|
||||
Методы диагностики. вирусных инфекций. Вирусоскопический метод. а) световая микроскопия;. б) электронная микроскопия;. е) метод иммунной электронной микроскопии в основе этого метода лежит взаимодействие антител с вирусами при смешивании вируссодержащегоМетоды диагностики вирусных инфекций |
1 Вирусоскопический метод | |||
а) световая микроскопия;
б) электронная микроскопия;
е) метод иммунной электронной микроскопии в основе этого метода лежит взаимодействие антител с вирусами при смешивании вируссодержащего материала со специфической сывороткой; г) иммунофлюоресцентный метод (прямой и непрямой) с использованием флюоресцирующих сывороток. | Применяется для обнаружения крупных вирусов (оспы, гриппа) в окраске по Морозову и внутриклеточных вирусных включений в окраске по Туревичу и Муромцеву. Дает возможность обнаружить ультраструктуру вириона. В результате реакции. образуется микропреципитаты , состоящие из вирусных частиц, покрытых своеобразным «венчиком». При положительной реакции в люминесцентном микроскопе наблюдается специфическое свечение. Применяется для экспресс диагностики. | |||
2. Вирусологический метод. | ||||
Этот метод основан на культивировании вирусов с использованием культур клеток или куриных эмбрионов и их последующей индикации и идентификации. Индикацию вирусов осуществляют: - по характеру специфических поражений оболочек и тела эмбриона; по феномену гемагглютинации;
- по цитопатическому действию вируса (ЦПД); - по образованию в клетках включений; - по образованию бляшек; - по феномену гемадсорбции; - по «цветной» реакции; Для идентификации вирусовиспользуют материал от больного ( смыв из носоглотки), аллантоисную или амниотическую жидкость заражённого куриного эмбриона, культуру клеток. Ставят реакции: -торможения (задержки) гемагглютинации(РТГА);' - торможения (задержки) гемадсорбции( РТГАд); - связывания комплемента (РСК); - нейтрализации (РН) | О развитии вируса свидетельствует изменение цвета оболочек, появление белых бляшек ( при натуральной оспе), гибель эмбриона. Склеивание эритроцитов под действием гемагглютинина вирусов. Морфологические изменения клеток -вплоть до их гибели . Включения представляют собой скопления вирусных частиц, вирусных белков или клеточного материала в цитоплазме или ядре клеток. Бляшки или негативные «колонии» вирусов - участки разрушенных вирусами клеток на однослойных клеточных культурах. Клеточные культуры , заражённые вирусом, способны адсорбировать на своей поверхности эритроциты. При репродукции вирусов в культуре клеток нарушается их нормальный метаболизм и среда сохраняет свой первоначальный цвет. Для постановки реакций идентификации используются специфические иммунные сыворотки, позволяющие определить вид, тип, вируса. | |||
| 3. Серологический метод. | |||
Применяется для обнаружения в сыворотке крови больного специфических противовирусных антител в реакциях :
|
||||
|