и грибков, так и обственных клеток организма человека), определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

Изотермальная микрокалометрия

Принцип калометрии основан на том, что все химические реакции влекут за собой изменение энергии, обычно сопровождающееся выделением тепла (экзотермические) или его поглощением (эндотермические).

Микрокалометрия является исключительно высокочувствительным методом, выявляющим даже самые незначительные изменения температуры в образцах малого объема. Величина выделяемого микроорганизмами тепла зависит от количества клеток и других характеристик. Таким образом, метод позволяет быстро оценить численность клеток – чем меньше бактерий определяется, тем эффект действия антибиотиков выше.

Экспресс -метод лазерной флюоресцентной спектроскопии

Это спектроскопический метод, в котором атом или молекула возбуждаются лазерным лучом более высокого энергетического уровня путем поглощения лазерного света с последующими спонтанным излучением света. Он относится к методам сверхбыстрой визуализации явления самофлюоресценции, которая характерна в том числе и для мироорганизмов. Показатели мощности флюоресценции, ее амплитуда и спектр являются индикаторами качественного и количественного состава микрофлоры, т. е. позволяют оценивать наличие и активность микроорганизмов в исследуемом биологическом объекте. На этой основе возможно определение эффективности лечения в режиме реального времени.

Молекулярно генетические методы

-ПЦР

- секвенироание генома

Генотипические методы основаны на прямой детекции генов, кодирующих детерминанты устойчивости к антибактериальным препаратам. Являются крайне перспективными.

Так, с помощью метагеномного секвенирования можно определить все гены антибиотикорезистентности ассоциации бактерий в инфекционном очаге («резистом»), что приобретает большое значение при микст-инфекциях. Обнаружение генов антибиотикорезистентности требует подтверждения их фенотипической экспрессии. Это возможно при использовании метода метранскриптомии.

Кроме вышеперечисленных методов в настоящее время разработали трехэтапный метод сравнения чувствительности к антибиотикам планктонных культур и бактерий в составе биопленок.

Для обнаружения антибиотикотолерантных бактерий предложен ТД-тест.

Вторая лекция

Бесконтрольное и. нередко, нерациональное применение антибиотиков привело к широкому распространению антибиотикорезистентных ( поли- и панрезистентных ) штаммов бактерий, что, по мнениию экспертов ВОЗ, представляет серьезную угрозу национальной безопасности стран.

Устойчивость бактерий к антибиотикам может быть результатом антибиотикорезистентности.

Антибиотикорезистентность бактерий может быть первичной ( врожденный родовой признак ) или вторичный ( приобретенный признак ). В основе первичной резистентности, как правило, лежит отсутствие у клетки мишени действия антибиотика или неспособность клеточных мембран пропускать антибиотик к мишеням действия в клетке.

Приобретенная антибиотикорезистентность – это результат генотипической изменчивости. Она возникает в результате мутаций или рекомбинаций ( перенос R-плазмид, транспозонов, интегронов) и передается по наследству.

Важную роль диссеминации генов антибиотикорезистентности среди бактерий играют деградосомы, которые могут служить вектором горизонтального переноса генов.

Генетические изменения приводят к изменению экспрессии структуры белков, участвующих в рецепции, трансмембранном транспорте и других процессов, поэтому биохимические механизмы реализации антибиотикорезистентности могут быть различными:

- продукция ферментов, разрушающих или инактивирующих антибиотики ( бета-лактамазы, БЛРС, КРС)

- нарушение проницаемости клеточных мембран для антибиотиков

- модификация мишени действия

-защита мишени ( бактерии начинают продуцировать белки, связывающиеся с мишенью действия )

- метаболический шунт (устойчивость энтерококков в ванкомицину)

- имитация молекулы мишени ( устойчивость M. bovis к хинолонам )

- неспецифическое активное выведение антибиотика ( эффлюкс )AcrAB

- уменьшение синтеза поринов

Антибиотикотолерантность не является результатом генотипической изменчивости, поэтому не наследуется.

Доказана фенотипическая гетерогенность и пластичность генетически однородной популяции бактерий, что, при воздействии на нее бактерицидных доз антибиотика, обусловливает выживание малочисленной популяции (0, 001 – 1% ) на фоне гибели большинства клеток. Это происходит в результате перехода малого числа антибиотикочувствительных клеток в фенотип выживания ( персистенции) в присутствии антибиотика.

Персисторы ( стойкие бактерии) безразличны к наличию любых антибиотиков. Они образуются в развивающейся культуре всегда вне зависимости от наличия антибиотика. Это явление устойчивости, отличное от классической антибиотикорезистентности, получило название множественной лекарственной толерантности. Она обеспечивает сохранение популяции, возможность размножения генетически приспособленных бактерий и лежит в основе развития хронических инфекций.

Другим фенотипом толерантности ( помимо персистенции ) обладают так называемые индифферентные клетки, физиологическое состояние которых свойственно клеткам культуры в стационарной форме размножения.

Еще одна форма временной толерантности – метаболическая адаптивная устойчивость, связанная с изменением проницаемости клеточной оболочки.

Особое место занимает проблема антибиотикорезистентности бактерий в биопленке. Она может быть обусловлена различными механизмами:

- плохое проникновение антибиотика через защитную мембрану ( наружный слой – для себя) биопленки.

- элементы матрикса могут связывать антибиотики

- бактерии в микроколониях имеют меньшую поверхность соприкосновения с антибиотиком

- различное физиологическое состояние бактерий в биопленке ( наличие персисторов )

Установлено, что для бактерий, находящихся в биопленке, МИК антибиотика в 300-500 раз превышает это значение для планктонных бактерий.

В настоящее время очень остро стоит проблема борьбыс устойчивостью бактерий к антибиотикам.

Для борьбы с антибиотикорезистентностью существует несколько подходов:

- создание новых антибиотиков

- создание защищенных бета- лактамов

Поиск веществ, способных воздействовать на антибиотикорезистентные штаммы бактерий.

Одной из потенциальных групп таких препаратов являются антимикробные пептиды. Это низкомолекулярные соединения, построенные из аминокислот ( имеют катионную или амфипатическую найти природу ), которые синтезируются в организме большинства эукариот в ответ на внедрение чужеродных микроорганизмов. К ним относят дефензины, которые имеют большие перспективы применения в качестве антимикробных препаратов, т. к. характеризуются высокой противомикробной активностью, безопасностью и отсутствием формирования резистентности.

Антимикробные пептиды – одни из ключевых молекул врожденного иммунитета. Они проявляют широкий спектр биологических эффектов, что дает основание причислять их к биомодуляторным соединениям.

Антимикробные пептиды участвуют в процессах ранозаживлении, способны связывать эндотоксины и проявляют противовоспалительное действие. Применение рекомбинантных фагов, способных лизировать резистентные бактерии.

Для снижения численности персисторов, устойчивых к антибиотикам, вплоть до полной их иррадикиции, предложен ряд подходов:

-использовать ферменты аутолиза бактериальных клеток

- применение пульс-дозирования антибиотика

- комбинированное воздействие на клетки – использование антибактериальных препаратов тейксобактина, лассомицина с традиционными препаратами.

Для борьбы с устойчивостью бактерий в биопленке также разработан ряд методов:

- применять антибиотики, проникающие в биопленки ( клацид, доптомицин )

- гидрофобно-катионные пептиды предотвращают образование и уничтожают сформированные биопленки (при использовании катетеров)

- повреждение полимерной основы матрикса (есть ли меры борьбы)

- в матрикс внедряются

Знания о механизмах устойчивости б в разных условиях (резист, толлер, в биопленке) необходимы для борьбы и назначения адекватной аб терапии

Классиф по мех дейст

Мех анибрезистент генетические ммутации и рекомбинации 2 биохимические можно перечислить

Мех антибиотикотолерантности 1 персисторов 2 индиферентные летки 3 метаболическая адаптивная устойчивость

Мех устойчивости бактерий в биопленке

Методы опред чувст-ти бактерий к аб

Вторая лекция

Резистентность к антибиотикам имеет глубокие корни и существовала задолго до эры антибиотиков. Так гены устойчивости к бета-лактамам и гликопептидам обнаружены в ДНК бактерий возрастом 30000 лет. Они обнаружены у бактерий на островах аборигенов, куда не ступала нога человека

На практике термин «антибиотикоустойчивость» или «резистентность к антибиотикам » означает сохранение бактериями жизнеспособности в присутствии АБП в концентрациях, реально достижимых в организме человека.

Антибиотикорезистентность бактерий может быть первичной- природной ( врожденный родовой признак ) или вторичный ( приобретенный (штаммовый )признак ).

При наличии у бактерий природной устойчивости антибиотики клинически неэффективны. В основе первичной резистентности, как правило лежит:

· -Отсутствие у клетки мишени действия антибиотика. Так, например, микоплазмы не имеют клеточной стенки, поэтому не чувствительны ко всем препаратом, угнетающим синтез муреина

· неспособность клеточных мембран пропускать антибиотики к мишеням действия в клетке (например, липополисахаридный слой клеточной стенки грамотрицательных бактерий препятствует транспорту некоторых АБ в силу гидрофильности их молекул; грамотрицательные бактерии менее проницаемы для крупномолекулярных соединений, чем грамположительные бактерии, так как их наружная мембрана имеет маленькие поры)

· ферментативная инактивация ( природная устойчивость синегн палочки к бета- лактам обусловлен синтезом конститутивных beta-lactamase.

Природная резистентность является постоянным признаком микроорганизмов и легко прогнозируется.

Приобретённая устойчивость - это свойство отдельных штаммов бактерий сохраняют жизнеспособность при тех концентрациях антибиотиков, которые подавляют основную часть микробной популяции. Формирование приобретённой резистентности является результатом генотипической изменчивости и передаётся по наследству. Устойчивость к антибиотикам определяется и поддерживается генами резистентности и условиями, способствующими их распространению в микробных популяций.

Генетические основы приобретённой резистентности:

- мутации в хромосоме бактериальной клетки. Сам препарат не влияет на частоту мутаций и не является их причиной, но служит фактором отбора, так как в условиях селективного давления антибиотика мутанты получают преимущество перед остальными клетками популяции, которые чувствительны к препарату. Распространение резистентности происходит преимущественно по клональному типу, в отсутствии селективного прессинга антибиотика резистентные клоны, как правило, вытесняются чувствительными. При клональном типе резистентности значительно легче осуществить мероприятия по преодолению распространения устойчивости в популяции.

-с участием подвижных генетических элементов ( R-плазмид, транспозонов, интегрлнов).

Трансмиссивные плазмиды резистентности (R-плазмид) могут кодировать перекрёстную устойчивость к нескольким классам антибиотиков. ( например, бета лактамазы, кодируемая плазмидой, широко распространена у грамотрицательных бактерий и встречается у кишечной палочки и других кишечных бактерий, а также у гонококка, резистентного к пеницилину, и гемофильной палочки, резистентной к амицилину).

Плазмиды могут передаваться не только в пределах вида, но и между бактериями, таксономически далёких друг от друга. Этот процесс у бактерий происходит весьма активно, бороться с таким распространением устойчивости крайне трудно, если вообще возможно.

Обычно с подвижными элементами передаются Гены ферментов, инактивирующих антибиотики.

Важную роль диссеминации генов антибиотикорезистентности среди бактерий играют внеклеточные микровезикулы (экзосомы), которые могут служить вектором горизонтального переноса генов.

Генетические изменения приводят к изменению экспрессии структуры белков, участвующих в рецепции, трансмембранном транспорте и других процессов, поэтому биохимические механизмы реализации и антибиотикорезистентности могут быть различными:

-модификация мишени действия

-продукция ферментов, разрушающих или ин активирующих антибиотики

- нарушение проницаемости клеточных мембран для антибиотиков

-неспецифическое активное выведение антибиотика(эффлюкс) AcrAB

- защита мишени

- метаболический шунт

- имитация молекулы мишени

-связывания и блокада АБ

- повышение количества молекул мишеней на которые действует микробный агент (гликопептиды)

· 1 модификация мишени действия АБП происходит в результате мутации в генах, кодирующих определённые структуры, которые приводят к снижению при утрате способности связывать антибиотик при сохранении функциональной активности. Например, модификация пенициллин связывающего белка (ПСБ трас- и карбоксипептидазы, участвующие в синтезе муреина) у бактерий снижается их сродство к бета- лактамам, модификация 30s субъединицы рибосом делает недоступной их в качестве мишени для аминогликозидов.

· 2. Механизмы инактивации осуществляются в результате ферментативного разрушения или модификации ABП. K таким ферментом относится б- лактамазы, в том числе БЛРС, КРС: эстеразы воздействующие на эритромицин: трансферазы Левомицетин, аминогликоцид: фосфорилазы аминогликозиды, макролиды и другие

Эти механизма существовали у бактерии, продуцирующих антибиотики, задолго до начала использования этих веществ в качестве медицинских препаратов. Скорее всего, они выполняли функции защиты бактерии продуцента от собственного антибиотика. В последующем детерминанты резистентности распространились среди возбудителей инфекционных болезней у человека.

Образование в beta-lactamase является наиболее распространённым механизмом АБ устойчивости. Количество только известных в науке beta-lactamase превышает 400. Под действием бета лактамазы происходит гидролиз б- лактамного кольца.

В отличие от антибиотиков (веществ природного происхождения), химиотерапевтические препараты микробной клеткой, как правило, не инактивируется.

3. нарушения проницаемости оболочки микробной клетки. Этот механизм распространён, в основном, среди грамотрицательных бактерий. Липополисахаридный слой клеточной стенки грамотрицательных бактерий препятствует транспорту некоторых АБ в силу гидрофильности молекул, поэтому транспорт гидрофильных АБП внутрь микробной клетки осуществляется через пориновые каналы, которые имеют белковую природу. Структура пориновых каналов подвержена изменчивости и в ряде случаев они становятся непроницаемой для молекул, в том числе AB. Описанный механизм неспецифический и может проявляться в отношении антибиотиков разных групп (макролидов, тетрациклинов, линкозамиов)

4. активное выведение АБП из микробной клетки (эффлюкс). Некоторые бактерии имеют цитоплазматической мембране эффлюкс- помпы, обусловленные ферментами транслоказами ( внутримембранные белки). Эти ферменты работают как насосы, обеспечивающие активное выведение из бактериальной клетки химических веществ( в том числе и АБ).

Известно 5 больших суперсемейства таких транспортных систем. Этот механизм АР очень эффективен, так как обеспечивает устойчивость сразу к нескольким классам АБП, то есть полирезистентность (макролиды б лактамны).

5. защита мишени. Защита мишени относится к наименее изученным механизмом abbr, однако этот механизм распространён и угр - и гр + бактерии. Установлено, что бактерии способны синтезировать белки, предотвращающие связывание

· Связывание обп с мишенью, причём известно, что указанные белки связывается с обп не с AWP, а с мишенью действия и каким-то образом защищают её. Например, защита рибосомы at-ap тетрациклинов позволяет бактериям сохранять процессы синтеза белка. Ранее этот механизм был известен только для тетрациклинов однако сравнительно недавно он был описан и для салонов шесть метаболический шунт представляет собой формирование альтернативного пути метаболизма, при котором метаболическая реакция продолжает осуществляться без участия фермента, заблокированного об, или в результате продукции микроорганизмам нового фермента, который не связывается с AB и сохраняет активность. Таким образом формируется обходной путь шунт позволяющее обходить об блокаду метаболической реакции. Этот механизм лежит в основе формирования устойчивости энтерококков к ванкомицин 0. 7 имитация молекулы мишеней механизм устойчивости некоторых микобактерий хинолоны состоит в том, что эти микроорганизмы синтезирует схожую с двойной спирали ДНК белковую структуру и тем самым служит мишенью для фторхинолонов, что защищает клетку от губительного взаимодействие антибиотиков с ДНК гираза комплексом 8 связывания и блокада AB. Например, продукция дополнительного ПСБ 2А у стафилококков. Необходимо особо подчеркнуть, что устойчивость к одному антибиотику может определяться целым рядом различных механизмов. Устойчивость бактерий к антибиотикам может быть не только результатом антибиотикорезистентности, но и антибиотика толерантности. Наказывать фенотип доказано фенотипическая гетерогенность и пластичность кинетический однородной популяции бактерий. Клетки persistar и это субпопуляции клеток, которое образуется в развивающиеся культуре всегда вне зависимости от наличия антибиотик a. pr-cy. ru представляют собой клетки в состоянии покоя, которые нереплицируемый и метаболическим неактивны. На фоне гибели большинства клеток под воздействием бактерицидных доза антибиотика происходит малого переход малого числа антибиотика чувствительных клеток 0, 1 процент в фенотипу выживание персистенции. Persistar и безразлично к действию любых антибиотиков вследствие отсутствия биологических мишени воздействия. Это явление нечувствительности или невосприимчивости к антибиотикам, в отличие от классической антибиотикорезистентности, получила название множественной лекарственной толерантности. Она обеспечивает сохранение популяции, возможность размножение генетически приспособленных бактерии и лежит в основе развития хронических инфекций. антибиотика толерантность не является результатом генотипической изменчивости и, поэтому не наследуются и является обратимой. Клетки persistar и могут переходить метаболически активные формы и размножаться. Другим фенотипом толерантности и помимо персистенции обладают так называемые индифферентные клетки, физиологическое состояние которых свойственно клеткам культуры и стационарной фазы размножения. Ещё одна форма временное толерантности метаболическая адаптивная устойчивость, связанная с изменением проницаемости клеточной оболочки. Особое место занимает проблема антибиотикорезистентности бактерий в биопленки. Установлено, что бактерии, находящихся биопленки, m& k антибиотика в 300 500 раз превышает это значение для планктонных бактерий, как результат биопро ночные бактерии способны выживать в конце при концентрациях об, многократно превышающих терапевтическую дозу устойчивость к об биопленки может быть обусловлена различными механизмами: -плохое проникновение антибиотика через защитную мембрану биопленки наружный слой-элементы матрицы могут связывать антибиотики-бактерии микро колониях имеет меньшую поверхность соприкосновения с антибиотиком-различные физиологическое состояние бактерии биопленки наличие peers. tv планктонные культуре количество пенсионеров не более одной клетки на 1 млн, биопленке от 1 до 100 на млн.
— повышенная вероятность межвидовой передачи генов резистентности в условиях тесного контакта бактерий внутри биопленки абзац знания о механизмах устойчивости

· в бактерии в разных условиях резисты, талер, в биопленки необходимы для борьбы и назначения адекватной АБ терапии в настоящее время очень остро стоит проблема борьбы с устойчивости бактерий к антибиотикам точка распоряжением правительства РФ от 2017 года утверждена стратегия предупреждения распространения антимикробной резистентности в российской федерации на период до 2030 года. Одной из из первостепенных задач в рамках стратегии является создание новых антимикробных препаратов. Эта цель может быть достигнута путем: -создания принципиально новых антибиотиков. За последние двадцать лет создан только один препарат нового класса-тигециклин. В условиях стремительного роста числа устойчивых штаммов с множественными механизмами резистентности этот процесс становится просто нерентабельно-модификации имеющихся об, способных преодолеть механизмы резистентности бактерий к об создания защищенных бета лактамов -поиска веществ способных воздействовать на антибиотик антибиотикорезистентность штаммов бактерий применения рекомбинантных фагов, способных визировать об резистентные бактерии. Одно из потенциальных групп таких препаратов является антимикробные пептиды. К ним относят дельфин, который имеет большие перспективы применения в качестве антимикробных препаратов, так как характеризуется высокой противомикробная активность уточка безопасностью и отсутствием формирования резистентности. Это низкомолекулярные соединения, построены из аминокислот имеет катиону или amphipathic ческую найти природу, которые синтезируются в организме большинства эукариот ответ на внедрение чужеродных микроорганизмов.

Антимикробные пептиды-одни из ключевых молекул врождённого иммунитета.

Они проявляют широкий спектр в биологических эффектов что даёт основание причислять их к биомодуляторным соединениям. Антимикробные пептиды участвуют в процессах ранозаживления, способны связывать эндотоксины и проявляют противовоспалительное действие.

Стратегия борьбы с АБ- резистентностью бактерий должна включать не только меры противодействия генетическим механизмам резистентности к АМП, но и обратить пристальное внимание на фенотипические механизмы формирования устойчивости к антибиотикам-персистенцию и формирования биопленок.

Так, для снижения численности персисторов, устойчивых устойчивых к антибиотикам, вплоть до полной их иррадикации, предложен ряд подходов:

-использовать ферменты аутолиза бактериальных клеток

-применение пульс дозирования антибиотика

-комбинированное воздействие на клетки-использование антибактериальных препаратов тейксобактина. Лассомицина с традиционными препаратами.