Опсонофагоцитарная реакция

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ

1 принцип – поиск антигенов (АГ)

? АГ           +        АТ    →        ИК       Экспресс-метод
исследуемый материал            Известная диагностическая
                                                агглютинирующая сыворотка

? АГ            +        АТ     →        ИК Бактериологический метод
чистая культура                             Известная диагностическая
                                          агглютинирующая сыворотка

2 принцип – поиск антител (АТ)

? АТ           +        АГ      →        ИК Серологический метод
сыворотка больного                   известный диагностикум
                                                          взмесь ослабленных м. о.

РИФ

прямая непрямая

АГ + АТ* АГ + АМС +АГС*

РПГА

Антигенный эритроцитарный диагностикум

+ →

АТ (сыворотка крови больного)

РОПГА (РОНГА)

Антигенный эритроцитарный диагностикум

                                          +                →

                                                          исследуемый материал

Реакция Кумбса – на выявление неполных АТ(резус, бруцеллёз)

+ → →

неполное АТ (сыворотка крови) АГС

→

АГС

РП в геле для определения классов Ig по Манчини

АГС – гель, пропитанный АГС (с антиглобулиновой сывороткой)

Сыворотка больного

Кольцо преципитации

Указываю, какой иммуноглобулин ищут

РП в геле для определения токсигенности дифтерийной палочки

АТС – фильтровальная бумага с антитоксической сывороткой

Штаммы дифтерийной палочки

Дуги преципитации

РТГА

гемагглютинины

+ → Реакция гемагглютинации

вирус АГ

+ + → +

сыворотка, содержащая Торможение
антивируснуые АТ гемагглютинации

РСК

+ + + + →

АТ эритроциты барана антитела гемалитической
сыворотки

→ + Гемолиза нет РСК(+)

+ + + + →

АТ эритроциты барана антитела гемалитической
сыворотки

→ + + Гемолиз есть РСК(-)

Твердофазовый ИФА

Поиск АТ

+? АТ → + ф →

АГ, фиксированный на сыворотка больного АГС(АТ к Ig человека
твердой фазе меченные Ф. )

→ + субстрат →
хромоген

Поиск АГ

+? → + ф →

АТ, фиксированные на исследуемый материал иммунная диагностическая
твердой фазе чистая культура сыворотка

→ + субстрат →
хромоген

Схема твердофазового РИА

Аналогично ИФА, только вместо фермента – радионуклеотид (чаще I¹²⁵)

Поиск АГ

+? → + I¹²⁵ →

известный АТ, фиксированный исследуемый материал иммунная диагностическая
на твердой фазе чистая культура сыворотка (АТ, меченная I¹²⁵)

→

Уровень изучения прямо пропорционален
количеству связывающихся молекул АТ и АГ

Поиск АТ

СМОТРИ ИФА

Опсонофагоцитарная реакция

Определить наличие антител в сыворотке крови больного можно с помощью опсонофагоцитарной реакции.

Опсонофагоцитарная реакция основана на свойстве антител-опсонинов усиливать фагоцитарную активность лейкоцитов. На ее основе рассчитывают опсонофагоцитарный индекс.

Опсонофагоцитарный индекс – отношение фагоцитарного показателя, полученного с сывороткой, содержащей опсонины (антитела), к фагоцитарному показателю, полученному в контроле с не иммунной сывороткой, в которой антитела заведомо отсутствуют.

Исследование проводят следующим образом: в опытную пробирку вносят исследуемую сыворотку крови больного, взвесь бактерий и отмытые лейкоциты здорового человека или животного. В контрольную пробирку вносят не иммунную сыворотку, в которой антитела отсутствуют, затем взвесь бактерий и лейкоциты, те же, что и в первую пробирку. Пробирки выдерживают в термостате в течение 30 минут, затем готовят мазки и окрашивают их по Романовскому-Гимзе или синькой Мансона. Микроскопируя полученные мазки, подсчитывают количество бактерий, поглощенных 100 (или 50) лейкоцитами.

Фагоцитарный показатель – количество бактерий, поглощенных одним фагоцитом. Например, 100 лейкоцитов из опытной пробирки фагоцитировали 600 бактерий, следовательно, фагоцитарный показатель равен 600: 100=6. А 100 лейкоцитов из контрольной пробирки фагоцитировали 150 бактерий, в этом случае фагоцитарный показатель составляет 150: 100=1, 5. Следовательно, опсонофагоцитарный индекс равен 6: 1, 5=4.

Опсонофагоцитарный индекс, превышающий 1, свидетельствует о наличии в исследуемой сыворотке крови опсонинов (антител).

Чем больше значение индекса, тем большей опсонической активностью обладает исследуемая сыворотка. В клинической практике фагоцитарный показатель и опсонофагоцитарный индекс используют для исследования иммунного статуса человека.