Главная

Контакты

Случайная статья

• Автоматизация
• Антропология
• Археология
• Архитектура
• Биология
• Ботаника
• Бухгалтерия
• Военная наука
• Генетика
• География
• Геология
• Демография
• Деревообработка
• Журналистика
• Зоология
• Изобретательство
• Информатика
• Искусство
• История
• Кинематография
• Компьютеризация
• Косметика
• Кулинария
• Культура
• Лексикология
• Лингвистика
• Литература
• Логика
• Маркетинг
• Математика
• Материаловедение
• Медицина
• Менеджмент
• Металлургия
• Метрология
• Механика
• Музыка
• Науковедение
• Образование
• Охрана Труда
• Педагогика
• Полиграфия
• Политология
• Право
• Предпринимательство
• Приборостроение
• Программирование
• Производство
• Промышленность
• Психология
• Радиосвязь
• Религия
• Риторика
• Социология
• Спорт
• Стандартизация
• Статистика
• Строительство
• Технологии
• Торговля
• Транспорт
• Фармакология
• Физика
• Физиология
• Философия
• Финансы
• Химия
• Хозяйство
• Черчение
• Экология
• Экономика
• Электроника
• Электротехника
• Энергетика

Лабораторная работа №12. Количественный анализ раствора, содержащего флуоресцирующее вещество. Ход работы

Лабораторная работа №12

Количественный анализ раствора, содержащего флуоресцирующее вещество

Цель: определение концентрации рибофлавина в его инъекционном растворе методом флуориметрии.

Материалы и оборудование:флуориметр «ФЛЮОРАТ-02-3М»; кварцевые кюветы для флуориметрии 10х10мм; набор светофильтров; стандартный раствор рибофлавина 12,5 мкг/см³; раствор рибофлавина мононуклеотида в инъекциях (ампулы); весы аналитические; пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,00; 2,00; 5,00 см³; колбы мерные вместимостью 25,0; 100,0; 200,0 и 250,0 см³; колбы конические плоскодонные, вместимостью 500 и 100 см³.

Ход работы

 Для выполнения определения необходимо выбрать длины волн возбуждающего и регистрируемого излучений и соответствующие светофильтры, построить градуировочный график и с его помощью определить содержание рибофлавина в анализируемом растворе.

Интенсивность флуоресценции стандартного раствора рибофлавина измеряют в диапазоне длин волн 450-650 нм и определяют положение λ_max флуоресценции.

Приготовление серии растворов рибофлавина для градуировки анализатора. В пяти мерных колбах вместимостью 25,0 см³ готовят серию растворов рибофлавина с содержанием (мкг/см³): 0,25; 0,50; 0,75; 1,0. Следует уделить особое внимание чистоте используемой посуды и кювет. Мерные колбы тщательно промывают раствором соды, а кюветы – концентрированной соляной кислотой (под тягой), после чего многократно ополаскивают их водопроводной и два раза дистиллированной водой.

Измеряют интенсивность флуоресценции контрольного опыта (дистиллированная вода) и растворов стандартной серии в порядке увеличения концентрации люминофора (длина оптического пути – 1 см). По полученным данным строят градуировочный график в координатах «интенсивность флуоресценции (I) – концентрация рибофлавина, мкг/см³».

Определение содержания рибофлавина в инъекции.Ампулу с инъекцией рибофлавина аккуратно вскрывают и содержащийся в ней раствор количественно (смывая раствор со стенок ампулы не менее 7 раз дистиллированной водой) переносят в колбу вместимостью 200,0 см³, разбавляют до метки и перемешивают.

Разраб.

Лит.

Листов

Пров.

Н. контр.

Утв.

Градуировочный график (λ=450 нм)

мкг/см³

Содержание рибофлавина в анализируемом растворе находят по градуировочному графику, измерив интенсивность флуоресценции. Рассчитывают общее содержание рибофлавина в инъекции и сравнивают его с паспортными данными.

Расчет: _____________________________________________________________

_____________________________________________________________________

Вывод_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Контрольные вопросы

1. Что такое флуориметрия?

2. За счет чего происходит  первоначальный переход вещества из основного в возбуждённое состояние?

3. Чем отличается флуоресценция от фосфоресценции?

4. Что представляет собой спектр испускания флуоресценции?

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________