Сглотнуть слюну, сделать шпателем соскоб клеток со слизистой щеки.

1. Сглотнуть слюну, сделать шпателем соскоб клеток со слизистой щеки.

2. Содержимое соскоба равномерно нанести на предметное стекло и окрасить метиленовым синим (1-2 капли на препарат) в течение 3-5 минут.

3. Накрыть препарат покровным стеклом.

4. Положить на покровное стекло вчетверо сложенный лист фильтровальной бумаги и осторожно надавить на него.

5. Исследовать препарат при большом увеличении микроскопа, найти эпителиальные клетки слизистой оболочки с окрашенными ядрами и крупные, плотные глыбки хроматина, прилегающие к ядерной оболочке (половой хроматин или тельце Барра) (при необходимости использовать иммерсионное масло).

6. Проанализировать 15-20 клеток в каждом препарате. Посчитать число ядер с тельцами Барра. Отметить количество телец Барра в каждом ядре.

7.Сравнить данные у мужчин и женщин. Обратить внимание, что в клетках мужчин тельце Барра не встречается, а в женских клетках они встречаются в 40-60% клеток (остальные находятся на стадии деления) по одному тельцу в ядре.

Задание …. Выделение ДНК из буккального эпителия.

Реактивы и оборудование. 8% раствор хлорида натрия, 25% раствор детергента, дистилированная вода, холодный 96% этиловый спирт, водяной термостат, прогретый до 50℃, стакан, пробирка, пипетки

Подготовка к работе:

1. Подготовить раствор детергента: смешать 25 мл моющего средства («Фейри») и 75 мл дистиллированной воды. Делать аккуратно, чтобы избежать образования большого количества пены.

2. Поместить спирт в морозильную камеру.

Протокол:

1. В пробирку налить 1.5 мл8% раствора хлорида натрия

2. В стаканчик налить 10 мл воды, поместить ее в рот (пожевать щеки), активно прополоскать рот водой около 30 секунд, выплюнуть все это обратно.

3. В пробирку из п.1 добавить 3 мл воды с буккальным эпителием.

4. Добавить в пробирку 1,5 мл детергента

5. Аккуратно перемешать содержимое пробирки, не перебалтывая.

6. Поместить пробирку в термостат на 10 минут.

7. Вынуть пробирку, остудить.

8. Держа пробирку под углом аккуратно добавить 5 мл 95% холодного этилового спирта, чтобы он наслоился на имеющийся раствор. Отметить происходящее на границе двух растворов: спирта и лизата: формирование облака белых нитей – ДНК. Она не растворяется в спирте.

В рабочей тетради около пунктов 5-6 и 8дать развернутое описание происходящего в пробирке.

⇐ Предыдущая 12