Подготовка предметных стёкол

Подготовка предметных стёкол

Предметные стекла, применяемые для получения гистологических препаратов, необходимо предварительно подготовить. Исключение составляют готовые к использованию и специально упакованные импортные предметные стекла.

1. Мойка в тёплой мыльной воде или кипятят 2-3% растворе гидрокарбоната натрия.

2. Ополаскивают горячей водой.

3. Промывают проточной водой несколько часов.

4. Протирают тканью

5. Обезжиривание:

помещают на несколько суток в смесь Никифорова:эфир+96%спирт.

Или на несколько дней помещают в крепкий раствор соляной кислоты

Или 100гр бихромата калия растворяют в 1000мл горячей воды, охлаждают и по стеклянной палочке по каплям добавляют концентрированную серную кислоту. Выдерживают 2-3 дня, промывают 1-2 дня.

Контроль: капля воды по обезжиренному стеклу расходится тонким слоем, а не собирается каплей.

6. Извлекают пинцетом, протирают и складывают в коробочку.

Для лучшей фиксации срезов на стекле его предварительно смазывают:

смесью белка с глицерином.(свежий яичный белок взбивают, фильтрируют через крупнопористый фильтр, смоченный дистиллированной водой, размешивают с равным количеством глицерина и добавляют несколько кристаллов тимола.Смесь хранится несколько месяцев.

15мл сыроватки крови+5мл дистиллированной воды+6мл-5% формалина и фильтруют. Она лучше за предыдущий, так как не даёт фон.

Для нанесения белка на обезжиренные предметные стекла в одну руку берут 5—6 стекол в виде веера, а в другую — чистую стеклянную палочку, которой наносят белок, прикасаясь к каждому стеклу. Затем белок растирают обезжиренным спиртом пальцем по поверхности стекла до его середины, прилагая большое усилие. Некоторые авторы рекомендуют натертые белком стекла прогревать в термостате, но опыт показывает, что это излишне, так как после переноса срезов на стекла их помещают в 34 термостат или на специальный столик для просушивания, где одновременно происходит коагуляция белка.

Разработан способ фиксации среза к предметному стеклу без предварительного натирания последнего белком с глицерином. В ванночку с теплой дистиллированной водой капают несколько капель жидкого казеинового клея и перемешивают. В полученную мутноватую жидкость опускают срезы, расправляют препаровальной иглой и вылавливают на чистое обезжиренное стекло. Этот способ дает неизменно хороший эффект и вокруг среза отсутствует окрашенный фон, как это часто бывает при применении белка.