концентрация ПАГ в крови

ПРАКТИЧЕСКИЕ НАВЫКИ по НОРМАЛЬНОЙ ФИЗИОЛОГИИ

Тема: КРОВЬ

1. Техника взятия крови. Кожа пальца левой руки обрабатывается ватным тампоном, смоченным спиртом , а затем эфиром. Стерильным одноразовым скарификатором прокалывается кожа пальца. Выступившую каплю крови убирают сухим ватным тампоном. В следующую каплю крови погружается кончик смесителя или капилляра и набирается кровь. По окончании взятия крови кожа пальца обрабатывается спиртом, а затем желательно обработать настойкой йода.

2. Определение гемоглобина. Для определения гемоглобина колориметрическим методом используется гемометр Сали, который состоит из штатива, градуированной пробирки, стеклянной палочки и пипетки. В боковых пробирках гемометра находится раствор солянокислого гематина, содержание гемоглобина в них оптимальное – 100%, т.е. 16,67 г/% или 166,7 г/литр. В среднюю пробирку наливается 0,1 нормальный раствор соляной кислоты до нижней круговой метки (до цифры 2). В капилляр гемометра набирается кровь до единственной круговой метки- 20 куб.мм. Затем необходимо постукать по пробирке и оставить на 5-10 минут для образования солянокислого гематина. Добавляя дистиллированную воду с помощью пипетки доводят цвет жидкости в средней пробирке до стандартного ( цвет в боковых пробирках) определяют содержание гемоглобина в грамм на литр. Нормы содержания гемоглобина у женщин - 120-140 г/л, у мужчин - 130-160 г\л.

3. Подсчет эритроцитов.. Для подсчета эритроцитов необходимо: микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для красной крови, раствор для разбавления крови ( 3% раствор поваренной соли). Вначале к боковым площадкам камеры Горяева притирают покровное стекло до появления цветных радужных колец. Набирают кровь в смеситель для эритроцитов до метки 1,0 или 0,5 в зависимости от степени разведения крови ( в 200 или 100 раз), затем в смеситель набирают 3% раствор NaC1 до метки 101. Зажимают смеситель с обеих сторон пальцами встряхивают его в течение нескольких минут. Выпускают из смесителя 2-3 капли жидкости и следующую каплю помещают на среднюю площадку счетной камеры. Эритроциты считают в 5 больших неразделенных квадратах (или в 80 малых квадратах) по правилу Егорова ( считают форменные элементы в пределах большого квадрата , лежащие в самом квадрате и на верхней и правой границах квадрата). Для окончательного расчета количества эритроцитов используют формулу:

Э = эритр. х 4000 х 100 (200)

Нормы содержания эритроцитов у женщин - 4,0-4,5 х 10 в 12 степени на литр

у мужчин - 4,5-5,0 х 10 в 12 степени на литр

4. Вычисление цветового показателя крови. Цветовой показатель крови показывает содержание гемоглобина в одном эритроците. Используют формулу:

_________3 х_ Нь (г\литр)________________

три первые цифры числа эритроцитов в млн.

В норме цветовой показатель крови равен 0,8 – 1,0.

5. Подсчет лейкоцитов. Для подсчета лейкоцитов необходимо: микроскоп, счетная камера Горяева, смеситель для белой крови, раствор для разбавления крови ( 5% р-р уксусной кислоты, окрашенной метиленовой синью). Вначале к боковым площадкам камеры Горяева притирают покровное стекло до появления цветных радужных колец. Набирают кровь в смеситель для лейкоцитов до метки 1,0 или 0,5 в зависимости от степени разведения крови ( в 20 или 10 раз), затем в смеситель набирают 5% р-р уксусной кислоты до метки 11. Зажимают смеситель с обеих сторон пальцами встряхивают его в течение нескольких минут. Выпускают из смесителя 1-2 капли жидкости и следующую каплю помещают на среднюю площадку счетной камеры. Лейкоциты считают в 100 больших (или в 1600 малых квадратах) неразделенных квадратах по правилу Егорова ( считают форменные элементы в пределах большого квадрата , лежащие в самом квадрате и на верхней и правой границах квадрата). Для окончательного расчета количества лейкоцитов используют формулу:

Л = лейк .х 4000 х 10(или 20).

1600

Нормы содержания лейкоцитов - 4 - 9 х 10 в 9 степени на литр .

6. Определение осмотической резистентности эритроцитов. Осмотическая резистентность или стойкость эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам. Для работы необходимы штатив с пробирками, растворы поваренной соли 0,9%, 0,7%, 0,48%, 0,32%, эфир, капилляр для вз ятия крови. В 4 пробирки наливают по 5 мл раствора поваренной соли указанных концентраций, в 5 пробирку наливают дистиллированную воду, в 6 пробирку - 4 мл 0,9% р-р NaC1 + 1 мл эфира. Во все пробирки добавляют по 20 куб.мм крови, перемешивают и оставляют в штативе на час. По истечении часа наблюдают изменения в пробирках. В 1 и 2 пробирках с концентрацией NaC1 0,9% и 0,7% раствор мутный, гемолиз не наблюдается в связи с тем, что гемолиз начинается только с концентрации NaC1, равной 0,48% ( это минимальная граница осмотической стойкости эритроцитов). В 3 пробирке раствор менее мутный, но не полностью прозрачный , при концентрации NaC1 происходит гемолиз нестойких эритроцитов , т.е. неполный гемолиз. В 4 пробирке (NaC1 0,32%) происходит полный гемолиз ( максимальная граница осмотической стойкости эритроцитов). В 5 пробирке происходит полный осмотический гемолиз. В 6 пробирке имеет место химический гемолиз.

7. Определение групп крови в системе АВО. Для определения группы крови необходимы стандартные сыворотки (плазма, лишенная белка фибриногена) 1,2,3 групп крови. На предметное стекло капают по одной капле соответствующей стандартной сыворотки ( во избежание смешивания сывороток между собой пользуются меченой пипеткой). Берут кровь углами второго предметного стекла и помещают в каждую каплю сыворотки ( соотношение крови и сыворотки должно быть примерно 1:10). Группу крови определяют по наличию реакции агглютинации . Если реакция агглютинации не произошла ни в одной капле сыворотки – значит группа крови 1, если реакция произошла 1 и 3 капле сыворотки – это группа крови 2. Если реакция произошла в 1 и 2 каплях – группа 3 . И наконец, если реакция произошла во всех трех каплях сыворотки – это значит кровь имеет 4 группу.

8. Определение групп крови с помощью цоликлонов. На предметное стекло наносятся индивидуальной пипеткой по одной большой капле цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ под соответствующими подписями. Рядом с каплями антител наносят по одной маленькой капле исследуемой крови. Смешивают кровь с реагентом с помощью второго предметного стекла. Наблюдают за ходом реакции в течение 3 минут. Положительный результат выражается в реакции агглютинации эритроцитов. Если ни в одной капле цоликлонов не произошла реакция агглютинации эритроцитов – значит кровь относится к 1 группе. Если агглютинация произошла с цоликлоном анти- А и анти- АВ – значит группа крови 2. Если агглютинация с цоликлоном анти-В и анти-АВ - тогда это группа крови 3. И наконец, если агглютинация эритроцитов имеет место со всеми цоликлонами - тогда речь идет о 4 группе крови.

9. Определение резус-принадлежности крови. Используется специфическая антирезусная сыворотка крови. На стекло пипеткой наносят раздельно по одной капле антирезусной и контрольной сывороток. Стеклянной палочкой вносят кровь в обе капли сывороток. Через 5 минут наблюдают результат.

10. Определение СОЭ. Для определения скорости оседания эритроцитов необходимо: прибор Панченкова ( штатив, капилляр, часовое стекло), цитрат натрия (5% р-р лимонно-кислого натрия). Вначале промывают капилляр раствором цитрата натрия, затем набирают раствор до метки 50 (или буква Р) и выдувают на часовое стекло. Набирают кровь дважды до метки К (или 0) и также выдувают на часовое стекло. Перемешивают содержимое и набирают в капилляр до метки К и ставят в штатив на 1 час. По истечении часа наблюдают величину верхнего светлого слоя жидкости – плазмы крови. По количеству мм слоя плазмы и выражают скорость оседания эритроцитов. Скорость оседания неодинакова в течение часа: вначале СОЭ ускорено, затем замедлено и в конце вновь происходит ускорение оседания эритроцитов.

Нормы СОЭ: у женщин от 2 до 15 мм/час, у мужчин 1-10 мм /час.

11. Определение времени свертывания крови по Сухареву и Альтгаузену.

По Альтгаузену: на тщательно промытое, сухое и согретое ладонью до температуры тела стекло наносят 2-3 капли крови. Через каждые полминуты проводят через кровь скарификатором, пока за иглой скарификатора не потянется первая нить фибрина.

По Сухареву: набирают в капилляр столбик крови высотой 25-30 мм, отмечают по секундомеру время. Наклоном капилляра переводят кровь на середину капилляра. Держа капилляр двумя пальцами, покачивают его на 30-45 градусов в обе стороны. Начало свертывания крови характеризуется замедлением движения крови при наклоне капилляра. Полное свертывание крови соответствует моменту полной остановки движения крови.

12. Определение гематокрита. Для работы необходимо: центрифуга, гематокритная трубка, раствор гепарина (антисвертывающее вещество), кровь. Перед взятием крови гематокритную трубку промывают раствором гепарина, затем набирают в трубку кровь до метки «100», закрывают резиновым колпачком и центрифугируют в течение 1-1,5 часов при оборотах центрифуги 1500 в мин. После этого отмечают, какую часть в градуированной трубке составляют форменные элементы крови.

Тема: Кровообращение:

1. Электрокардиография, методика регистрации ЭКГ. Электрокардиография – это метод регистрации разности потенциалов в миокарде при его возбуждении. Разность потенциалов в миокарде возникает между возбужденным и невозбужденным участками миокарда ( возбужденный участок приобретает электроотрицательный заряд, невозбужденный покоящийся участок сохраняет электроположительный заряд). Отделы сердца возбуждаются и сокращаются неодновременно, отсюда в сердечной мышце и возникает разность потенциалов. ЭКГ регистрируют с 3-х стандартных и грудных отведений. Больного укладывают на кушетке, кожу конечностей обрабатывают спиртовым раствором, салфетки смачивают гипертоническим раствором NaC1 и накладывают электроды по схеме. 1 стандартное отведение : правая рука + левая рука, 2 отведение: правая рука + левая нога, 3 отведение: левая рука + левая нога. На вход усилителя подается контрольный милливольт (калибровка прибора) , регистрируется амплитуда кривой. Затем поочередно записывается ЭКГ с трех стандартных и грудных отведений.

2. Принципы анализа электрокардиограммы. Вначале определяют интервал Р – Q , т.е. время необходимое для проведения возбуждения от предсердий к желудочкам. Для этого, зная скорость продвижки ленты (к примеру 25 мм в сек) определяют время прохождения 1 мм ленты ( в данном случае 1:25 = 0,04 сек). Умножая количество мм от Р до Q на 0,04 получаем интервал Р-Q ( в норме он равен 0,16 – 0,18 сек).

Затем определяем высоту (вольтаж) зубцов R . Исходя из данных калибровки определяем значение 1 мм ( например 1 контрольный милливольт дал высоту в 10 мм, значит один мм равен 0,1 милливольта). Умножая высоту зубца R на 0,1 мв получаем вольтаж зубца. В норме вольтаж зубца R составляет 0,6 – 1,6 мв.

3. Баллистокардиография . Метод основан на регистрации смещения тела при выбросе крови левым желудочком («отдача» подобно тому, как выстрел снаряда из орудия). Для записи БКГ используется баллистокардиограф, чувствительные датчики преобразуют механические колебания в электрические. Баллистокардиограмма представляет собой ряд зубцов, форма которых дает возможность судить о механической деятельности сердца, т.е. о сократительной функции миокарда.

4. Фонокардиография, ее анализ. Метод позволяет исследовать звуковые явления, сопровождающие сердечную деятельность ( тоны сердца). Используется фонокардиограф. Запись ФКГ сопровождают параллельной регистрацией ЭКГ. В процессе анализа ФКГ обозначают первый и второй тоны сердца , а также зубцы на ЭКГ. Подсчитывают продолжительность первого тона и первой паузы, второго тона и второй паузы сердца. Определяют, какой фазе сердечной деятельности соответствуют первый и второй тоны.

5. Анализ проведения возбуждения по сердцу. Опыт Станниуса.

См. «Физиология сердца и сосудов», Уфа, 1988 г. , стр 7-9.

6. Анализ кривой артериального давления, записанной в остром опыте.

На кривой артериального давления различают три рода волн: пульсовые волны, дыхательные волны, сосудистые волны. Волны первого порядка - пульсовые – связаны с работой сердца: во время систолы кровяное давление увеличивается и кривая АД поднимается вверх, во время диастолы кривая АД понижается ( в норме волн первого порядка в среднем 60-80 в мин.). Волны второго порядка связаны с фазами дыхания: к концу вдоха давление крови повышается в связи с увеличением притока венозной крови к сердцу вследствие присасывающего действия грудной клетки во время вдоха, к концу выдоха давление крови понижается ( в норме волн второго порядка около 16-18 в мин.).

Волны третьего порядка связаны с тонусом сосудодвигательного центра: при повышение тонуса сосудодвигательного центра АД несколько повышается и наоборот при понижении тонуса центра АД несколько снижается ( в норме волны третьего порядка не встречаются или же около 6-9 в мин.).

7. Определение артериального давления ( способы Рива-Роччи и Короткова).

См. «Физиология сердца и сосудов», Уфа, 1988 г., стр 27-28.

8. Пальпаторное исследование пульса, его свойства.

См. «Физиология сердца и сосудов», Уфа,1988 г., стр.23-24.

9. Сфигмография, ее анализ. Сфигмография – это графическая регистрация артериального пульса с помощью сфигмографа. На кривой сфигмограммы различают восходящую часть кривой – анакроту и нисходящую часть – катакроту. На нисходящей части кривой различают дикроту. Анакрота соответствует систоле сердца, катакрота – диастоле. Дикротический подьем на кривой соответствует удару систолического обьема крови о захлопнувшиеся полулунные клапаны аорты при выбросе крови из сердца.

10. Флебография, ее анализ. Флебография означает запись венного пульса на яремной вене. На кривой флебограммы различают следующие зубцы: a, c, v. Зубец а возникает во время систолы правого предсердия, когда сокращение сфинктра в устье полых вен является препятствием для продвижения венозной крови. Зубец с является передаточным от колебаний сонной артерии ( яремная вена и сонная артерия в области шеи идут рядом). Зубец v возникает во время систолы правого желудочка, когда захлопнувшийся атриовентрикулярный клапан является препятствием для продвижения венозной крови.

Тема:Дыхание

1. Спирография. Метод регистрации дыхательных объемов, позволяющий судить о показателях легочной вентиляции. После наложения на нос пациента зажимов включается протяжка ленты спирографа. Испытуемый в течение 3-4 мин. спокойно дышит.Вначале регистрируется дыхательный объем, затем по команде испытуемый производит максимально глубокий вдох и, не задерживая дыхание, максимально глубокий выдох. Затем осуществляется анализ и оценка спирографического исследования. Вычисляют дыхательный объем, резервный объемы вдоха и выдоха и наконец ЖЕЛ (жизненная емкость легких).

2. Спирометрия. Метод регистрации ЖЕЛ и составляющих ее объемов воздуха. ЖЕЛ – это наибольшее количество воздуха, которое может человек выдохнуть после максимального вдоха. В состав ЖЕЛ входит: дыхательный объем - объем вдыхаемого и выдыхаемого воздуха в покое ( в среднем 500 мл); резервный объем вдоха - максимальный объем воздуха, который можно дополнительно вдохнуть после спокойного вдоха ( в среднем 1500 – 1800 мл); резервный объем выдоха – максимальный объем воздуха, который можно выдохнуть после спокойного выдоха ( в среднем 1000 – 1400 мл) . Для работы протирают мундштук спирометра спиртом. Испытуемый делает максимально глубокий выдох в спирометр. По шкале определяют ЖЕЛ. Исследование повторяют несколько раз.

3. Пневмография. Это метод регистрации дыхательных движений. Позволяет определить частоту и глубину дыхания, а также соотношение продолжительности вдоха и выдоха.Манжетку от сфигмоманометра укрепляют на груди испытуемого и соединяют с помощью резиновых трубок с капсулой Марея. Писчик, укрепленный на капсуле, регистрирует кривые: во время вдоха кривая поднимается вверх, во время выдоха – опускается вниз.

4. Определение минутной вентиляции легких. Величина дыхательного объема легких умножается на частоту дыхания в минуту. В норме минутный объем дыхания составляет 3,2 – 10,0 л.

5. Подсчет дыхательных движений за 1 минуту. У взрослого человека число дыхательных движений составляет 12-18 в мин. При мышечной работе частота дыхания увеличивается. На записанной пневмограмме расчитывают количество дыхательных движений в минуту при разных условиях регистрации .

Тема: Пищеварение.

1. Исследование моторики желудочно-кишечного тракта у животных и человека. У животных в остром опыте под наркозом вскрывается брюшная полость, обнажается желудок, делается небольшой разрез по большой кривизне желудка. В желудок вводится резиновый баллончик, связанный системой трубочек с капсулой Марея. На кимограмме регистрируется кривая. При усилении моторики желудка кривая поднимается вверх, при понижении моторики – наоборот. Также регистрируется моторика кишечника. Выявляется влияние раздражения блуждающего нерва на моторную функцию ЖКТ ( моторика усиливается), введение в кровь ацетилхолина ( усиление моторики), адреналина ( уменьшение моторики) и т.д. У человека моторная функция ЖКТ исследуется методом электрогастрографии ( регистрация биотоков желудка).

2. Исследование секреторной деятельности пищеварительных желез у человека и животных. У животных секреторная функция пищеварительных желез исследуется с помощью наложения фистулы того или иного пищеварительного тракта или выводных протоков пищеварительных желез, например фистула протока слюнной железы, фистула желудка, фистула протока пожделудочной железы, фистула желчного выводного протока и др. У человека для изучения слюноотделения слюну получают при сплевывании после полоскания рта. Чистую слюну крупных слюнных желез получают путем катетеризации их протоков и с помощью капсулы Лешли-Красногорского. Для изучения секреторной деятельности желудочных желез, поджелудочной железы, тонкой кишки, желчевыделения используют зондовые и беззондовые методы. К зондовым методам относится: желудочное и дуоденальное зондирование. Беззондовые методы сводятся к определению активности ферментов пищеварительных желез в крови и моче. Используется также эндорадиозондирование с помощью радиокапсул и др.

Тема: Физиология возбудимых тканей

1. Методы изучения возбудимости нервов и мышц. Хронаксиметрия. Возбудимость нервов и мышц можно изучать с помощью электрофизиологических методов с использованием электродов и микроэлектродов. Хронаксия отражает минимальное время, в течение которого ток, равный удвоенной реобазе, должен действовать на ткань, чтобы вызвать ее возбуждение. Хронаксиметрия – это метод определения двигательной хронаксии у человека, при этом учитывается не только пороговая сила раздражителя, но и время действия раздражителя на ткань.

2. Экспериментальные методы исследования биоэлектрических явлений. Опыты Гальвани и Маттеучи. Биоэлектрические явления в возбудимых тканях можно обнаружить биологическими пробами и электрофизиологическими методами. 1 опыт Гальвани: готовят препарат двух задних лапок лягушки и подвешивают на штативе за медный крючок медно-цинковой пластинки. При касании лапки о цинковую пластину лапка всякий раз сокращается. Сокращение лапки можно вызвать действием гальванического пинцета ( одна бранша сделана из меди, а другая – из железа). Причиной сокращения лапки в 1 опыте Гальвани является разность металлов, что обусловливает разность потенциалов. Во 2 опыте Гальвани обошелся без металлов. Суть опыта: готовят нервно-мышечный препарат из задней лапки лягушки, тщательно препарируя седалищный нерв. В нижней трети бедра повреждают икроножную мышцу и затем на нее набрасывают с помощью стеклянных палочек седалищный нерв таким образом, чтобы нерв одновременно коснулся поврежденного и неповрежденного участков мышцы. При этом мышца отвечает сокращением. Причиной сокращения мышцы во 2 опыте Гальвани является разность потенциалов между поврежденным ( электроотрицательный заряд мембраны) и неповрежденным (электроположительный заряд мембраны) участками мышцы. Опыт Маттеучи сводится к раздражению нерва токами действия скелетной мышцы (вторичный тетанус). Суть опыта: готовят два нервно-мышечных препарата. Нерв одного препарата набрасывают на мышцу второго препарата. Нерв первого нервно-мышечного препарата подвергают ритмическому раздражению электрическим током. При этом наблюдают тетаническое сокращение обеих лапок. Причиной сокращения второй лапки в опыте Маттеучи являются токи действия, возникающие на поверхности первой мышцы при ее возбуждении.

3. Экспериментальное доказательство законов проведения возбуждения по нервному волокну. Закон двустороннего проведения возбуждения по нервному волокну: по нервному волокну возбуждение способно распространяться в обе стороны от места нанесения раздражения. Доказательство этого закона можно получить в опыте с регистрацией потенциалов действия в нервном волокне с использованием электродов для регистрации и стимуляции, усилителя биоэлектрических сигналов, регистратора, стимулятора и системы для обработки физиологической информации. При раздражении нервного волокна посередине с помощью раздражающего электрода можно зарегистрировать потенциалы действия на концах нерва с помощью отводящих электродов.

Закон физиологической непрерывности: распространение возбуждения по нервному волокну возможно только в том случае, если сохранена его анатомическая и физиологическая целостность. Физиологическую непрерывность нерва можно нарушить при перевязке нервного волокна, его охлаждения или воздействия фармакологических веществ, например, новокаина. При этом нарушается физиологическая целостность нерва и его проводимость.

4. Определение скорости распространения возбуждения в периферических нервах.

Для работы необходима установка для регистрации потенциала действия нерва (усилитель , катодный осциллограф, стимулятор), раздражающие и регистрирующие электроды. Ход работы: отпрепарированный седалищный нерв лягушки накладывают на стимулирующие и отводящие электроды на определенном расстоянии. Измеряют расстояние между электродами и получают численное значение величины S. На экране осциллографа добиваются появления одновременного артефакта раздражения (момента раздражения нерва) и потенциала действия нерва. Измеряют интервал от артефакта раздражающего тока до начала восходящей фазы ПД. Включают калибратор времени и определяют численное значение Т, т.е. время прохождения волной возбуждения расстояния между стимулирующими и отводящими электродами. По формуле V = S/Т определяют скорость проведения возбуждения по нерву.

5. Динамометрия. Динамометрия – позволяет измерить силу сокращений различных мышечных групп. Динамометрия относится к основным приемам исследования движений человека, в частности, измерение и регистрация различного рода механических проявлений работы мышцы.

6. Электромиография Это метод регистрации электрической активности мышц с помощью электромиографа. Электромиография используется в диагностических целях, при заболевании мышц, а также при функциональных исследованиях двигательного аппарата. Для отведения биопотенциалов мышц человека чаще используют накожные электроды, которые укрепляют непосредственно над исследуемой мышцей, но могут использоваться и погруженные электроды в виде тонких игл. Электромиограмму записывают при сгибании пальцев руки с легким, средним и максимальным усилием.

Тема: Обмен веществ и энергии

1. Метод определения расхода энергии. Прямая и непрямая калориметрия.

Прямая калориметрия - это метод точного определения основного обмена ( основной обмен означает расход энергии, необходимый для поддержания жизнедеятельности организма и постоянной температуры в условиях физиологического покоя) с помощью биокалориметров – герметизированных и хорошо теплоизолированных камер, по трубкам которых циркулирует вода. Тепло, выделяемое находящимся в камере человеком или животным, нагревает циркулирующую воду. По количеству протекающей воды и изменению ее температуры расчитывают количество выделенного организмом тепла. Однако это дорогостоящий метод и он широко не применяется на практике.

Непрямая калориметрия – это косвенное определение выделяемого тепла на основе учета динамики дыхательного газообмена. Состоит из 4 этапов: собирание выдыхаемого воздуха в газообменный мешок Дугласа; определение минутного объема дыхания с помощью газовых часов; анализ газового состава выдыхаемого воздуха; расчет по полученным данным газообмена расхода энергии за сутки. При этом определяется дыхательный коэффициент – отношение выделенного СО2 к поглощенному О2 , находится калорический эквивалент кислорода при данном дыхательном коэффициенте. Умножая объем поглощенного за 1 мин. кислорода на калорический эквивалент кислорода находят расход энергии за минуту, за час, за сутки.

2. Метод полного и неполного газового анализа. Метод полного газового анализа проводится с учетом количества потребленного кислорода и выделенного углекислого газа с последующим расчетом теплопродукции – смотри непрямую калориметрию.

Метод неполного газового анализа осуществляется только по учету поглощенного кислорода с последующим расчетом теплопродукции.

3. Определение дыхательного коэффициента, его значение для расчета расхода энергии. Дыхательный коэффициент означает отношение выделенного углекислого газа к поглощенному кислороду. С помощью газоанализа определяют количество выделенного углекислого газа и количество поглощенного организмом кислорода. Например выделено 3,5 мл СО2 , поглощено 4,0 мл О2 ; дыхательный коэффициент будет равен 3,5 : 4,0 = 0,87. Дыхательный коэффициент изменяется в зависимости от рода окисляющихся веществ, поэтому он характеризует качественную сторону обмена. ДК показывает, какой именно калорический эквивалент кислорода надо взять для расчета расхода энергии, так как каждому ДК соответствует свой калорический эквивалент О2.

4. Определение основного обмена. Основным обменом называется расход энергии, необходимой для поддержания жизнедеятельности организма и постоянной температуры в условиях физиологического покоя. Его определяют в условиях полного мышечного покоя, натощак и при температуре комфорта (18-20 градусов С). Основной обмен зависит от пола, возраств, массы и длины тела. Величина основного обмена равна приблизительно 1 ккал на 1 кг массы тела в час или 1500-1700 ккал/сутки. Должный основной обмен определяют по формулам и таблицам.

5. Принципы составления пищевого рациона. Цель составления пищевого рациона – подсчитать общую калорийность пищевого рациона за сутки с последующим соспоставлением его с энергозатратами организма, что позволит выяснить, покрывает ли пищевой рацион энергозатраты. Пищевой рацион составляется испытуемым за прошедший день, пользуясь специальными таблицами калорийности продуктов. При составлении пищевого рациона необходимо руководствоваться следующим: в пищевом рационе должно содержаться оптимальная для людей данного вида труда количество белков, жиров и углеводов; калорийность пищевого рациона должна покрывать суточный расход энергии; в пищевой рацион должны входить витамины, минеральные соли, вода.

Тема: Центральная нервная система

1. Методы изучения функций ЦНС. К методам изучения функций ЦНС относятся: перерезка мозга или отделов мозга; удаление отделов мозга; раздражение отделов мозга электрическим током или химическими раздражителями; электрофизиологический метод; микроэлектродный метод регистрации активности клеток; электроэнцефалография; метод вызванных потенциалов; исследование рефлекторной деятельности и др.

2. Определение времени рефлекса. ( по Тюрку). Погружают одну из задних лапок спинальной лягушки в стаканчик с 0,1% раствором серной кислоты и одновременно пускают в ход метроном с частотой 1 гц или секундомер. Отсчитывают время от момента погружения лапки в кислоту до начала ответной реакции. Определив время рефлекса препарат обмывают водой. Повторяют опыт 2-3 раза с интервалом 2-3 мин. и вычисляют среднее время рефлекса для данной силы раздражения. Затем измеряют время рефлекса с 0,3%, 0,5%, 0,7%, 1,0% растворами кислоты. Сделать вывод ( чем сильнее раздражение, тем короче время рефлекса).

3. Опыт И.М.Сеченова (центральное торможение). Производят декапитацию лягушки разрезом позади глаз и подвешивают ее на штативе за нижнюю челюсть. После окончания спинального шока (3-5 мин) определяют время рефлекса по Тюрку. Затем снимают лягушку со штатива, разрезают кости черепа, обнажают мозг лягушки, делают разрез под зрительными буграми и снова подвешивают на штативе. Кладут кристаллик поваренной соли на место разреза и сразу же определяют время рефлекса. При этом время рефлекса удлиняется . Удалив соль, обмывают область зрительных бугров физиологическим раствором и спустя 5 мин. снова определяют время рефлекса по Тюрку. Как правило время рефлекса возвращается к первоначальному.

4. Стереотаксический метод. В электрофизиологических экспериментах и нейрохирургической клинике стереотаксический метод используется для точного определения положений различных глубинных структур головного мозга и введения в них различных электродов, микроинструментов. В стереотаксическом приборе фиксируется голова животного, сверлится отверстие в черепе и с помощью манипулятора вводят электроды в структуры мозга на соответствующую глубину. Введенные в мозг электроды могут оказывать раздражающее или регистрирующее действие.

5. Электроэнцефалография, анализ ЭЭГ. Это запись ритмической электрической активности структур головного мозга, т.е. колебаний потенциалов мозга. Регистрация ЭЭГ у человека осуществляется при наложении электродов на кожу головы через специальную токопроводящую пасту или салфетку, смоченную раствором хлорида натрия. Различают 4 основных ритма на кривой ЭЭГ: α (альфа), β (бета), θ (тета), Δ (дельта). Альфа-ритм имеет частоту от 8 до 13 в сек., регистрируется в состоянии лежа или сидя с закрытыми глазами в условиях умственного и физического покоя. Бета-ритм имеет частоты выше 13 ( в среднем 70 в сек), регистрируется в бодрствующем состоянии, при умственной работе. Тета-ритм имеет частоту от 4 до 7 в сек., регистрируется при неглубоком наркозе, неглубоком наркозе, при болевых раздражениях, отрицательных эмоциях. Дельта-ритм имеет частоту от 0,5 до 3 в сек., регистрируется во время глубокого сна, глубокого наркоза.

6. Метод регистрации вызванных потенциалов в коре больших полушарий головного мозга. Этот метод является одной из модификаций электроэнцефалографического метода. Вызванные потенциалы (ВП) – это изменение ЭЭГ, наступающее в ответ на кратковременно действующее раздражение экстеро- или интерорецепторов. Вызванные потенциалы возникают и при кратковременной электрической стимуляции мозговых структур, функционально связанных с той областью мозга, в которой они регистрируются. ВП представляют собой отрезок ЭЭГ, записанной в момент сенсорной стимуляции, поэтому они также образуются постсинаптическими колебаниями мембранного потенциала и спайками многих сотен и тысяч нейронов, активность которых отводится данным электродом . С помощью ВП можно проследить взаимосвязь и взаимодействие различных отделов мозга, провести анализ локализации представительства сенсорных функций, связей между структурами мозга, изучить условнорефлекторную деятельность мозга и др.

7. Микроэлектродный метод регистрации активности нейронов головного и спинного мозга. Этот метод позволяет получить информацию о механизмах и особенностях формирования возбуждения и торможения отдельных клеток мозга, о характере ответных рекций на качественно различные раздражения, принципах кодирования информации в ЦНС и др. Используют 2 способа регистрации активности клеток: внутриклеточный и внеклеточный. Для внеклеточной регистрации используют сравнительно толстые стеклянные и металлические электроды. Для внутриклеточной регистрации активности клеток используют чаще всего стеклянные микропипетки, заполненные раствором электролита, имеющие диаметр кончика 0,5 – 1,0 мкм.

8. Исследование проприоцептивных рефлексов (сухожильных) – см. «Общая физиология центральной нервной системы», Уфа, 2001, стр. 7-8.

Тема: Анализаторы.

1. Исследование воздушной и костной проводимости звука ( слуховые пробы Вебера и Риннэ) . См. Руководство к практическим занятиям по физиологии, Москва, Медицина, 1988, стр 236-237.

2. Аудиометрия . См. там же стр. 234- 236 ( работа № 98)

3. Определение остроты слуха.

4. Определение остроты зрения. См. там же стр. 228 (работа № 93).

5. Определения поля зрения . См. там же , стр. 229 -232 ( работа № 95)

Тема: Высшая нервная деятельность

1. Методы изучения функций коры головного мозга. К методам изучения функций коры мозга относятся: удаление всей коры мозга или отдельных ее участков, раздражение коры электрическим током или химическими раздражителями, электрофизиологический метод, микроэлектродный метод регистрации активности нейронов коры мозга, электроэнцефалография, метод регистрации вызванных потенциалов в коре мозга, клинический метод (наблюдение в клинике за больными с поражениями ЦНС), метод условных рефлексов и др.

2. Методика выработки условного рефлекса. При соблюдении условий для выработки условного рефлекса ( совместное применение условного и безусловного раздражителей, опережающее действие условного раздражителя, достаточно сильное безусловное подкрепление, достаточный тонус коры мозга, отсутствие посторонних раздражителей) включается условный (индиферентный) раздражитель, например Метроном 120, через несколько сек. На фоне действия М120 дается безусловное подкрепление (например, пища). И так несколько раз повторяется. В начале ответная реакция на М120 отсутствует, хотя на дачу пищи происходит слюноотделение. После выработки условного рефлекса возникает ответная слюноотделительная реакция и на М120. Индиферентный раздражитель- М 120 - становится условным раздражителем , он сигнализирует о предстоящей даче пищи.

3. Методы выработки различных видов внутреннего торможения. К внутреннему торможению относятся следующие виды: угасание, условный тормоз, дифференцировка и запаздывание. Для выработки внутреннего торможения необходимы 2 условия: отмена безусловного подкрепления и отсутствие посторонних раздражителей. Для выработки угасания необходимо отменить безусловное подкрепление и постепенно условный рефлекс угасает, при этом ответная реакция на условный раздражитель постепенно исчезает. Для выработки условного тормоза необходимо сочетать дачу условного раздражителя с каким-либо прибавочным агентом и эту комбинацию не подкрепляют безусловным раздражителем . При этом постепенно ответная реакция на комбинацию условного раздражителя с прибавочным агентом исчезает. Для выработки дифференциров