III этап Заливка в парафин. IV этап Резка и наклеивание материала. V этап окраска Гематоксилин-Эозин и заключение в монтирующую среду.

III этап Заливка в парафин

После проводки переносим материал в ванночку для заливки, сверху кладем гистологическую кассету и заливаем расплавленным парафином.

IV этап Резка и наклеивание материала

Фиксируем гистологический блок в зажимах микротома и делаем срезы толщиной от 1 до 3 мкм.

Срез препаровальной иглой или кисточкой переносим на водяную баню (40-45 °С) но не выше температуры плавления парафина (50°С)

Натягиваем срез на стекло.

Стекло со срезом кладем на тёплый столик (45°С)

V этап окраска Гематоксилин-Эозин и заключение в монтирующую среду.

1 толуол (конц. ) – 5 минут (для депарафинизации)

2 толуол (конц. ) – 2 минуты (для депарафинизации)

3 толуол (конц. ) – 2 минуты (для депарафинизации)

4 спирт 95% - 2 минуты (для обезвоживания) 70% спирт тоже пойдет если имеется

5 спирт 95% - 2 минуты (для обезвоживания) 70% спирт тоже пойдет если имеется

6 вода перед гематоксилином- 2 минуты (для плавного переходя из спирта в гематоксилин)

Гематоксилин Майера - 10 минут

вода водопроводная - 2 мин

эозин 1% спиртовой - 30 сек

вода водопроводная – 2 минуты

этиловый спирт 96 % - 3 2 минуты

этиловый спирт 96 % 4-2 минуты

толуол 4- 2 минуты (для подготовки к монтирующей среде)

толуол 5- 2 минуты (для подготовки к монтирующей среде)

Нанести монтирующую среду на стекло, накрыть покровным стеклом.