Гемоглобин крови, его виды, роль. Определение содержания гемоглобина в крови

44) Гемоглобин крови, его виды, роль. Определение содержания гемоглобина в крови

Гемоглоби́н — сложный железосодержащий белок животных, обладающих кровообращением, способный обратимо связываться с кислородом, обеспечивая его перенос в ткани. У позвоночных животных содержится в эритроцитах, у большинства беспозвоночных растворён в плазме крови (эритрокруорин) и может присутствовать в других тканях. Молекулярная масса гемоглобина человека — около 66,8 кДа. Молекула гемоглобина может нести до четырёх молекул кислорода. Один грамм гемоглобина может переносить до 1.34 мл. O2

Нормальным содержанием гемоглобина в крови человека считается: у мужчин — 130—160 г/л (нижний предел — 120, верхний предел — 180 г/л), у женщин — 120—160 г/л; у детей нормальный уровень гемоглобина зависит от возраста и подвержен значительным колебаниям. Так, у детей через 1—3 дня после рождения нормальный уровень гемоглобина максимален и составляет 145—225 г/л, а к 3—6 месяцам снижается до минимального уровня — 95—135 г/л, затем с 1 года до 18 лет отмечается постепенное увеличение нормального уровня гемоглобина в крови[5].

Выделяют четыре формы гемоглобина:

Оксигемоглобин - содержит двухвалентное железо и способен связывать кислород. Он переносит газ к тканям и органам.

Метгемоглобин - содержит трехвалентное железо, не вступает в обратимую реакцию с кислородом и обеспечивает его транспорт.

Карбоксигемоглобин - образует соединение с угарным газом. Он обладает высоким сродством с окисью углерода, поэтому комплекс распадается медленно. Это обусловливает высокую ядовитость угарного газа.

Миоглобин - по структуре близок к гемоглобину и находится в мышцах, особенно в сердечной. Он связывает кислород, образуя депо, которое используется организмом при снижении кислородной емкости крови. За счет миоглобина происходит обеспечение кислородом работающих мышц.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ МЕТОДОМ САЛИ

Определение количества гемоглобина в крови производится колориметрическим методом Сали с помощью специального прибора – колориметра (гемометра Сали), который состоит из трех пробирок одинакового диаметра. Одна из них пустая, а в других, запаянных с обоих концов, содержится стандартный раствор солянокислого гематина, соответствующий концентрации Нb 166,7 г/л. Все три пробирки вставлены в небольшой штатив, задняя стенка которого сделана из стекла молочного цвета. К гемометру приложена пипетка емкостью 0,02 мл (или 20 мм3 ).

Цель: определить абсолютное и относительное содержание гемоглобина. Абсолютное содержание гемоглобина – количество гемоглобина в граммах в 1 л крови.

В норме концентрация гемоглобина (абсолютное содержание) у мужчин – 130-160 г/л, у женщин – 120- 140 г/л. Относительное содержание гемоглобина – это процентное содержание гемоглобина от высшего предела нормы (166,7 г/л) и составляет для мужчин – 80-90%, а для женщин – 70-80%.

Оснащение: гемометр Сали, кровь, капилляр на 0,02 мл, 0,1 n р-р НСl, пипетка, дистиллированная вода. Ход работы: в градуированную пробирку наливают 0,1 n (децинормальный) раствор соляной кислоты до нижней кольцевой метки, а затем при помощи скарификатора делают укол в мякоть пальца левой руки. Первую каплю крови осторожно снимают ватой, а из последующих набирают в пипетку 0,02 мл крови, тщательно обтирают кончик пипетки снаружи и опускают кровь на дно пробирки так, чтобы верхний слой соляной кислоты остался прозрачным. Промывают пипетку соляной кислотой, не вынимая из раствора, чтобы сохранить определенный объем взятой крови. После этого осторожно встряхивают содержимое и наблюдают за изменением окраски в течение 5 минут. За это время полностью происходит образование солянокислого гематина. Небольшой пипеткой, приложенной к гемометру, набирают дистиллированную воду и добавляют в пробирку к исследуемой жидкости до тех пор, пока цвет раствора не сравняется с цветом стандартных пробирок. При этих условиях процент гематина, а, следовательно, гемоглобина будет одинаков в стандартной и исследуемой крови.